上海市青浦区非结核分枝杆菌肺病的临床特征及菌种分布分析*

彭 荣,龚 倩,杨馨怡

复旦大学附属中山医院青浦分院检验科,上海 201700

非结核分枝杆菌(NTM)是指在分枝杆菌属中，除结核分枝杆菌复合群(MTC)和麻风分枝杆菌之外的其他分枝杆菌。目前共发现190余种NTM[1]。NTM广泛存在于自然环境中，可在水、土壤和灰尘中被检出[2],少部分NTM可对人体致病，以肺部感染最为常见，引起NTM肺病[3]。据文献报道，不同地区NTM肺病发生率不同，气候湿润地区高于干燥地区，东南沿海地区高于内陆地区[4]。上海市青浦区位于东南沿海，气候湿润，本研究旨在更好地了解该地区NTM肺病患者的临床特征和菌种分布特点。

1 资料与方法

1.1一般资料 通过查阅电子病历，收集2017年1月至2020年12月于本院住院痰培养阳性且鉴定为NTM患者的临床症状、合并症、影像学表现等资料，参照《非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识》[5]的相关标准，最终80例临床资料完整且符合NTM肺病诊断标准的患者纳入本研究。

1.2方法

1.2.1涂片抗酸染色与菌种培养 收集患者痰液或肺泡灌洗液标本制片，抗酸染色，显微镜下观察涂片结果。通过分枝杆菌培养，初步分离出NTM。涂片抗酸染色和分枝杆菌培养参照《结核病实验室检验规程》[6]。

1.2.2菌种鉴定方法 采用16S-23S rRNA测序[7]，根据16S rRNA基因高变区设计合成引物16S-P1:TGGAGAGTTTGATCCTGGCTCAG，16S-P2：ACCGCGGCTGCTGGCAC，目的片段长度为514 bp。16S rRNA基因PCR反应条件为：94 ℃ 5 min；再经过30个循环，每个循环为94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s；最后72 ℃延伸5 min。将16S rRNA基因的PCR扩增产物送至上海派森诺生物科技有限公司进行测序，测序结果经Geneious检查测序质量后上传至NCBI网站进行标准序列比对，相似度达99%以上者为16S rRNA基因测序的菌种鉴定结果。

1.3统计学处理 采用Excel 2010进行数据处理和分析。

2 结 果

2.1患者年龄和性别构成分析 80例NTM肺病患者中男40例，女40例，男女比例为1∶1；年龄24～84岁，中位年龄62.28岁。根据年龄的不同，将患者分为青年组(24～<46岁)、中年组(46～<60岁)及老年组(≥60岁)。各组性别构成情况见表1。

表1 不同年龄组患者性别构成情况[n(%)]

2.2首发症状 80例NTM肺病患者中,首发症状以咳嗽、咳痰最多见，有68例(85.0%)，咯血有14例(17.5%)，气促有4例(5.0%)，发热有4例(5.0%)，胸痛有2例(2.5%)。

2.3合并疾病 80例NTM肺病患者中，合并支气管扩张40例，占50.0%；合并慢性阻塞性肺疾病2例，占2.5%；合并其他基础疾病：糖尿病6例，占7.5%；高血压12例，占15.0%；冠心病16例，占20.0%；慢性胃炎6例，占7.5%；血吸虫肝病2例，占2.5%；有手术史者4例，占5.0%，其中2例为肺癌切除术后，2例为甲状腺癌切除术后。

2.4病原学检查结果

2.4.1涂片抗酸染色结果 显微镜观察结果显示，80例NTM肺病患者中，涂片抗酸染色阳性30例，占37.5%。

2.4.2菌种分布 通过16S-23S rRNA测序，鉴定出胞内分枝杆菌48株(60.0%)，堪萨斯分枝杆菌16株(20.0%)，鸟结核分枝杆菌6株(7.5%)，脓肿分枝杆菌4株(5.0%)，龟分枝杆菌脓肿亚种、偶发分枝杆菌、戈登分枝杆菌各2株(2.5%)。

2.5影像学表现 80例NTM肺病患者中影像学表现为支气管扩张40例(50.0%)，结节24例(30.0%)，空洞18例(22.5%)，斑片影6例(7.5%)，胸膜钙化2例(2.5%)，肺大泡2例(2.5%)。

3 讨 论

NTM肺病患者数量在全球范围内呈不断上升趋势，其发病率在发达国家已超过肺结核,在发展中国家亦呈明显上升趋势[8]。NTM肺病的临床症状、影像学表现、涂片抗酸染色阳性与肺结核非常相似，极易发生误诊，故加强对NTM肺病临床特征以及菌种分布等的认识至关重要。

在本研究中，NTM肺病可以出现在各个年龄段，在老年人群占比最高，为65.0%(52/80)，这与大部分的研究结果一致[9-11]。关于NTM感染者的性别构成情况各研究结果不一，在安徽省的1项研究中，NTM感染者中女性比例明显高于男性[12]；在浙江省的1项研究中，NTM感染者中男性比例高于女性[13]。本研究中，男女NTM肺病患者人数相等，与上述研究结果不同可能与本研究纳入样本量较少及纳入研究人群不同(本研究为NTM肺病患者)有关，也可能与不同地区人口基数的差异有关。本研究中青年组有12例男性患者，但无女性患者这一结果值得临床关注。

本研究中，NTM肺病患者首发症状以咳嗽、咳痰最多见，因此咳嗽、咳痰2周以上，不光要考虑肺结核，也要考虑NTM肺病；合并疾病以支气管扩张最多。据报道，具有结构性或先天性肺部疾病的人群(如支气管扩张、慢性阻塞性肺疾病、肺结核、尘肺患者)感染NTM的风险明显增加，因此加强这些人群的健康宣教很重要[14]。本研究中NTM肺病患者影像学表现以支气管扩张最常见,与相关报道结果一致[12]。病原学分析显示，37.5%的患者标本涂片抗酸染色阳性，提示标本抗酸染色阳性的老年患者，肺部有支气管扩张改变，特别是合并肺气肿而长期进行治疗的免疫功能低下患者，需高度怀疑NTM感染。NTM的菌种分布存在明显的地域性差异，北美、澳大利亚、南非、日本、韩国等地区以鸟一胞内分枝杆菌复合群为主要菌种，其次为脓肿分枝杆菌；欧洲则以蟾分枝杆菌、玛尔摩分枝杆菌为主[11]。我国的1项多中心研究表明，胞内分枝杆菌是东部地区检出的主要NTM菌种，脓肿分枝杆菌在南部地区检出率高[15]。本研究显示，上海市青浦区检出的NTM以胞内分枝杆菌最多，占60.0%；其次是堪萨斯分枝杆菌，占20%。本研究发现的NTM分布特点可为上海市青浦区NTM的流行趋势研究提供参考，但本研究也具有一定的局限性，未对检出的NTM进行药敏试验，同时缺乏随访和转归数据以评价患者的治疗效果，后期应考虑在既往研究的基础上进一步完善药敏试验和随访结果分析。