樱桃砧木吉塞拉6 号快繁体系建立

2022-05-13刘智强

园艺与种苗 2022年3期

王淼，赵慧，王媚，安冬，刘智强

（大连市现代农业生产发展服务中心，辽宁大连 116036）

吉塞拉系列（Gisela）樱桃砧木源于德国Justus Liebig大学果树研究所，是将灰毛叶樱桃（Prunus canescens L.）和酸樱桃（Prunus cerasus L.）进行种间杂交培育而成的三倍体杂种[1]。吉塞拉系列樱桃砧木是目前国内外普遍认为的最优良的樱桃砧木，吉塞拉6 号（简称G6）具有矮化性、早果性、早丰产、耐涝、抗病、土壤适应能力强等优点，与大多数甜樱桃嫁接亲和[2]，作为早熟品种的矮化樱桃砧木，扩大种植规模可优化种植产业结构、提高市场供应，具有极高的经济效益和社会效益[3]。嫁接繁殖的方式可以显著提高樱桃的经济效益，因此选择并培育优良的樱桃砧木具有非常重要的意义。常规条件下，吉塞拉系列大樱桃矮化砧木存在繁殖困难的问题，采用分株繁殖速度较慢，扦插成活率低。研究该砧木丛生芽的诱导、继代、生根以及炼苗与移栽方面的组培快繁技术，旨在为大规模、快速生产该砧木组培苗提供理论和实践依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料。樱桃砧木吉塞拉6 号（G6）一年生枝条。

1.1.2 试验试剂。培养基各药品均为市售分析纯和生化试剂。

1.2 方法

1.2.1 樱桃外植体脱毒及增殖培养基筛选。取G6 一年生枝条，用清水冲洗干净，剪成1～2 cm 的茎段，在75%的酒精中浸泡30 s，用0.1 HgCl2消毒10 min，无菌水冲洗3次，接种于增殖培养基上。每处理6 瓶，每瓶接种4 个茎尖。培养基以MS 为基本培养基，附加不同浓度和不同种类的植物生长调节物质，诱导约60 d 后，统计分化率、增殖倍数。

1.2.2 壮苗培养基筛选。当不定芽长满瓶时，将吉塞拉6号大樱桃砧木的芽从培养瓶中取出，去除老化组织，进行切割，接于壮苗培养基中。以MS 培养基为基本培养基，试验不同浓度的6-BA、NAA、IBA 对材料平均高度的影响，每个处理6 瓶。

1.2.3 生根培养基筛选。选取苗高在1.5 cm 以上的健壮嫩苗，分别加入NAA 0.8 g/L、IBA 0.3 g/L+NAA 0.3 g/L、IAA 0.3 g/L+6BA 0.5 g/L+IBA 0.5 g/L +活性炭0.5 g/L 3种生根培养基中培养。暗培养5 d 后，再置于正常的光照条件下进行培养。每处理30 株，40 d 后调查生根率和单株根数。

1.2.4 项目测定及方法。

分化率（%）=（已分化的外植体数/接种外植体总数）×100。

增殖系数=瓶苗在一个周期内形成的有效苗数/接种苗数

1.2.5 数据处理。采用SPSS 软件对数据进行分析。

2 结果与分析

2.1 樱桃外植体脱毒及增殖培养基筛选

G6 外植体在6 号培养基上增殖能力最强，繁殖系数达3.4，且试管苗生长旺盛，叶片翠绿，玻璃化现象较少，试管苗茎尖褐化、枯死明显得到抑制（图1）；4 号、5 号培养基上增殖能力较强，增殖系数分别达2.9、3.0，生长情况较好；1 号和2 号培养基上增殖能力较差，且随着培养时间延长，易出现玻璃化现象，叶片呈水浸透明状。综上，分化效果最好的培养基为MS+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L，分化率及增殖倍数可达92%和3.4。

图1 G6 在不同分化培养基上的生长情况（从左至右分别为配方1～6）

2.2 壮苗培养基筛选

G6 组培苗在3 号和4 号培养基的壮苗效果最好，平均高度可达3.9 cm 和4.1 cm，但是在4 号培养基中，组培苗出现叶片变黄，茎尖枯死的现象，而在3 号培养基中，叶片翠绿，生长旺盛（图2）。综上，适合G6 组培苗壮苗的培养基为MS+6BA1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L。

表1 吉塞拉6 号在不同增殖培养基中的生长结果

表2 吉塞拉6 号在不同壮苗培养基中的生长结果

图2 G6 在不同壮苗培养基上的生长情况（从左至右分别为配方1～4 的生长情况）

2.3 生根培养基筛选

从表3 可以看出，1 号培养基苗的基部有愈伤组织出现，根系较粗而脆；2 号培养基生根率较高，但根数少，有时仅生长出一条细长的白色根，且易产生须根，根系较细而柔软；3 号培养基生根较好，一般8 d 左右就能看见较粗的小根长出，单株根数也较多，因此，最适合吉塞拉6 号生根的培养基为1/2MS+IAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L。