牛白藤饮片质量标准研究

吉林芳 杨德泉▲ 佘永红 丁 野

1.湖南省湘西土家族苗族自治州食品药品检验所中药室，湖南吉首 416000；2.湖南省药品检验检测研究院标准研究所，湖南长沙 410001

牛白藤，又名脓见消、百藤草、金不换、广花耳草[1]，为茜草科植物牛白藤Hedyotis hedyotidea（DC.）Meer.的干燥藤茎。分布于广东、广西、云南、福建、台湾等地。味微甘，性凉，归脾、肝经。具有清热解暑、祛风活络、消肿止痛的功效，主治感冒发热、风湿痹痛、跌打损伤[2]。本品又是瑶族常用药，瑶药名为结岗崩，功能为清热解毒、祛风消肿，治疗中暑高热、肺炎、感冒咳嗽、乳腺炎、湿热泄泻、痔疮出血、痈疮肿毒、皮肤湿疹、带状疱疹等[3]。药理研究表明，牛白藤具有明显的抗炎镇痛活性[4]其所含成分白桦醇、乌苏酸、7β-羟基谷甾醇均有较强的免疫抑制活性[5]，白桦醇和熊果酸可有效减轻ConA 诱导的急性肝损伤，具有抗炎和护肝作用[6]，牛白藤与白花蛇舌草两种水煎液具有等效体外抗白血病效应[7]。临床方面，牛白藤作为抗炎镇痛和伤科用药，用量较大，使用频率较高，临床疗效显著，特别在伤科中的应用效果更佳，是临床不可或缺的一味中药。牛白藤饮片收载于《湖南省中药饮片炮制规范》2010年版[8]，饮片标准包括性状、薄层色谱鉴别、浸出物（醇溶性浸出测定法）等项目。为完善牛白藤饮片标准，本研究对牛白藤饮片的质量标准进行了研究，新增了水分、总灰分检查项目，修订了完善了性状、薄层鉴别和浸出物项目，使饮片标准能更加全面控制质量。

1 实验材料

1.1 仪器与试剂

KM5200DE 型超声波清洗器（昆山美美超声仪器有限公司）；AUW220D 电子天平（日本岛津公司）。Good-See-10 型薄层色谱成像仪（上海科哲生化科技有限公司）。硅胶G 薄层板（青岛海浪干燥剂有限公司，批号：2017年3月2日，10 cm×20 cm）；硅胶G 薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号：2018年5月15日，10 cm×20 cm）；硅胶G 高效薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号：2021年5月28日，10 cm×20 cm）。试剂均为分析纯，水为纯化水。

1.2 对照品与样品

1.2.1 对照品 牛白藤对照药材（中国食品药品检定研究院，批号121217-200502）。

1.2.2 实验样品及来源 12 批牛白藤饮片来源见表1。

表1 牛白藤饮片来源表

2 方法与结果

2.1 成品性状

成品为厚片。表面粗糙，灰白色或灰黄色，有突起较细的纵直筋脉纹，老茎可见灰白色纵长突起相互连接的皮孔斑，刮去表层栓皮现灰绿色。质坚韧。切面皮部浅灰褐色，木部占大部分，黄白色或淡黄色，髓多中空。老茎呈菊花纹理（异型维管束），纤维性，髓小。气微，味微甘（图1，封三）。

图1 牛白藤饮片图

2.2 薄层色谱鉴别

2.2.1 方法：取本品粉末1 g，加乙醇10 ml，超声处理15 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1 ml 使溶解，作为供试品溶液。另取牛白藤对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。参照《中华人民共和国药典》[9]（简称《中国药典》）通则0502 试验，吸取上述两种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365 nm）下检视。

实验用硅胶G 高效薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号：2021年5月28日），温度：24.8℃，湿度：52%。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（图2，封三）。

图2 青岛海洋化工厂分厂薄层硅胶G 高效板展开结果

2.2.2 耐用性考察 采用两个不同生产厂家的薄层硅胶G 板，分别在不同的温度条件下，按2.2.1 方法实验，实验条件见表2。实验结果见图3～4（封三）。耐用性实验结果表明，本方法色谱斑点清晰，分离度较好。

表2 耐用性考察条件表

图3 青岛海浪干燥剂有限公司的的薄层硅胶G 板展开结果

图4 青岛海洋化工厂分厂薄层硅胶G 板展开结果

2.3 检查

2.3.1 水分按照《中国药典》[9]2020年四部通则0832第二法，测定12 批牛白藤样品的水分（表3）。水分最低值为11.43%，最高值为13.48%，平均值为12.67%。按平均值的120%计算为15.20%，建议牛白藤的水分限度定为“不得过15.0%”。

2.3.2 总灰分按照《中国药典》[9]2020年版四部通则2302，测定12 批牛白藤饮片样品的总灰分（表3）。总灰分最低值为6.88%，最高值为10.35%，平均值为8.71%；按平均值8.71%的120%计算为10.45%，建议牛白藤的总灰分限度定为“不得过11.0%”。

2.4 浸出物

按照《中国药典》[9]2020年版四部通则2201 水溶性浸出物测定法项下的热浸法，测定12 批牛白藤饮片的浸出物（表3）。12 批牛白藤浸出物中最低值为13.07%，最高值为18.76%，平均值为16.04%。按12 批样品浸出物的平均的80%计算为12.83%，建议牛白藤的浸出物限度定为“不得少于13.0%”。

表3 牛白藤饮片水分、总灰分、浸出物（%）

3 讨论

3.1 牛白藤饮片标准检验项目的完善

本研究在牛白藤现标准基础上，新增加了牛白藤片的水分、总灰分控制项目，使牛白藤饮片质量控制项目更完善。

3.2 薄层色谱供试液和对照药材溶液制备方法的完善

牛白藤为《中药大辞典》[10]、《全国中草药汇编》[11]均收载的品种，主要含[12-13]熊果酸、齐墩果酸、咖啡酸、桦木酮酸、白桦脂酸、表白桦脂酸、β-谷甾醇、吐叶醇、白桦醇、羽扇豆醇、Δ5，22 豆甾醇、巴戟醚萜、莨菪亭等成分。《湖南省中药饮片炮制规范》2010年版收载牛白藤饮片薄层色谱鉴别方法，供试品溶液制备采用样品加乙醇回流30 min 方法，展开剂为石油醚（30～60℃）-甲酸甲酯-甲醇（10∶4∶1）。本研究参考文献资料[14]方法，供试品溶液制备采用超声波处理15 min，用牛白藤对照药材作为对照，展开剂为正己烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶0.5），经用三种不同品牌的硅胶G薄层板，在不同的温度、湿度条件下的展开，结果显示，本方法具有供试品和对照药材提取制备简便，色谱斑点清晰，分离度较好而且稳定的优点，可以作为牛白藤饮片的鉴别方法。

3.3 浸出物检测方法的完善

黄健军等[15]以齐墩果酸含量、熊果酸含量和干膏率的综合评分为评价指标，对牛白藤煎煮法、浸渍法（70%乙醇）、回流提取法（70%乙醇）进行筛选，其中煎煮法得干膏中齐墩果酸含量0.0323 mg/g、熊果酸含量0.6114 mg/g，干膏率5.27%；浸渍法得干浸膏中含齐墩果酸0.0263 mg/g、熊果酸0.3218 mg/g，干浸膏率3.11%，表明煎煮法提取所得成分和干浸膏量均高于浸渍法。在中医临床上，牛白藤饮片多入汤剂治病，如韦人鉴[16]报道，用复方牛白藤汤治疗急性传染性肝炎取得满意效果；赫军等[17]报道，牛白藤合四妙汤用于急性痛风性关节炎获得显著效果。因此，本研究按照《中国药典》[9]2020年版四部通则2201 水溶性浸出物测定法项下的热浸法，测定牛白藤饮片的浸出物，结果12 批样品的浸出物平均为16.0%。相对于牛白藤饮片浸出物采用70%乙醇作溶剂测定浸出物的方法，水溶性浸出物法更能表现牛白藤饮片成分在汤剂中的综合煎出率情况，检验溶剂成本更低，故以水溶性浸出物作为牛白藤饮片质量控制指标，更符合牛白藤饮片的质量控制。

综上所述，本研究在原标准的基础上，新增了水分、

总灰分检查项目；将原标准薄层鉴别方法中的供试品溶液制备方法由回流30 min 修订为超声提取15 mi n，提高了检验效率；将原标准采用测定醇溶性浸出物修订为测定水溶性浸出物，使牛白藤饮片的标准指标更加符合临床应用实际。本研究使牛白藤饮片质量标准更加完善，能够达到全面地控制牛白藤饮片质量的目的，为牛白藤饮片的质量控制提供了可靠有效的手段。