银马解毒颗粒、肺力咳合剂、桔贝合剂和复方鲜竹沥液的平喘及解热作用研究

王 真，黄廉展，邢高畅，高宏锦，杨 宁，宋佳媚，丁选胜

（中国药科大学 基础医学与临床药学学院，江苏 南京 211198）

慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease，COPD）、支气管哮喘等是临床常见呼吸系统疾病，其患病率呈逐年升高趋势，喘息或伴有发热是其常见症状，严重影响患者的生活质量，给社会和家庭带来严重的经济负担[1-2]，目前西药治疗虽然效果显著，但多存在药物滥用、多药耐药和不良反应发生率高等不合理用药问题[3-5]。现有临床报道显示，银马解毒颗粒、肺力咳合剂、桔贝合剂、复方鲜竹沥液均能显著缓解此类患者的发热、咳嗽、喘息等症状[6-13]。临床治疗上如何合理选用，缺乏相应的证据支持。为此，本研究采用豚鼠哮喘模型和大鼠脂多糖致热模型分别对银马解毒颗粒、肺力咳合剂、桔贝合剂、复方鲜竹沥液的平喘、解热作用进行对比研究，为临床合理用药提供参考依据。

1 材料

1.1 药品与试剂

银马解毒颗粒（批号：20110605，扬子江药业集团有限公司）；肺力咳合剂（批号：20190134，贵州健兴药业有限公司）；桔贝合剂［批号：18050035（平喘试验）、20010003（解热试验），太极集团重庆桐君阁药厂有限公司］；复方鲜竹沥液（批号：200203，江西天施康中药股份有限公司）；氯化乙酰胆碱（批号：F2005027，阿拉丁生化科技股份有限公司）；磷酸组胺（批号：11956450，麦克林生化科技有限公司）；脂多糖（批号：0000089172，Sigma 试剂公司）；生理盐水（批号：19122444，中国大冢制药有限公司）；甘油（批号：20201203，国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 动物

豚鼠，体质量为210 ～ 260 g，180 只，雌雄各半，由南京市浦口区莱芙养殖场提供，动物许可证号SCXK（苏）2019-0005。SD 大鼠，SPF 级，体质量为180 ～ 220 g，240 只，雌雄各半，由浙江省医学科学院和杭州医学院提供，动物许可证号SCXK（浙）2019-0002。饲养温度为20 ～ 25 ℃，湿度为40% ～60%，昼夜明暗交替时间12 h/12 h，动物饲料购自南京市青龙山动物繁殖场，质量符合GB/T14924.9-2001。实验中动物的处理符合中国药科大学实验动物伦理委员会的相关规定。

1.3 仪器

402B 型超声雾化器（南京鱼跃医疗器械有限公司）；MC-347型电子体温计［欧姆龙（大连）有限公司］。

2 方法

2.1 平喘试验

豚鼠适应性饲养后，随机分为连续给药3 d 组、5 d 组、7 d 组。每个连续给药时间组分为：正常组，银马解毒颗粒低、中、高剂量组（以下简称银马低、中、高剂量组），肺力咳合剂组（以下简称肺力咳组），桔贝合剂组（以下简称桔贝组），复方鲜竹沥液组（以下简称鲜竹沥液组），每组8 只，雌雄各半。

连续给药3 d 组、5 d 组、7 d 组分别于末次给药后1 h 让豚鼠接受喷雾刺激，用超声雾化器将0.1%磷酸组胺和2.0%氯化乙酰胆碱等容积混合液以最大流速向密封容器（容积4 000 mL）喷雾15 s[14-15]，将豚鼠放入其中接受喷雾15 s，记录自接受喷雾起出现哮喘的潜伏期（哮喘分级：Ⅰ呼吸加速、Ⅱ呼吸困难、Ⅲ抽搐、Ⅳ翻倒，以Ⅳ翻倒为标准，动物一旦跌倒，立即取出，以免因窒息而死亡）。

2.2 解热试验

大鼠适应性饲养后，每日2 次对其进行适应性测肛温，测温前排空粪便，电子体温计探头用甘油润滑，轻轻插入大鼠肛门2 cm，连续3 d 使其适应环境和测温刺激。正式试验前，为使大鼠体温保持稳定，结合文献以及实验室环境条件，大鼠禁食不禁水6 h，每0.5 h 测体温1 次，连续3 次，留用体温变化不超过0.5 ℃及体温不超过38 ℃的动物[16]。取留用大鼠，随机分为连续给药3 d 组、5 d 组、7 d 组，每个连续给药时间组分为：正常组，模型组，银马解毒颗粒低、中、高剂量组（以下简称银马低、中、高剂量组），肺力咳合剂组（以下简称肺力咳组），桔贝合剂组（以下简称桔贝组），复方鲜竹沥液组（以下简称鲜竹沥液组），每组10 只，雌雄各半。

连续给药3 d 组、5 d 组、7 d 组大鼠于末次给药当天禁食不禁水6 h，每0.5 h 测体温1 次，连续3 次，平均体温作为基础体温。末次给药后，除正常组注射生理盐水外，其它组均按100 μg/kg 体质量腹腔注射LPS 造模，造模后第2.5 h 开始，每0.5 h 测一次肛温，直至造模后8 h[16-17]。计算各时间点体温上升高度（ΔT）、计算体温最大上升高度（ΔTmax）、3 ～ 8 h 体温反应指数（TRI 5，以-2 为基线，ΔT 为纵坐标，以体温变化曲线与基线之间的面积表示体温反应指数）。

2.3 剂量设置

银马解毒颗粒低、中、高剂量组分别为临床成人日等效剂量（ED）的0.5 倍、1 倍、2 倍，肺力咳合剂、桔贝合剂、复方鲜竹沥液均采用临床成人日等效剂量，根据《药理实验方法学》[18]中剂量换算原则，各给药组给药剂量见表1。

2.4 统计学方法

用SPSS 25.0 软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析。以P＜ 0.05 为差异具有统计学意义。

表 1 各给药组剂量设置表Tab. 1 Dose of each administration group

3 试验结果

3.1 平喘试验

通过试验研究各组药物对豚鼠哮喘反应潜伏期的影响。与正常组相比，给药3、5、7 d 后，肺力咳组、桔贝组、鲜竹沥液组均能延长哮喘潜伏期（P＜ 0.05），银马低剂量组给药7 d 时开始延长哮喘潜伏期（P＜0.05），银马中剂量组给药5 d 开始延长哮喘潜伏期（P＜ 0.05），银马高剂量组给药3 d 开始延长哮喘潜伏期（P＜ 0.05）。给药5 d 时，与银马低剂量组相比，银马高剂量组哮喘潜伏期延长（P＜ 0.05）。给药3、5、7 d，与银马中剂量组相比，肺力咳组、桔贝组、鲜竹沥液组哮喘潜伏期差异均无统计学意义（P＞ 0.05），见图1。比较连续给药3、5、7 d 组间平喘作用强度，发现各给药组平喘潜伏期随给药时间的延长而延长，但差异无统计学意义（P＞ 0.05）。

图 1 给药期间各组药物对豚鼠哮喘反应潜伏期的影响（±s，n = 8）Fig. 1 Effects of each drug on the latency period of asthma in guinea pigs during administration（±s，n = 8）

3.2 解热试验

3.2.1 各组药物对大鼠体温上升高度的影响 连续给药3、5、7 d，与正常组相比，模型组大鼠体温均明显升高（P＜ 0.05）。与模型组相比，给药3 d 时，银马低剂量组在造模后6.5 h 至8 h，银马中、高剂量组在造模后6 h、鲜竹沥液组在造模后8 h 体温明显降低（P＜ 0.05）。给药5 d 时，银马低剂量组在造模后3.5、6 h，银马中剂量组在造模后2.5、6 h，肺力咳组在造模后2.5 h 至3.5 h，桔贝组在造模后3.5 h体温明显降低（P＜ 0.05）。给药7 d 时，银马低剂量组在造模后3.5、4.5、6、7 h，银马中剂量组在造模后3.5 h、6.5 h 至8 h，银马高剂量组在造模后5.5、6.5、7 h，桔贝组在造模后7 h 体温明显降低（P＜ 0.05）。与银马中剂量组相比，给药3 d、5 d、7 d，肺力咳组、桔贝组、鲜竹沥液组体温在个别时间点可出现明显升高（P＜ 0.05），见图2—图4。

图 2 给药3 d 各组药物对大鼠体温的影响Fig. 2 Effect of drugs on body temperature in rats in 3 d subgroup

3.2.2 各组药物对大鼠体温反应指数的影响 与模型组相比，给药5 d 时，银马低剂量组大鼠TRI 5明显降低（P＜ 0.05）；给药7 d 时，银马低、中、高剂量组大鼠TRI 5 明显降低（P＜ 0.05）。与银马中剂量组相比，桔贝组在给药3 d、鲜竹沥液组在给药5 d、肺力咳组在给药7 d 时，TRI 5 明显升高（P＜0.05），见图5。

图 3 给药5 d 各组药物对大鼠体温的影响Fig. 3 Effect of drugs on body temperature in rats in 5 d subgroup

图 4 给药7 d 各组药物对大鼠体温的影响Fig. 4 Effect of drugs on body temperature in rats in 7 d subgroup

3.2.3 各组药物对大鼠体温最大上升高度的影响

与模型组相比，给药5 d 时，银马低剂量组大鼠ΔTmax明显降低（P＜ 0.05）；给药7 d 时，银马中剂量组、高剂量组大鼠ΔTmax明显降低（P＜ 0.05）。与银马中剂量相比，桔贝组、鲜竹沥液组ΔTmax分别在3 d、7 d 时明显升高（P＜ 0.05），见图6。

图 5 给药期间各组药物对大鼠TRI 5 的影响Fig. 5 Effects of each drug on the TRI 5 in rats during administration

图 6 各组药物对大鼠最大体温上升高度的影响Fig. 6 Effects of each drug on the ΔTmax in rats during administration

4 讨论

磷酸组胺和氯化乙酰胆碱通过激动支气管平滑肌M 胆碱受体和组胺H1 受体，可引起支气管平滑肌收缩，是哮喘常用模型，正式给药前，需要筛选敏感豚鼠，潜伏期以120 s 为界，超过视为不敏感[14-15]，本试验对豚鼠的筛选合格率为100%。LPS 为革兰阴性菌的活性成分，是动物发热实验中常用的致热剂[19-21]，预试验结果发现，大鼠在注射后2 h内出现第一相热，由于第一相热是由应激和大鼠的个体差异引起的，因此未对第一相热进行比较研究[22]。

本次研究发现，银马解毒颗粒、肺力咳合剂、桔贝合剂、复方鲜竹沥液均具有平喘和解热作用。平喘实验结果表明，银马解毒颗粒高剂量起效较快，中剂量次之，低剂量较慢；随着给药时间延长，银马低、中剂量开始发挥平喘作用；四种药物在作用强度上无显著性差异。分析药物组成发现，银马解毒颗粒中马齿苋、车前草、甘草；肺力咳合剂中黄芩、前胡、甘草；桔贝合剂中黄芩、苦杏仁、桔梗；复方鲜竹沥液中鱼腥草、桔梗，均具有延长豚鼠引喘潜伏期，松弛气管平滑肌的作用[23-30]。

解热试验结果表明，银马解毒颗粒中剂量（临床等效剂量）组在各给药时间内均表现为起效较快，且给药5 d、7 d 均在模型组达峰前起效，给药7 d 时维持时间最长。给药5 d 时，肺力咳合剂、桔贝合剂在模型组达峰前起效，肺力咳合剂维持时间较长。TRI 5和ΔTmax结果显示，随着给药时间延长，与模型组相比，银马解毒颗粒降低TRI 5 和ΔTmax的作用更明显，提示银马解毒颗粒发挥解热作用呈时效关系，并具有降低整体发热程度的作用。制剂组成分析可见，四种中成药均有寒性药材组成，具有清热之功效。中医认为，肺与大肠相表里[31]，热结大肠，腑气不通，不仅影响肺之宣发，肃降，或致咳或致喘，且燥屎坚结，又伤津液，使热势更重，通腑泻热法可釜底抽薪，下泻燥结，使腑气得通，肺气得宣，邪热得解[32]。银马解毒颗粒中的大黄具有通腑泻热之功[33-34]，这可能是其发挥解热作用的独特之处。

5 结论

银马解毒颗粒、肺力咳合剂、桔贝合剂、复方鲜竹沥液均具有平喘、解热作用。平喘作用上，四种制剂作用强度相当。解热作用上，银马解毒颗粒作用较强且稳定，具有时效关系。该研究结果可为临床合理用药提供一定的参考依据。但本次研究仅考察了四种制剂的平喘及解热作用，其它方面的作用及作用机制有待进一步研究。