平头火针联合308 nm准分子光治疗白癜风的疗效及对皮损组织ET-1和IL-17水平的影响

张玉珍 朱梅 王利 刘影

[摘要]目的：分析平頭火针联合308 nm准分子光治疗白癜风的疗效及对皮损组织内皮素-1（ET-1）、白介素-17（IL-17）水平的影响。方法：选取笔者医院收治的126例白癜风患者作为研究对象，采用随机数字表简单随机分组法分为对照组及观察组，各63例。对照组给予308 nm准分子光治疗，观察组在对照组基础上联合平头火针治疗，疗程12周。记录两组靶皮损面积、外观恢复情况及临床疗效，比较两组治疗前及治疗4周后皮损组织ET-1、IL-17水平差异，并评估治疗前及治疗12周后外周血辅助性T细胞17（Th17）、调节性T淋巴细胞（Treg）、Th17/Treg变化情况，观察治疗期间不良反应。结果：两组患者均完成12周治疗，治疗12周后，两组靶皮损面积均较治疗前缩小（P<0.05），且观察组小于对照组（P<0.05），观察组复色面积占皮损总面积及临床疗效均高于对照组（P<0.05）。治疗4周后，两组皮损组织ET-1水平均较治疗前升高（P<0.05），且观察组高于对照组（P<0.05）;IL-17水平则较治疗前降低（P<0.05），且观察组低于对照组（P<0.05）。两组治疗前后外周血Treg水平无显著变化（P>0.05）;治疗12周后，两组外周血Th17及Th17/Treg均较治疗前降低（P<0.05），且观察组低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生情况比较（23.81% vs 20.63%），差异无统计学意义（P>0.05）。结论：平头火针联合308 nm准分子光治疗白癜风疗效显著，可调控皮损组织ET-1、IL-17表达，调节Th17/Treg平衡，不良反应较少。

[关键词]白癜风;308 nm准分子光;平头火针;皮损;ET-1;IL-17;Th17

[中图分类号]R758.4+1    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2022）04-0110-04

Efficacy of Flat-end Fire Needle Combined with 308 nm Excimer Laser in the Treatment of Vitiligo and Its Influence on Levels of Endothelin-1 and Interleukin-17 in Skin Lesions Tissues

ZHANG Yuzhen，ZHU Mei，WANG Li，LIU Ying

（Department of Dermatology，Affiliated Hospital of Chengdu University of TCM，Chengdu 610072，Sichuan，China）

Abstract： Objective To analyze the efficacy of flat-end fire needle combined with excimer laser in the treatment of vitiligo and its influence on levels of endothelin-1 （ET-1） and interleukin-17 （IL-17） in skin lesion tissues. Methods A total of 126 patients with vitiligo in our hospital were selected as the research subjects， and they were divided into control group and observation group by the simple random grouping of the random number table method， with 63 cases in each group. Control group was given excimer laser treatment， and observation group was combined with flat-end fire needle on the basis of control group， and they were treated for 12 weeks. The target skin lesion area， appearance recovery and clinical efficacy were recorded in the two groups， and the differences in levels of ET-1 and IL-17 in skin tissues were compared between the two groups before treatment and after 4 weeks of treatment. Changes of peripheral blood helper T cell （Th17）， regulatory T lymphocyte （Treg） and Th17/Treg were evaluated before treatment and after 12 weeks of treatment， and the adverse reactions were observed during treatment. Results Both groups of patients completed 12 weeks of treatment. After 12 weeks of treatment， the target skin lesion area in the two groups was smaller than that before treatment （P<0.05）， and the area of observation group was smaller than that of control group （P<0.05）. The proportion of recolor area and total skin lesion area and clinical efficacy in observation group were higher than those in control group （P<0.05）. After 4 weeks of treatment， the ET-1 level of skin lesion tissues in the two groups were increased compared with those before treatment （P<0.05）， and the level of observation group was higher than that of control group （P<0.05）. IL-17 level was reduced compared with that before treatment （P<0.05）， and the level of observation group was lower than that of control group （P<0.05）. There was no significant change in peripheral blood Treg level between the two groups before and after treatment （P>0.05）. After 12 weeks of treatment， the peripheral blood Th17 and Th17/Treg in the two groups were decreased compared with those before treatment （P<0.05）， and the two indexes of observation group were lower than those of control group （P<0.05）. There was no statistically significant difference in the occurrence of adverse reactions between the two groups （23.81% vs 20.63%） （P>0.05）. Conclusion Flat-end fire needle combined with excimer laser has a significant efficacy on vitiligo. It can regulate the expressions of ET-1 and IL-17 in skin lesion tissues， and regulate the Th17/Treg balance， with fewer adverse reactions.

Key words： vitiligo; excimer laser; flat-end fire needle; skin lesions; ET-1; IL-17; Th17

白癜风是一种自身免疫性疾病，主要表现为皮肤局限性或泛发性色素脱失斑，好发于青年及儿童，发病率为1%～2%。学术界普遍认为，白癜风与体液免疫、细胞免疫功能失调引起皮肤黑素细胞破坏有关[1]。308 nm准分子光直接作用于皮损部位的T淋巴细胞，诱导细胞凋亡，纠正细胞免疫，并刺激黑素细胞增生，促进黑色素形成，治疗白癜风疗效较好，是目前公认的治疗各型白癜风疗效最好的手段[2]。但是，对于部分难治性皮损，308 nm准分子光反应性较差，治疗周期长、花费较高，因此如何提高疗效、缩短疗程也是临床治疗白癜风的重点[3]。近年来，有学者发现[4]，用温热的火针直接刺激白癜风皮损部位，可激发局部酪氨酸酶活性，促进黑色素生成，加速白斑复色。此外，火针价格低廉、操作简便，有较高的临床接受度。基于此，本研究选取126例白癜风患者为研究对象，以分析平头火针与308 nm准分子光的联合疗效，为白癜风的治疗提供临床依据，现报道如下。

1  资料和方法

1.1 一般资料：选取2018年9月-2020年10月笔者医院收治的126例白癜风患者作为研究对象，采用随机数字表简单随机分组法分为对照组及观察组，各63例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

1.2 纳入和排除标准

1.2.1 纳入标准：①符合《白癜风临床分型及疗效标准（2003年修订稿）》[5]诊断标准;②稳定期（近6个月内皮损未出现临床变化，无新皮损）;③年龄为18～60岁;④签署知情同意书。

1.2.2 排除标准：①入组前2个月内行紫外线照射等物理治疗或使用免疫调节药物治疗;②合并其他免疫疾病;③伴严重心、肝、肾等器官功能障碍;④沟通障碍;⑤既往神经精神疾病;⑥瘢痕体质;⑦痛觉过敏。

1.3 方法

1.3.1 对照组：给予308 nm准分子光治疗，采用308 nm准分子光仪（美国PhotoMedex公司，光斑2 cm×2 cm）。①首次照射：不同部位选择不同初始剂量，颈部、腋窝150 mJ/cm2，躯干四肢200 mJ/cm2，手足为400 mJ/cm2，腰部为2 050 mJ/cm2;②后续治疗：首次局部照射后产生的红斑在24 h内消失，则增加剂量50～100 mJ/cm2继续治疗;若红斑在24～48 h内消失，光照剂量不变;若红斑在72 h内仍未消失，或局部照射后出现水疱、疼痛等症状，即刻停止激光治疗，待水疱等症状消退后将剂量降低100 mJ/cm2，继续激光治疗。激光治疗1次/周，疗程12周。

1.3.2 观察组：在对照组基础上联合平头火针治疗。①针刺方法：暴露皮损部位，采用75%酒精常规消毒，手持酒精灯，将火焰靠近皮损部位，另一只手持平头火针（师怀堂钨钢火针，1 mm×40 mm），烧针至火红或灰白色后直刺皮肤，1～2次/秒，进针1～3 mm，针孔间隔3 mm;②操作注意事项：针刺时由皮损外缘向中心点刺，至针刺范围达皮损的80%;平头火针治疗后需24 h内保持局部皮肤干燥，切勿触碰、刺激。1次/周，疗程12周。

1.4 观察指标

1.4.1 靶皮损面积、外观恢复情况：每次治疗前，采用数码相机拍摄皮损图像，使用Image-Pro Plus图像分析软件（美国Media Cybernetics）计算皮损面积及复色情况，复色为恢复正常肤色。

1.4.2 临床疗效：在治疗12周后，参考《白癜风临床分型及疗效标准（2003年修订稿）》[5]评估疗效。痊愈（白斑全部消失，恢复正常复色）;显效（白斑消退或缩小，复色面积占皮损总面积≥50%）;好转（白斑部分消退或缩小，10%≤复色面积占皮损总面积<50%）;无效（白斑无色素再生，或复色面积占皮损总面积<10%）。总有效率=（痊愈+显效）例数/总例数×100%。

1.4.3 治疗前及治疗4周后皮损组织内皮素-1（Endothelin-1，ET-1）、白介素-17（Interleukin-17，IL-17）水平：负压吸取皮损中心部位脓液2 ml，经2 500 r/min离心15 min，采用酶联免疫吸附法（上海铭睿生物科技有限公司）检测脓液ET-1、IL-17水平。

1.4.4 治療前及治疗12周后外周血辅助性T细胞17（Helper Tcell，Th17）、调节性T淋巴细胞（Regulatory T lymphocyte，Treg）、Th17/Treg：采集空腹外周静脉血，经抗凝处理后，以Ficoll密度梯度离心法收集外周血单个核细胞，经体外活化培养对细胞表面CD4+染色，经流式细胞仪（美国BD公司，FACSCalibur）及配套的Flowjo流式细胞分析软件，分析CD4+T细胞中Th17、Treg所占比例，计算Th17/Treg。

1.4.5 治疗期间不良反应：局部瘙痒（主诉）及红肿（肉眼观察判断）等不良反应发生情况。

1.5 统计学分析：靶皮损面积、复色面积占皮损总面积比例、皮损组织ET-1、IL-17及外周血Th17、Treg及Th17/Treg等计量资料以（x¯±s）表示，组间采用独立样本t检验，组内治疗前后比较采用配对t检验;临床疗效、不良反应等计数资料以[例（%）]表示，采用χ2检验;临床疗效为等级资料，使用Mann-Whitney U检验;数据分析用SPSS 22.0软件处理，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1 两组治疗前后靶皮损面积、外观恢复情况比较：两组患者治疗12周后，靶皮损面积均较治疗前缩小，差异有统计学意义（P<0.05），且观察组小于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;观察组复色面积占皮损总面积高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.2 两组临床疗效比较：观察组临床疗效明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表3，观察组典型病例见图1。

2.3 两组治疗前后皮损组织ET-1、IL-17水平比较：治疗4周后，两组皮损组织ET-1水平均较治疗前升高，差异有统计学意义（P<0.05），且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;IL-17水平则较治疗前降低，差异有统计学意义（P<0.05），且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

2.4 两组治疗前后外周血Th17、Treg及Th17/Treg比较  两组治疗前后外周血Treg水平无显著变化，差异无统计学意义（P>0.05）;治疗12周后，两组外周血Th17及Th17/Treg均较治疗前降低，差异有统计学意义（P<0.05），且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表5。

2.5 两组治疗期间不良反应比较：观察组有13例患者主诉局部瘙痒，另有2例患者火针针刺后因沾水而出现明显红肿，涂抹莫匹罗星软膏后红肿消退，火针治疗期间出现的红斑、风团、刺痛等不适症状均为火针治疗的正常反应;对照组有10例患者主诉局部瘙痒，但均能耐受;两组不良反应发生情况比较（23.81% vs 20.63%），差异无统计学意义（χ2=1.248，P=0.264）。

3  讨论

传统医学未明确白癜风病因病机，多认为其病机与风邪相搏、血瘀阻络、气血亏虚等相关[6]。中医诊疗认为寒邪为白癜风的主要病因[7]，寒邪凝滞致毛窍收缩，气血凝滞，肌肤失气血濡养而发白斑，治以解表散寒、温里驱寒。火针疗法可联合针刺及灸的温热刺激作用，借助温热之性温经散寒，使气血运行、气机调畅，并激发经气，经络得以疏通，具有散寒驱邪、促气血通畅之效[8]。研究发现[9]，火针的温热刺激及针尖的机械性刺激可激活皮损局部酪氨酸酶活性，促进黑色素生成，对皮损的复色有利。本研究发现，观察组治疗后靶皮损面积小于对照组，而复色面积占皮损总面积比例高于对照组，提示平头火针能发挥温里散寒，濡养气血，调和营卫，通畅血运，加速皮损消退、促进复色的功效，与上述报道一致。观察组临床疗效明显高于对照组，也初步证实，平头火针联合308 nm准分子光治疗疗效显著，与目前研究结果一致[10]。

临床研究显示，白癜风患者皮损区IL-17表达水平显著高于健康人群，IL-17的促炎作用可能参与白癜风的发生发展[11];ET-1的表达则在白癜风皮损区显著下降，ET-1可通过信号转导途径刺激黑色素生成，并协同其他细胞因子促进黑素细胞增殖，ET-1表达的下调也可能加速白癜风的发生发展[12]。本研究中，两组治疗早期皮损组织ET-1表达上调，IL-17表达下调，且观察组治疗后变化幅度大于对照组，提示308 nm准分子光治疗可调控ET-1、IL-17的表达，联合平头火针的刺激作用，局部表达水平得到进一步调控。考虑该结果与308 nm准分子光及平头火针产生的热刺激和机械性刺激，作用于局部T淋巴细胞，调节细胞免疫，抑制IL-17分泌有关[13]。但308 nm准分子光及火针疗法对白癜风皮损ET-1表达的刺激作用及相关机制，目前研究较少，还需后续深入探讨。

另据文献报道[14]，Th17/Treg免疫失衡是诱发白癜风的主要原因之一，白癜风患者常伴Th17/Treg左移，Th17细胞可通过分泌IL-17等细胞因子，介导机体炎症反应增强及防御机制紊乱。本研究发现，两组治疗后外周血Th17及Th17/Treg均较治疗前降低，且观察组低于对照组。这也表明，平头火针能促进Th17细胞凋亡，调节Th17/Treg平衡，控制白癜风病情进展。林国华[15]等也指出，火针疗法能调节T细胞亚群功能，促进细胞免疫平衡，纠正机体免疫状态。因此，平头火针联合308 nm准分子光还能调节机体免疫状态，对控制白癜风病情有积极意义。

此外，红斑、风团、刺痛等不适感均为火针治疗正常反应，无需特殊处理，但需要注意的是火针对皮损产生刺激及损伤，瘢痕体质者可能会遗留瘢痕，故不适用于瘢痕体质者。然而，灼热感及疼痛也是火针不可避免的反应，对于痛觉过敏等难以忍受疼痛者，火针也不适用，本研究入组前排除痛觉过敏者，治疗期间未出现因疼痛难忍而退出试验。故火针治疗对于瘢痕体質及痛觉过敏者不适用，临床应用时应注意评估患者体质。对于火针治疗的疼痛，笔者通过本研究得到一定经验：快速针刺，且由皮损外缘向中心点刺，可逐渐增加疼痛耐受性，患者更易耐受，系与皮损中心皮肤更敏感有关。不仅如此，对于能耐受的患者，在治疗期间也应积极讲述火针治疗原理及优势，向患者讲解治疗常见症状，避免患者因红斑、风团等反应而过度恐惧、焦虑，最终导致治疗终止。

另外，火针刺激后的皮损在潮湿、污染的环境下可引起感染，治疗后24 h内应保持皮损部位干燥，避免触碰、刺激。本研究中，有2例患者治疗后未按照要求维护治疗局部干燥、清洁环境，在局部沾水后出现明显红肿，经莫匹罗星软膏治疗后好转。因此，临床在应用火针治疗时，应对患者及其家属强调治疗后维护局部皮肤状态，保证皮损部位干燥、清洁，预防感染等并发症。除火针正常反应外，两组局部瘙痒等不良反应发生情况无明显差异，提示联合平头火针治疗安全性良好，未增加不良反应，适于临床推广。

综上所述，平头火针联合308 nm准分子光能调节细胞免疫平衡，调控局部ET-1、IL-17表达，控制白癜风病情进展，疗效显著，安全性良好，具有较好应用前景。

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[收稿日期]2020-03-25

本文引用格式：张玉珍，朱梅，王利，等.平头火针联合308 nm准分子光治疗白癜风的疗效及对皮损组织ET-1和IL-17水平的影响[J].中国美容医学，2022，31（4）：110-113.