不同采样时间，不同性状痰标本抗酸染色阳性率分析

李志毅

【摘 要】目的：比较不同时段、不同性状痰标本涂片，检出抗酸杆菌阳性率，探讨痰标本的质量、标本采样时间与抗酸杆菌检出结果的关系。方法：采用痰抗酸杆菌直接涂片检查，齐-尼抗酸染色，统计分析不同采样时间和不同性状痰标本的涂片检查的阳性检出率。结果：750份初诊夜间、清晨、即时咳出的干酪痰、血痰、粘液痰、唾液标本的涂片结果差异有统计学意义，晨痰、干酪痰检出率最高为28%、66.2%；不同性状，不同时间标本中阳性标本的分布均有统计学意义。结论：痰标本的质量、标本留取时间对痰涂片抗酸染色，阳性率有很大影响。

【关键词】染色；结核；肺；痰；抗酸杆菌；涂片

【中图分类号】R529.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2018）08--01

当前我国结核病控制方式主要是以痰检抗酸杆菌为主要手段的实验方法来发现传染源，通过痰涂片镜检发现肺结核是实施 DOTS 策略的关键，对结核病控制工作起着重要作用。 本文对可疑肺结核就诊者的不同采样时间、不同性状的痰标本的阳性率进行比较，以进一步提高涂阳肺结核病人发现率。

1 资料与方法

1.1 资料来源 2017年12月-1018年2月结核门诊接诊的咳嗽、咳痰超过三周、胸透异常的可疑肺结核症状者三份痰标本（夜间痰、晨痰、即时痰）的抗酸杆菌直接涂片检查结果。

1.2 标本分类

1.2.1 按照痰标本采集时间，标本分为三类 即时痰：化验时咳出的痰液；晨痰：患者晨起立即用清水漱口后，咳出的痰液；夜间痰：送检前一天，患者晚间睡前咳出的痰液。

1.2.2 按照痰标本性状，将其分为四类 干酪痰：标本外观以黄色（或奶酪色）、脓样、团块状的肺部分泌物为主；血痰：此类标本是因粘液痰或干酪痰标本中混有血液而形成，颜色为褐色或深褐色、鲜红色或伴有血丝；粘液痰：标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主；唾液：标本外观以透明或半透明水样、粘度较低的口腔分泌物为主，标本中有时伴有气泡。

1.3 实验方法 采用直接涂片法，挑取标本量0.05～0.1ml

涂抹10×20mm的卵圆形痰膜。 烘干后进行齐-尼染色（缸染法）：放置在100mL初染剂缸中进行染色，时间为15min，然后取出使用自来水冲洗，再放置在100mL脱色剂缸中，时间为5min，取出使用自来水冲洗，再置在100mL 复染剂缸中。流水冲洗待干镜检，双目光学生物显微镜镜检（目镜10×，物镜100×）。结果分级报告标准见《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》[1]。

1.4 质量控制 依照中国结核病防治规划《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》 、《结核病诊断细菌学检验规程》[2]进行涂片检查的室内和室间质量控制。

1.5 数据统计 使用 Ex cel 软件建立数据库，SPSS11.5软件进行统计分析。

2 结果

2.1 不同性状、不同留置时间痰标本构成比 750份标本中粘液痰所占比例最高为44.2%，其次为唾液标本为35.8%。见表1

2.2 不同性状痰标本的涂片检查情况 干酪痰、血痰、粘液痰和唾液检出率分别为66.2%、34.8%、15.0%和0.9%，干酪痰检出率最高，唾液标本检出率最低（=930.464，P <0.01）。 结果见表2。

2.3 不同留置时间痰标本的涂片检查的阳性检出情况 结果见表2。750份痰标本中抗酸杆菌涂片检查检出阳性标本128份，检出率为17.00%，即时痰、夜间痰和清晨痰的检出率分别为9.2%、14%和285%，晨痰检出率最高（=156.069，P <0.01）。

3 讨论

3.1 痰涂片抗酸染色显微镜镜检是一种技术相对简单，容易标准化和完成操作，所需设备投入少，检查成本低，迅速报告结果的一种方法；尤其对低收入且结核病疫情严重的地區或基层实验室，符合成本-效益原则的细菌学实验技术。 痰标本的留置时间、标本质量对痰涂片抗酸杆菌阳性率有很大影响。

3.2 本研究结果显示，750份痰标本的分布有明显差异，干酪样痰的比例中，清晨 >夜间>即时。血痰比例中，清晨>夜间 >即时，粘液痰比例中，清晨>夜间>即时，唾液中，即时>夜间>清晨；初诊可疑肺结核就诊者痰抗酸染色涂片阳性率17.0%，不同留取时间的痰标本涂片阳性检出率存在明显差异。

3.3 在不同性状的痰标本中，涂片染色阳性率以干酪样痰最高，其次为血痰、粘液痰、唾液。抗酸杆菌细胞壁中含有大量的脂质，是四型变态反应的物质基础，可结核结节形成，产生干酪样坏死。干酪样或脓性痰来自肺内脱落的干酪坏死组织，是抗酸杆菌较为集中的成分，来自患者呼吸道的深处，痰标本质量受检验因素影响较小，其检出率最高，血性痰其中一部分是干咳引起的细支气管破裂出血，不一定是真正的病灶出血，另外血性痰也会影响染色背景，因此检出率并没有最高；粘液痰因混有较多的上呼吸道分泌物使其检出率偏低；唾液可能是肺结核病人大量排菌期间，痰经口腔排出残留在口腔中，阳性率很低。

参考文献

卫生部疾病预防控制局 中国疾病预防控制中心.中国结核病防治规划.痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册[S].北京：中国协和医科大学出版社，2009.

中国防痨协会基础委员会.结核病诊断实验室检验规程[M].北京：中国教育出版社，2006.