碱性复红染色法与金胺-罗丹明染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的应用效果对比

张海燕，景一娴

（重庆市公共卫生医疗救治中心医学检验科，重庆 400030）

结核病的发生与结核分枝杆菌感染密切相关。此病是一种慢性传染性疾病。尽早对此病患者的病情进行准确的诊断并及时对其进行有针对性的治疗对改善其预后具有十分重要的意义。进行结核分枝杆菌痰标本分离培养的耗时较长，利用固体改良罗氏培养基进行分离培养至少需要20 d，最长可需要60 d[1]。目前临床上通常会采用痰涂片法进行结核分枝杆菌检测，该检测方法具有操作相对简单、费用较低等优点[2]。近年来，随着痰涂片染色技术的不断发展，荧光痰涂片染色技术在结核分枝杆菌痰涂片检测中得到了广泛的应用。有研究指出，金胺-罗丹明染色法（又叫金胺O 荧光染色法）在结核分枝杆菌痰涂片检测中的应用效果较好。本文对2020 年5 月至2021 年4 月期间在我中心接受结核分枝杆菌痰涂片检测的2480 例患者进行研究，旨在比较碱性复红染色法与金胺- 罗丹明染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的应用效果。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2020 年5 月至2021 年4 月期间在我中心接受结核分枝杆菌痰涂片检测的2480 例结核病患者作为本次研究的对象。

1.2 方法

1.2.1 试剂和仪器 本研究中使用的检测仪器和试剂包括碱性复红染色试剂盒、金胺- 罗丹明染色试剂盒、荧光显微镜、结核荧光染色阅片机、生物安全柜等。

1.2.2 检测方法 为2480 例患者均分别采用碱性复红染色法和金胺- 罗丹明染色法进行结核分枝杆菌痰涂片检测，方法是：采集患者的痰标本，将每份痰标本分别制成两张涂片。分别采用碱性复红染色法和金胺- 罗丹明染色法对两张涂片进行染色，然后对其进行镜检。在进行碱性复红染色时，需要对涂片进行5 min 的加热。在完成染色后，将涂片置于1000 倍显微镜下进行观察。在进行金胺- 罗丹明染色时，需要对涂片进行15 ～20 min 的冷染。在完成染色后，将涂片置于400 倍显微镜下进行观察。

1.3 观察指标

比较2480 例患者进行上述两种检测时的阳性检出率、检测结果的阳性分级情况、读片时间及用两种检测诊断其病情的灵敏度、特异度。

1.4 统计学处理

对本文中的所有数据均采用SPSS 20.0 统计学软件进行分析，计量资料用均数± 标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ² 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2480 例患者进行两种检测时阳性检出率的比较

这些患者进行碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的阳性检出率为11.01%（273/2480），其进行金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的阳性检出率为18.06%（448/2480）。这些患者进行金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的阳性检出率高于其进行碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的阳性检出率，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 这些患者进行两种检测时阳性检出率的比较

2.2 用两种检测方法诊断这些患者病情灵敏度及特异度的比较

用金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断这些患者病情的特异度、灵敏度均高于用碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断其病情的特异度、灵敏度，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2、表3、表4。

表2 这些患者碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测的结果与结核分枝杆菌痰培养检测的结果（例）

表3 这些患者金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测的结果与结核分枝杆菌痰培养检测的结果（例）

表4 用两种检测方法诊断这些患者病情灵敏度及特异度的比较（%）

2.3 这些患者进行两种检测时检测结果阳性分级的比较

这些患者进行金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测与进行碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测时检测结果的阳性分级相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表5。

表5 这些患者进行两种检测时检测结果阳性分级的比较[ 例（%）]

2.4 这些患者进行两种检测时读片时间的比较

这些患者进行碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的读片时间为（4.30±0.52）min，其进行金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的读片时间为（2.08±0.28）min，二者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

对于结核病患者，目前临床上主要是采用结核分枝杆菌痰涂片检测诊断其病情[3-4]。碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测是目前临床上常用的结核分枝杆菌痰涂片检测方法[5-6]。相关的研究表明，用金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断结核病患者病情的特异度、灵敏度和准确率均较高[7]。徐凤美[8]的研究表明，与采用碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测相比，用金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断结核病患者病情的特异度、灵敏度均较高。这与本研究的结果相符。本研究的结果显示，用金胺-罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断2480 例结核病患者病情的特异度、灵敏度均高于用碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测诊断其病情的特异度、灵敏度，差异有统计学意义（P＜0.05）。有研究指出，在进行结核分枝杆菌痰涂片检测的过程中采用碱性复红染色法对痰涂片进行染色存在操作繁琐、读片时间长等缺点。近年来，随着痰涂片染色技术的不断发展，荧光痰涂片染色技术在结核分枝杆菌痰涂片检测中得到了广泛的应用。有研究指出，金胺- 罗丹明染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的应用效果较好，具有镜检视野佳、读片时间短等优点[9-10]。这与本研究的结果相符。本研究的结果显示，2480 例患者进行金胺- 罗丹明染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的读片时间短于其进行碱性复红染色结核分枝杆菌痰涂片检测时的读片时间，差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，与碱性复红染色法相比，金胺-罗丹明染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的应用效果较好。此法值得在临床上推广应用。