气相色谱-质谱法检测中药液袋中16 种邻苯二甲酸酯

王小艳，张 涛

（河南省安阳市食品药品检验检测中心，河南 安阳 455000）

邻苯二甲酸酯（PAEs）又称增塑剂，能增强塑料的韧性及塑性，降低加工温度，性能优异，与乙烯基及其他聚合物相容性良好，已广泛应用于聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）、聚乙酸乙烯酯（PVA）等塑料包装。塑料药品包装材料（简称药包材）如聚丙烯（PP）、聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）、PVC 等也常使用增塑剂，以提高包装的灵活性、柔韧性和弹性［1-3］，而塑料药包材中残留的增塑剂会释放到药物中造成污染。由于PAEs 在人体和动物体内发挥着类似雌激素的作用，可能会干扰内分泌，使男子精液量和精子数量减少，严重的还会导致睾丸癌，也可能增加女性肥胖和患乳腺癌的风险，还可能造成儿童性早熟［4-8］。欧盟、美国、世界卫生组织、日本、中国都先后将PAEs 列入“优先控制污染物名单”，并禁用或限用相关PAEs。本研究中参照2015年版《中国药典（四部）》附录9101 药品质量标准分析方法验证指导原则和文献［9-16］，采用气相色谱-质谱（GC-MS）法测定中药液袋中16种PAEs。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 7890B - 7010B 型串联四极杆气质联用仪（美国Agilent公司）；Mettler XP205型电子天平（梅特勒-托利多集团有限公司，精度为0.01 mg）；1820V 型纯水机（重庆摩尔水处理设备有限公司）；Sigma 3 - 30K 型高速台式冷冻离心机（德国Sigma公司）。

1.2 试药

16 PAEs对照品溶液（美国First Standard公司，批号为S017205，质量浓度为100 μg/ mL）；磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺（分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司）；乙酸乙酯、正己烷、丙酮、二氯甲烷（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；甲醇（色谱纯，美国J. T. Baker 公司）；中药液袋（市售，编号分别为样品1至样品8）。

2 方法

2.1 试验条件

2.1.1 色谱条件

色谱柱：Agilent HP - 5MS 型弹性石英毛细管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；进样口温度：280 ℃，不分流进样；进样量：1 μL；程序升温：初始温度为60 ℃、保持1 min，以20 ℃/ min 的速率升至220 ℃、保持1 min，再以5 ℃/min 的速率升至280 ℃、保持4 min；载气：高纯氦气；载气流速：1.0 mL/min。

2.1.2 质谱条件

电子轰击离子源（EI），温度为280 ℃；GC-MS辅助加热温度：280 ℃；四极杆温度：150 ℃；溶剂延迟：6 min；扫描模式：选择离子监测（SIM），1个定量离子，2个定性离子，分时段检测。16 种PAEs 的信息及GC - MS 测定参数见表1。

表1 16种PAEs的信息及GC-MS测定参数Tab.1 Information of 16 kinds of PAEs and GC-MS determination parameters

2.2 溶液制备

混合对照品溶液：精密量取16 PAEs 对照品1 mL，置10 mL容量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（质量浓度为10 μg/mL），分别精密量取对照品贮备液适量，加正己烷稀释，摇匀，用0.22 μm微孔滤膜滤过，即得。

供试品溶液：将中药液袋洗净，干燥，粉碎至大小约为0.2 cm×0.2 cm 样品，取1.0 g，精密称定，置三角瓶中，加入25 mL 正己烷，超声提取（功率为250 W，频率为33 kHz）30 min，于阴凉处放置24 h。将提取液过滤至50 mL 容量瓶中，滤渣用适量正己烷洗涤3 次，合并提取液，用正己烷稀释至刻度，摇匀，精密量取10 mL，氮气吹干，残渣加2 mL 正己烷溶解，用0.22 μm 微孔滤膜滤过，即得。

2.3 方法学考察

专属性试验：取2.2 项下混合对照品溶液，按2.1项下试验条件进样测定，提取每个峰的质谱图，再在NIST 谱库中检索、确认。16 种PAEs 的总离子流色谱图见图1。

线性关系考察：分别取2.2项下系列混合对照品溶液，在2.1 项下试验条件进样测定7 次，以质量浓度（C，ng/mL）为横坐标、PAEs 的峰面积（A）为纵坐标进行线性回归。结果见表2。

检测限与定量限确定：取2.2项下混合对照品溶液适量，用正己烷逐级稀释，按2.1 项下试验条件进样测定，记录16 种PAEs 的信噪比（S/N），以S/N为3∶1 时的质量浓度为检测限，以S/N为10∶1 时的质量浓度为定量限。结果见表2。

精密度试验：取质量浓度为10 ng/mL的混合对照品溶液，按2.1项下试验条件进样测定6次，记录峰面积，计算相对标准偏差，结果见表2。表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取质量浓度为4 ng/ mL 的混合对照品溶液，分别于0，3，6，9，12，20，24 h时按2.1项下试验条件进样测定，记录峰面积，计算日内相对标准偏差。结果见表2。表明混合对照品溶液在常温下24 h 内稳定性良好。

表2 16种PAEs的方法学考察结果Tab.2 Results of methodology investigation of 16 kinds of PAEs

加样回收试验：取样品50.5 g，精密称定，按2.2 项下供试品溶液制备方法制备溶液，每个质量浓度平行3 份。按2.1 项下试验条件进样测定，并计算回收率。结果见表2。

2.4 样品含量测定

取样品1 至样品8 各适量，按2.2 项下方法制备供试品溶液，按2.1 项下试验条件进样测定，并计算样品含量。结果见表3。

表3 样品含量测定结果（μg/g）Tab.3 Results of content determination of PAEs in samples（μg/g）

3 讨论

3.1 提取溶剂选择

样品前处理时，分别以乙酸乙酯、正己烷、丙酮、二氯甲烷、甲醇为提取溶剂，结果甲醇因干扰过大而被排除，其余4 种提取溶剂均检测出DIBP 和DBP。最终选取干扰相对较小的正己烷作为提取溶剂，并在批处理中排除了空白干扰。

3.2 提取方法选择

分别以16 种PAEs 的含量为指标，考察了回流（20，30，40，60 min）提取和超声（20，30，40 min）提取的提取效果。结果超声提取30 min 后于阴凉处放置24 h 时，16种PAEs的含量均最高，并能提取完全。

3.3 方法评价

本试验中所建立的中药液袋中16种PAEs的GC-MS检测方法简单、灵敏，定性、定量测定结果准确，可满足药包材中多种PAEs 的定性、定量测定要求，为完善药包材的质量控制提供了可靠依据，我国尚无标准规定PAEs 在药包材中允许检出量，本次收集的8 批中药液袋中均检测出了增塑剂DIBP（0.03～1.81 μg/g）、DBP（0.28～2.54 μg/g）和DEHP（0.14～7.12 μg/ g）。建议在生产加工及包装时，使用合格的药包材，以降低PAEs 带来的风险，保障人民群众的用药安全。