柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响

王青虎，敖苏日古嘎，包文林，何 祥，徐艳华

柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响

王青虎，敖苏日古嘎，包文林，何 祥，徐艳华

内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000

研究柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响。采用高脂乳剂建立大鼠高脂血症模型，给予辛伐他汀或柳蒿脂溶性部位进行干预，观察大鼠体质量及肝脏外观形态变化；采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中三酰甘油（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、总胆红素（total bilirubin，TBIL）、直接胆红素（direct bilirubin，DBIL）水平和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）活性；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠肝组织病理变化；采用免疫组化法检测各组大鼠肝组织单磷酸腺苷活化蛋白激酶α（adenosine monophosphate-activated protein kinase α，AMPKα）、固醇调节元件结合蛋白-1（sterol regulatory element binding protein-1，SREBP-1）和血管细胞黏附分子1（vascular cell adhesion molecule 1，VCAM 1）蛋白表达。与模型组比较，给药第30天，柳蒿脂溶性部位组大鼠体质量显著降低（＜0.05）；大鼠肝脏颜色暗红，体积稍小，表面光滑，油腻感轻，肝小叶结构完整，未见脂滴、脂肪样变性、空泡样变性，可见少量炎细胞浸润；大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平均明显降低（＜0.01），HDL-C水平显著升高（＜0.05）；大鼠肝组织SREBP-1和VCAM1蛋白表达水平显著降低（＜0.05），AMPKα蛋白表达水平明显升高（＜0.05）。柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠具有显著的调血脂和保肝作用，其作用机制可能为通过调节AMPKα、SREBP1和VCAM1蛋白的表达，从而调控血脂中TC、TG、LDL-C和HDL-C水平，维持体内脂质代谢平衡，避免肝脂化。

柳蒿脂溶性部位；高脂血症；血脂；肝功能；脂质代谢

随着人们生活水平的提高，生活习惯发生了巨大改变，高脂血症已成为危害人类健康的罪魁祸首，我国正常人群高脂血症的发病率为20%～40%，并以每天万人的速度递增[1]。高脂血症是指以血浆中一种或多种脂质成分，主要指三酰甘油（triglyceride，TG）和总胆固醇（total cholesterol，TC）异常增高为特征的代谢紊乱综合征[2]。目前，脂质代谢异常被认为是引起脂肪肝、糖尿病、冠心病、动脉粥样硬化等疑难杂症的首要危险因素[3-4]。目前临床上高脂血症的治疗仍然以化学药为主，虽然化学药疗效显著，市场潜力良好，但往往存在一定的不良反应[5]。因此，天然药物预防和治疗高脂血症、提前防治动脉粥样硬化、有效降低心脑血管疾病的发病率，逐渐成为研究的重点和热点[6-8]。

蒙医认为高脂血症属于“通拉嘎未消病”范畴，是人体因饮食起居以及其他因素的影响，体内“三根”（人体赖以进行生命活动的3种能量和基本物质——赫依、希拉、巴达干，称为三根）失去正常平衡，使体内新陈代谢紊乱致产生过多的恶血（病血）而形成的[9]。蒙医治疗此病以调理胃火及清除巴达干黏液为主，视病情选药，辨证施治。长期以来，蒙医药专家与学者在“通拉嘎未消”病方面积累了丰富的治疗方法和传统用药经验，临床疗效显著，并且不良反应小。

柳蒿Linn.系菊科多年生草本植物，蒙文名奥孙-协日乐吉，是内蒙古呼伦贝尔地区达斡尔民族的特色菜肴“库木勒”，营养丰富，被认为是“清热解酒”的绿色蔬菜。民间流传柳蒿具有清除巴达干黏液、健脾去火、解毒消炎、破血行淤、下气通络、利尿等功效，对高脂血症、高血压、糖尿病、脂肪肝、肝硬化等均有特殊的疗效和防治作用[10]。经查阅近年相关国内外文献可知，人们对柳蒿的使用仅仅停留在民间流传中，国内外专家和学者对其高脂血症的治疗作用未见报道。本课题组前期考察了柳蒿不同溶剂提取物对高脂血症模型大鼠的调血脂作用，发现其石油醚和二氯甲烷等亲脂性溶剂提取物的调血脂作用明显高于醋酸乙酯和正丁醇等亲水性溶剂提取物。从其石油醚和二氯甲烷提取物中主要分离得到化合物有脂肪酸类、炔烃类、苯丙素类及萜类等[11-13]。这些化合物具有多种生物活性，如兰香油奥具有调血脂[14]、抗炎、抗过敏和抗溃疡的作用[15]；丁香酚具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗过敏、解热、抑制血小板凝聚等作用[16]；α-亚麻酸能够降低血清TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、极低密度脂蛋白水平，升高血清高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）水平[17-18]。本研究以柳蒿脂溶性部位为切入点，采用高脂乳剂建立大鼠高脂血症模型，检测大鼠血脂水平、肝脏功能及脂质代谢相关蛋白表达，初步探讨柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响。

1 材料

1.1 动物

SPF级雄性SD大鼠50只，体质量（200±20）g，7周龄，购自辽宁长生实验动物中心，动物合格证号SCXK（辽宁）2017-0001。动物饲养于内蒙古民族大学蒙医药学院动物室，室温24 ℃，湿度40%，自由进食饮水，适应性饲养1周。动物实验经内蒙古民族大学附属医院国家药物临床试验机构伦理委员会批准（批准号NM-LL-2018-05-22-01）。

1.2 药材

柳蒿的嫩芽采集于内蒙古呼伦贝尔，经内蒙古民族大学蒙医药学院蒙药教研室布和巴特尔教授鉴定为菊科多年生草本植物柳蒿Linn.的嫩芽。柳蒿芽标本（No.20170627）保存于内蒙古民族大学蒙医药学院蒙药化学教研室。

1.3 药品与试剂

TC试剂盒（批号27630201）、TG试剂盒（批号27979801）、HDL-C试剂盒（批号24236201）、LDL-C试剂盒（批号23441801）、总胆红素（total bilirubin，TBIL）试剂盒（批号33628901）、直接胆红素（direct bilirubin，DBIL）试剂盒（批号32409501）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）试剂盒（批号3549601）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）试剂盒（批号34940601）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）试剂盒（批号34856601）购自上海罗氏诊断产品有限公司；辛伐他汀片（批号H20083840）由上海信谊万象药业股份有限公司提供；苏木素-伊红（HE）染色液（批号20190104）购自南京建成科技有限公司；中性树胶（批号20190106）购自上海慈洋仪器有限公司；10%中性福尔马林固定液购自合肥博美生物；组织包埋盒（批号19029）、黏附载玻片（批号188105）、显微镜盖玻片（批号132012）购自江苏世泰实验器材有限公司；单磷酸腺苷活化蛋白激酶α（adenosine monophosphate-activated protein kinase α，AMPKα）抗体（批号WL02254）、固醇调节元件结合蛋白-1（sterol regulatory element binding protein-1，SREBP-1）抗体（批号WL02093）、血管细胞黏附分子1（vascular cell adhesion molecule 1，VCAM1）抗体（批号WL02474）购自沈阳万类生物科技有限公司；HRP标记的山羊抗兔IgG抗体（批号31460）购自美国Thermo Fisher Scientific公司；山羊血清（批号SL038）、DAB显色液（批号DA1010）购自北京索莱宝科技有限公司。

1.4 仪器

Cobas c311型全自动生化分析仪（上海罗氏诊断产品有限公司）；HITACHI型低温离心机（日本国茨城县常陆那珂市）；SOPTOP型电子天平（舜宇恒平仪器有限公司）；BG10-3A型高速冷冻离心机（北京时代北利离心机有限公司）；BD/BC-518C型超低温冰箱（浙江星星冷链集成有限公司）；EG1150H型包埋机、RM2235型切片机、DM2500型光学显微镜（德国Leica公司）；SFG-02B型烘箱（湖北恒丰医疗器械）；BX51型数码照相显微镜（日本Olympus公司）。

2 方法

2.1 柳蒿脂溶性部位的制备

称取柳蒿芽20 kg，用二氯甲烷回流提取，提取液回收二氯甲烷，得到二氯甲烷提取物。二氯甲烷提取物上硅胶色谱柱，先用石油醚洗脱，然后用石油醚-醋酸乙酯（20∶1）洗脱。石油醚-醋酸乙酯（20∶1）洗脱液减压回收溶剂，即得柳蒿芽亲脂性部位（得率为24%）。为了考察柳蒿芽脂溶性部位化学信息及主成分的相对含量，本课题组前期研究中首先利用各种色谱技术对其进行分离，并经分离得到化合物的核磁共振数据分析，确定其结构式；然后采用气相色谱法对其主成分进行含量测定[11-13,19]。

2.2 高脂乳剂配制方法[20-21]

高脂乳剂配方成分为15%猪油、5%胆固醇、12.5%聚山梨酯80、10%丙二醇、1%脱氧胆酸钠和0.5%丙基硫氧嘧啶。将猪油30 g，放在200 mL烧杯中，磁力搅拌器上加热，40 ℃水浴中加热溶化，加入10 g胆固醇搅拌溶解，再加丙基硫氧嘧啶1 g，充分搅拌，加入适量水和聚山梨酯80，不断搅拌至乳化现象产生。同时，在另一烧杯中加入30 mL蒸馏水和丙二醇20 mL，加热至60 ℃，然后加入胆盐2 g，充分搅拌直到完全溶解，然后缓慢加水溶至100 mL。合并2个烧杯溶液至200 mL，即可得到稳定的脂肪乳剂。

2.3 高脂血症大鼠模型建立及给药

75只SD大鼠随机分为对照组、模型组、辛伐他汀（4 mg/kg）组和柳蒿脂溶性部位低、高剂量（90、180 mg/kg）组，每组15只。模型组和各给药组ig高脂乳剂（15 mL/kg）建立高脂血症模型[22]，对照组ig等体积蒸馏水，1次/d，连续10 d。第11天禁食不禁水12 h进行尾静脉采血，3500 r/min离心10 min，取血清检测血脂四项指标，评估造模效果。以TC、TG和LDL-C水平均显著升高，HDL-C水平显著降低作为造模成功依据。

去除造模未成功大鼠，每组各留下10只。每天上午各给药组ig以玉米油助溶的相应药物，对照组和模型组ig等体积玉米油；同时每天下午照造模方法模型组和各给药组ig高脂乳剂（15 mL/kg），连续30 d。大鼠禁食不禁水12 h，ip 10%水合氯醛（3 mL/kg）麻醉，腹主动脉采血5 mL，3500 r/min离心10 min，取血清保存于−20 ℃冰箱中，用于血脂四项和肝功能五项指标的检测。取肝组织用10%中性甲醛固定，用于制作石蜡切片、HE染色及免疫组化实验。

2.4 观察大鼠体质量变化

实验期间每10天称定大鼠体质量1次，以调整ig剂量，并观察柳蒿脂溶性部位对大鼠体质量变化的影响，并进行组间统计学分析。

2.5 观察大鼠肝脏外观形态

给药结束后，各组大鼠麻醉后暴露肝脏，拍照并观察大鼠肝脏外观颜色、脂肪附着、质地等情况。

2.6 血清中血脂四项及肝功能五项指标检测

采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中血脂四项（TC、TG、LDL-C、HDL-C）及肝功能五项（ALT、AST、ALP、DBIL、TBIL），其中TG、ALP和AST检测用比色法，TC、HDL-C和LDL-C检测用酶比色法，TBIL和DBIL检测用重氮法，ALT检测用IFCC法检测。

2.7 大鼠肝组织HE染色观察

取各组大鼠肝组织，石蜡包埋，制作切片（5 µm），经HE染色，于显微镜下观察并拍照。

2.8 免疫组化法检测肝脏组织中AMPKα、SREBP-1和VCAM1蛋白表达

各组大鼠肝组织切片按文献方法[21]脱蜡至水，抗原修复及切片染色，于显微镜下观察并拍照，分析脂代谢相关蛋白阳性表达区域。采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测定所采集全部图像的阳性表达区域吸光度（）和面积，计算平均值，进行组间比较分析。

2.9 统计分析

3 结果

3.1 柳蒿脂溶性部位的制备

从20 kg柳蒿芽中制备得到柳蒿芽亲脂性部位4.8 kg，其得率为24%。柳蒿芽亲脂性部位化学信息分离鉴定结果[11-13]可知，其含有棕榈酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、12,13-环氧-亚麻酸、chamazulene、acetylene()-2、acetylene()-3、acetylene()-4、丁香酚、integracid、(＋)-(）-dihydro-ar-curcumene、(＋)-()-ar-curcumene、(＋)-()-dihydro-ar-turmerone、(＋)-()-ar-turmerone。这些化合物中除5个脂肪酸类外，还有3个炔类、2个简单苯丙素和5个倍半萜类化合物，相对分子质量小，均具有挥发性。在此基础上，经本课题组对柳蒿芽脂溶性部位的气相色谱分析得知，其主含成分(＋)-()-dihydro-ar-curcumene、(＋)-()-ar-curcumene、(＋)-()-dihydro-ar-turmerone、(＋)-()-ar-turmerone、丁香酚、棕榈酸、亚油酸、亚麻酸、12,13-环氧亚麻酸、油酸和chamazulene在不同批次样品中平均质量浓度分别为1.021、0.838、0.456、0.732、0.703、0.407、0.296、0.672、0.278、0.266、0.377 mg/mL[19]。

3.2 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠体质量的影响

如表1所示，实验期间，与对照组比较，模型组大鼠体质量均显著升高（＜0.05）；给药第30天，与模型组比较，柳蒿脂溶性部位高剂量组大鼠体质量显著降低（＜0.05）。

3.3 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝脏外观的影响

如图1所示，对照组大鼠肝脏颜色鲜红，表面光滑，无结节，无脂肪附着，边缘锐利，质地柔韧，各肝叶间无黏连；模型组大鼠肝脏颜色略呈土黄色，表面粗糙而油腻，且质地变脆。与模型组比较，辛伐他汀组大鼠肝脏颜色暗红，体积稍小，表面光滑，油腻感轻，质地柔韧；柳蒿脂溶性部位组大鼠肝脏颜色暗红，体积稍小，表面光滑，油腻感轻，接近对照组肝脏。

表1 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠体质量的影响(, n = 10)

Table 1 Effect of liposoluble parts from A. integrifolion body weight of hyperlipidemia rats (, n = 10)

组别剂量/(mg·kg−1)体质量/g 第0天第10天第20天第30天 对照—224.41±12.18248.03±12.23269.07±14.72288.33±16.17 模型—249.22±13.78#267.23±20.03#284.31±29.43#324.26±18.94# 辛伐他汀4252.16±11.54261.04±29.18277.41±31.09295.18±34.51 柳蒿脂溶性部位90251.89±13.02265.83±30.24280.38±35.17300.41±31.27 180254.93±14.22262.77±33.60273.02±36.29289.93±33.82*

与对照组比较：#＜0.05##＜0.01；与模型组比较：*＜0.05**＜0.01，下表同

#< 0.05##< 0.01control group;*< 0.05**< 0.01model group, same as below tables

图1 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝脏外观的影响

3.4 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C水平的影响

如表2所示，与对照组比较，模型组大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平均明显升高（＜0.05、0.01），HDL-C水平显著降低（＜0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠血清中TC和LDL-C水平均明显降低（＜0.01）；柳蒿脂溶性部位低、高剂量组大鼠血清中TG水平明显降低（＜0.01），HDL-C水平显著升高（＜0.05）。与辛伐他汀组比较，柳蒿脂溶性部位低、高剂量组大鼠血清中TG水平明显降低（＜0.05）。

表2 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C水平的影响(, n = 10)

Table 2 Effect of liposoluble parts from A. integrifolion TC, TG, LDL-C and HDL-C levels in serum of hyperlipidemia rats (, n = 10)

组别剂量/(mg·kg−1)TC/(mmol·L−1)TG/(mmol·L−1)LDL-C/(mmol·L−1)HDL-C/(mmol·L−1) 对照—1.44±0.180.30±0.060.32±0.062.09±0.21 模型—2.47±0.19##0.34±0.07#0.91±0.06##1.64±0.13# 辛伐他汀41.80±0.13**0.30±0.080.46±0.01**1.68±0.19 柳蒿脂溶性部位901.90±0.20**0.21±0.07**△0.48±0.11**1.86±0.21* 1801.88±0.12**0.22±0.06**△0.46±0.07**1.83±0.17*

与辛伐他汀组比较：△＜0.05△△＜0.01，表3同

△< 0.05△△< 0.01simvastatin group, same as Table 3

3.5 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠血清中ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL水平的影响

如表3所示，与对照组比较，模型组大鼠血清中ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL水平均明显升高（＜0.05、0.01）。与模型组比较，各给药组大鼠血清中ALT、ALP活性均明显降低（＜0.05、0.01），柳蒿脂溶性部位高剂量组大鼠血清中AST活性明显降低（＜0.01），辛伐他汀组和柳蒿脂溶性部位高剂量组大鼠血清中TBIL水平明显降低（＜0.05）。与辛伐他汀组比较，柳蒿脂溶性部位低、高剂量组大鼠血清中ALP活性明显降低（＜0.05），柳蒿脂溶性部位高剂量组大鼠血清中AST活性明显降低（＜0.01）。

3.6 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝组织病理变化的影响

如图2所示，对照组大鼠肝小叶结构完整，呈不规则形，核圆形蓝色位于细胞中央，胞质红色，肝细胞成条索状排列形成肝板，未见脂滴、脂肪样变性、气球样变性等。模型组大鼠肝小叶结构不完整，呈不规则形，细胞内可见大量脂滴，明显脂肪样变性、肝组织内可见空泡状，气球样改变。个给药组大鼠肝小叶结构完整，未见脂滴、脂肪样变性、空泡样变性等，可见少量炎细胞浸润。

表3 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠血清中ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL水平的影响(, n = 10)

Table 3 Effect of liposoluble parts from A. integrifolion ALT, AST, ALP activities and DBIL, TBIL levels in serum of hyperlipidemia rats (, n = 10)

组别剂量/(mg·kg−1)ALT/(U·L−1)AST/(U·L−1)ALP/(U·L−1)DBIL/(μmol·L−1)TBIL/(μmol·L−1) 对照—45.98±6.5477.68±4.86164.00±16.241.03±0.190.88±0.29 模型—59.18±6.34##114.20±9.10##247.50±19.10#1.48±0.23#1.70±0.12## 辛伐他汀440.95±8.46**108.68±5.78179.29±13.62*1.25±0.191.25±0.27* 柳蒿脂溶性部位9047.92±5.07*107.98±8.23153.80±11.12*△1.40±0.181.58±0.16 18044.08±5.55**78.12±7.27**△△150.83±11.55**△1.33±0.331.05±0.26*

图2 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝组织病理变化的影响(HE, ×200)

3.7 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝组织AMPKα、SREBP-1和VCAM1蛋白表达的影响

如图3和表4所示，与对照组比较，模型组大鼠肝组织AMPKα蛋白表达水平明显降低（＜0.05），SREBP-1和VCAM1蛋白表达水平均显著升高（＜0.05、0.01）。与模型组比较，各给药组大鼠肝组织SREBP-1蛋白表达水平均显著降低（＜0.05、0.01）；辛伐他汀组和柳蒿脂溶性部位高剂量组大鼠肝组织AMPKα蛋白表达水平均明显升高（＜0.05），VCAM1蛋白表达水平显著降低（＜0.05）。

图3柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝组织AMPKα、SREBP-1和VCAM1蛋白表达的影响 (×400)

表4 柳蒿脂溶性部位对高脂血症大鼠肝组织AMPKα、SREBP-1和VCAM1蛋白表达的影响(, n = 10)

Table 4 Effect of liposoluble parts from A. integrifolion AMPKα, SREBP-1 and VCAM1 protein expressions in liver tissue of hyperlipidemia rat (, n = 10)

组别剂量/(mg·kg−1)平均A值 AMPKαSREBP-1VCAM1 对照—0.156±0.0210.023±0.0060.052±0.010 模型—0.133±0.025#0.038±0.010##0.063±0.012# 辛伐他汀40.159±0.018*0.022±0.005**0.044±0.018* 柳蒿脂溶性部位900.136±0.0160.028±0.011*0.059±0.008 1800.154±0.016*0.029±0.009*0.050±0.010*

4 讨论

血脂异常防治中关于饮食疗法的内容包括饮食控制、减轻体质量、增加体力劳动。此方案旨在改变饮食习惯、调整膳食结构，以趋于达到合理健康的长期控制饮食，并能得到显著疗效。因此本研究在治疗过程中仍然持续ig高脂乳剂，避免调整膳食结构后血脂异常自然恢复后对实验造成干扰，尽量减少科研误差率的发生。

大量摄入高脂饮食是诱发高脂血症的重要因素，为此，本研究参照高脂乳剂ig法[22]建立高脂血症大鼠模型。造模10 d，从血清中血脂四项指标检测结果表明，该模型能够在短期内形成，导致大鼠血清中TC、TG、LDL-C水平升高，而HDL-C水平降低。柳蒿脂溶性部位干预能显著降低血清中TC、TG和LDL-C水平，升高HDL-C水平，其高剂量组对TG的降低较辛伐他汀组显著。

随着实验进行，对照组大鼠体质量呈现稳步增长趋势，模型组大鼠体质量也稳步增长，且体质量高于对照组。柳蒿芽脂溶性部位组大鼠体质量增长较平稳，治疗10 d内体质量高于对照组，而治疗20、30 d时，与对照组比较大鼠体质量无显著差异。从肝脏外观分析，模型组肝脏颜色略呈土黄色，表面粗糙而油腻，可见明显脂代谢异常。而辛伐他汀组和柳蒿芽脂溶性部位组大鼠肝脏颜色暗红，表面光滑，油腻感轻，这说明柳蒿脂溶性部位具有一定的促进肝脏脂肪代谢作用。肝组织病理学结果表明，柳蒿脂溶性部位能够调节血脂代谢异常，保护肝脏，避免肝细胞脂滴形成，延缓肝脏脂质化。

临床常用ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL五项指标来评价肝脏的各种功能受损情况[23]。肝细胞受损时以上指标升高，其升高的程度与肝细胞受损的程度呈正相关[24]。肝功能五项指标检测结果显示，该模型导致肝功能五项均升高，经柳蒿脂溶性部位干预后，ALT、AST、ALP活性和TBIL、DBIL水平显著降低，其中高剂量组对AST、ALP和TBIL的降低作用显著优于辛伐他汀，表明柳蒿脂溶性部位对血脂异常引起的肝损伤具有一定保护作用。

AMPK在调节机体能量代谢的平衡方面起总开关作用，近期成为肥胖治疗的新靶点。研究显示，肥胖会导致肝组织中AMPKα含量和活性降低[25-26]。SREBP-1也是TG代谢调控网络中的关键基因，SREBP-1的过度表达会引起脂代谢素乱。肖璐[27]研究发现化湿祛浊方能通过抑制高脂血症大鼠基因表达，使TG的合成减少。VCAM1是一种重要的黏附分子，正常状态下呈低表达或不表达，在高脂血症中表达增多。研究表明，血脂异常是动脉粥样斑块形成的危险因素，而且常伴随着VCAM-1水平的上升[28]。VCAM-1的表达增多与TC、LDL-C水平呈正相关。

本研究中柳蒿芽脂溶性部位高剂量组大鼠肝组织SREBP-1、VCAM1蛋白表达水平较模型组显著低，而AMPKα蛋白表达水平显著升高。同时，柳蒿芽脂溶性部位组大鼠血清中TG、TC、LDL-C水平也较模型组显著降低，表明柳蒿芽脂溶性部位可能通过下调SREBP-1、VCAM1蛋白表达水平并上调AMPKα蛋白表达水平，从而抑制TG、TC、LDL-C水平。这一结果与辛伐他汀能对内源性胆固醇合成进行有效抑制，并对血脂进行有效调节的作用特点基本一致[29-30]。

综述，柳蒿脂溶性部位对实验性高脂血症具有显著的调血脂作用和保肝作用，其作用机制可能为通过调节AMPKα、SREBP-1和VCAM1蛋白的表达，从而调控血脂中TC、TG和LDL-C水平，维持体内脂质代谢平衡，避免肝脂化。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Effect of liposoluble parts fromon lipid metabolism and liver in hyperlipidemia rats

WANG Qing-hu, AO Su-ri-gu-ga, BAO Wen-lin, HE Xiang, XU Yan-hua

College of Traditional Mongolian Medicine, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028000, China

To study the effect of liposoluble parts fromon lipid metabolism and liver in hyperlipidemia rats.High-fat emulsion was used to establish a rat model of hyperlipidemia, and simvastatin or liposoluble parts fromwere given for intervention, changes in body weight and appearance of liver were observed. Levels of triglyceride (TG), total cholesterol (TC), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), total bilirubin (TBIL), direct bilirubin (DBIL) and activities of alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) in serum of rats were detected by automatic biochemical analyzer; Hematoxylin-eosin (HE) staining was used to observe the pathological changes in liver tissue of rats in each group; Immunohistochemical method was used to detect protein expressions of adenosine monophosphate-activated protein kinase α (AMPKα), sterol regulatory element binding protein-1 (SREBP-1) and vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM 1) in liver tissue of rats in each group.Compared with model group, on 30th day of administration, body weight of rats in liposoluble parts fromgroup was significantly decreased (< 0.05); Liver of rats was dark red in color, slightly smaller in size, smooth in surface, light in greasy feeling, and in liver lobules, structure was intact, no lipid droplets, fatty degeneration, vacuolar degeneration were seen, and a small amount of inflammatory cell infiltration was seen; TC, TG and LDL-C levels in serum were significantly decreased (< 0.01), and HDL-C level was significantly increased (< 0.05); SREBP-1 and VCAM1 protein expressions in liver tissue of rats were significantly decreased (< 0.05), and AMPKα protein expression was significantly increased (< 0.05).Liposoluble parts fromhas significant blood lipid-regulating and liver-protecting effects in hyperlipidemia rats, and its mechanism may be through regulating the expressions of AMPKα, SREBP1 and VCAM1 proteins, thereby regulating TC, TG, LDL-C and HDL-C levels in blood lipids, maintain lipid metabolism balance in body and avoid liver lipidation.

liposoluble parts fromLinn.; hyperlipidemia; blood lipid; liver function; lipid metabolism

R285.5

A

0253 - 2670(2022)11 - 3402 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.11.016

2022-02-15

内蒙古自治区科技计划项目（2019GG118）

王青虎，博士生导师，教授，研究方向为蒙药有效物质基础及其药理研究。Tel: 15894890037 E-mail: wqh693@163.com

[责任编辑 李亚楠]