大肠杆菌病对鸡肝脏和脾脏组织结构的影响

2022-05-17础鲁

吉林畜牧兽医 2022年2期

础鲁

内蒙古自治区阿拉善左旗农牧区生态管理综合行政执法局，内蒙古巴彦浩特 750300

鸡大肠杆菌病是指部分或全部由大肠埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的疾病，其抗原性复杂，血清型多样，临床症状和病理变化多变。从近年来的禽病报道可以看出，大肠杆菌病已经成为影响养鸡业发展的主要疾病之一。国内外对鸡大肠杆菌病的病原学﹑临床症状及防治方面的报道很多，但对其病理组织学变化的研究及发病机理方面的相关性研究则鲜有报道。本试验选用通过细菌学确诊的临床自然病例，对其肝脏和脾脏病理组织学变化进行观察和研究，并通过对感染大肠杆菌的病鸡的病理学变化的观察，以充实大肠杆菌病的资料库，为病理组织学文库建设增添新的内容，从而为进一步研究和控制大肠杆菌病提供可靠的资料和理论基础。同时，证明大肠杆菌及其代谢产物对机体的病理作用及机体在发生大肠杆菌感染时所产生的组织应答反应，从而为药理学、药代动力学的研究提供依据，给临床预防治疗该病提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物

本试验选用自然感染大肠杆菌，经细菌学诊断为大肠杆菌病的50 只病鸡(30 ～50 日龄)，均来自洛阳市周边县几个鸡场。由河南科技大学动物科技学院禽病研究室提供。

1.1.2 试验仪器

220-A0 型电热恒温干燥箱， MDJ-自动磨刀机，SD-2 型推拉式三用切片机，小型三用水箱， XS-型显微镜（OLYMPUS）。

1.1.3 试剂

甲醛溶液分析纯(37%～40%)，无水乙醇分析纯试剂（99.7%），二甲苯分析纯试剂（99.0%），石蜡（熔点55 ～59 ℃），苏木精，伊红（醇溶液），盐酸分析纯试剂（36%～38%），中性树胶，草酸铵结晶紫，碘液，蕃红染色液（稀），普通琼脂平板、麦康凯平板和远藤氏培养基平板。

1.2 方法

1.2.1 临床症状

鸡胚死亡发生在孵化过程，特别是孵化后期，病变卵黄呈干酪样或黄棕色水样物质，卵黄膜增厚。病雏鸡主要表现为精神萎靡，排出绿白色稀粪和逐渐消瘦死亡或短期死亡，蛋鸡主要表现产蛋停止，精神沉郁，腹泻，粪便中混有蛋清、凝固蛋白及卵黄小块，具有恶臭味。

1.2.2 实验室细菌学检测

根据不同的病型采取病料（肝﹑脾﹑心﹑血﹑气管分泌物等）进行涂片，革兰氏染色法染色后镜检，可见革兰氏阴性的中等大小杆菌，进一步将病料分别接种到普通琼脂平板、麦康凯和远藤氏培养基平板上，置37 ℃温箱中培养24 h。在普通培养基上则为无色菌落，麦康凯平板上为粉红色菌落，远藤氏培养基平板上则为红色菌落，并见闪烁金属光泽，即可判断为大肠杆菌感染。

1.2.3 试验步骤

病料经过选取、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片及附贴、染色等组织切片技术制片后利用OLYMPUS 显微镜分别在10 倍光镜下观察其组织病理变化，并利用电脑显微互动采集图片。

2 结果

与正常组织相比较，解剖学上的变化有肝脏肿大，肝包膜增厚，在肝表面形成的纤维素性膜，呈不透明黄白色，易剥脱。病情轻的局部发生，病情严重的整个肝表面被此膜包裹，把此膜剥脱后肝呈紫褐色，急性死亡病鸡肝脏严重淤血。脾脏肿大，呈红褐色，表面有针尖大小的坏死灶，质地脆弱。组织学上的变化有放射状肝细胞素紊乱变为无规则形，窦状隙扩张，充满红细胞，中央静脉充血，肝细胞发生脂肪变性。脾窦充血，边缘不明显，红髓脾索细胞索断裂，白髓脂肪变性，白髓脾小结细胞松散，脾小体结构消失，淋巴细胞减少，网状细胞增生。

3 讨论

研究发现致病性大肠杆菌进入鸡的上呼吸道后，首先附着气管上皮，此时，健康的鸡可通过呼吸道黏膜上皮的黏液分泌及纤毛的摆动，将大肠杆菌清除，防止侵入深部。当侵入肺部时，大肠杆菌从肺部毛细血管进入血液循环，引起菌血症，当机体抵抗力减弱时，大肠杆菌大量繁殖，引起败血症。

从病理组织学变化看，急性死亡的鸡主要出现急性败血症和亚急性纤维素炎的变化，主要特征是在各个脏器上均能看到细菌团块，组织发生充血、出血和水肿并有大量的细胞浸润。在多数脏器的表面附有纤维蛋白渗出物，这可能是机体对致病因素侵入机体所表现出来的应答反应。当细菌侵入后，机体主要以粒细胞的渗出和吞噬作用作为防御反应的第一步，当侵入机体的细菌数量较多、毒力较强时，超过了机体的抵抗力，可引起疾病恶化和死亡。由病理组织学变化看，与正常肝脏组织结构相比较，在正常组织切片中肝脏呈条索状，而与猪、猫、骆驼相比较，鸡的肝小叶分叶不明显，因为肝小叶的轮廓清晰度与小叶间的结缔组织的发达程度有关，所以鸡肝脏发生病变时在肝小叶很难分辨其病变轻重的。慢性死亡的鸡，病变由急性、亚急性炎症转到慢性阶段，主要表现为脏器表面的纤维蛋白性渗出物发生机化，在病理切片中发现病程稍长点的鸡肝脏切片中的枯否氏细胞明显减少，而病程短的急性型枯否氏细胞相对较多，这说明了在整个病程中枯否氏细胞吞噬作用是很强的。脾脏外观多肿胀，其原因是正常情况下，健康鸡的脾小结数量较少，体积较小，当发生体液免疫时脾小结数量增多，体积增大。包括脾脏内组织细胞的变性坏死，都是促成脾脏肿大的辅助因素。从本试验来看感染大肠杆菌病鸡肝脏和脾脏组织结构的病理变化可能与机体的防御能力增强，使细菌局限于机体的局部，引起机体局部组织的渐进性病变有关。

本试验对病鸡临床症状和细菌学检测基础上只用肉眼观察解剖学变化和低倍数光学显微镜来观察和分析肝脏和脾脏组织学变化。因显微镜倍数较低，所观察到的结构有限，下一步需要在电子显微镜观察和做其他相关分子生物学试验研究，更有利于该病深入细致地研究分析和治疗，明确发病机理的基础上，制定出较为合理的预防和治疗措施，以减少养殖户的损失，提高养殖效益。