977例胎儿羊水染色体检查结果分析及其临床意义

章易琳，倪观太，王玉萍

(皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院 1.妇产科；2.检验科，安徽 芜湖 241001)

染色体变异是一种可遗传变异，主要包括结构变异和数目变异，可使生物体形状发生改变，胎儿染色体变异会使其发育异常，导致其出现先天缺陷，甚至出现胎儿畸形或死胎[1]。产前诊断是降低出生缺陷发生率的主要方式，可通过产前诊断尽早发现存在先天畸形或遗传缺陷的胎儿，并对其给予及时的宫内治疗或对严重缺陷儿给予终止妊娠，从而可降低缺陷儿出生率[2]。羊水染色体检查是检查胎儿染色体及先天性代谢疾病的产前诊断方法，可通过羊膜穿刺术，对其进行染色体核型分析，能够了解胎儿细胞染色体核型，从而可诊断胎儿染色体是否异常[3]。本研究分析977例胎儿产前羊水染色体检查结果，旨在探究羊水染色体检查的临床价值，为产前诊断提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析2015年1月～2019年10月在弋矶山医院就诊的有产前诊断指征的977例高危孕妇的病历资料，年龄22～47岁，平均(31.56±6.73)岁；产前诊断指征：高龄296例，唐筛高风险412例，无创DNA高风险56例，超声异常表现79例，不良孕产史77例，其他53例。纳入标准：①存在产前诊断指征[4]；②经我院伦理委员会审核通过，孕妇知情同意且签署知情同意书。排除标准：①严重心肝肾功能异常者；②存在相关检查禁忌证如先兆流产、体温超过37.5 ℃、前置胎盘者。

1.2 方法

1.2.1 羊水细胞培养 抽取20 mL羊水，离心、混匀后吸取0.5 mL细胞悬液接种于50 mL培养瓶中，置于培养箱(37℃、5%)中行羊水培养。

1.2.2 染色体制备 羊水细胞镜检时可见多个细胞克隆后加入20 μg/mL秋水仙素，3 h后刮刀法获取细胞，离心处理10 min后，取下层液体，加入8 mL 0.075 mol/L氯化钾溶液，并在37℃环境下加1 mL固定液(甲醇：冰乙酸=3∶1)固定5 min，离心，弃上清液，然后按上述操作重复固定2次，固定完成后进行常规滴片、显带、染色处理，参照ISCN2009标准进行染色体核型分析。

1.3 观察指标 ①统计羊水细胞培养结果，并分析染色体异常核型及染色体多态性检出情况。②比较不同年龄组及不同产前诊断指征异常核型检出率。③比较不良孕产史高龄产妇异常核型检出率。④比较无创DNA高风险组高龄产妇异常核型检出率。

2 结果

2.1 羊水细胞培养结果 977例孕妇中因细胞过少及活力不足培养失败4例，羊水细胞培养成功973例，成功率为99.59%。

2.2 染色体异常核型检出率 在染色体结构异常方面，其各种类型检出率较低；而在染色体数目异常方面，常染色体数目异常检出率较高(4.52%)，见表1。

表1 染色体异常核型检出率

2.3 染色体多态性检出情况 染色体多态性共检出72例，其中短臂多态变异检出率为31.86%(31/973)，次缢痕区多态变异检出率为42.14%(41/973)。

2.4 不同年龄组异常核型检出率比较 35～39岁高危产妇异常核型检出率高于<35岁、≥40岁产妇(χ2=19.763，P<0.05)，见表2。

表2 不同年龄组异常核型检出率比较

2.5 不同产前诊断指征检出率比较 无创DNA高风险产妇染色体异常核型检出率高于其他产前诊断指征，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

2.6 不良孕产史高龄产妇异常核型检出率比较 夫妻一方存在染色体异常组、唐氏儿分娩史组、畸形儿生育史组各组异常核型检出率比较，差异无统计学意义(P=0.081)，见表4。

2.7 无创DNA高风险组高龄产妇异常核型检出率 21三体高风险组异常核型检出率高于13三体高风险组及性染色体数目异常组(P<0.05)，见表5。

表3 不同产前诊断指征异常核型检出率比较

表4 不良孕产史高龄产妇异常核型检出率比较

表5 无创DNA高风险组高龄产妇异常核型检出率

3 讨论

大多数出生缺陷儿为遗传因素所致，其中以染色体异常最为常见。有报道指出，通过产前诊断可降低缺陷儿的出生率[5-6]。染色体核型分析是目前产前诊断染色体异常的主要方式，可采取羊水进行细胞培养，然后通过分析染色体核型来判断胎儿是否存在遗传缺陷或先天畸形[7]。本研究对孕18～22周的高危孕妇进行羊水染色体检查，染色体异常核型检出率为7.61%，略高于Bhorat等[8]的研究，主要因为Bhorat等的研究在进行羊水细胞培养前，已将B超筛查出的多发畸形胎儿排除在外，使其染色体核型异常检出率低于本研究。染色体核型异常主要可分为染色体结构异常和数目异常，但目前尚无报道指出何种染色体变异类型的发生率较高。本研究发现在染色体结构异常上，其各种类型检出率较低；而在染色体数目异常上，常染色体数目异常检出率较高，这主要是生殖细胞在第一次或第二次减数分裂时，染色体不分离导致的，而随着孕妇年龄的增长，其出现染色体不分离的概率也增加，且本研究中高龄产妇所占比例较大，从而导致常染色体数目异常的检出率较高。

随着二孩政策的开放，高龄产妇也随之增加。先天愚型胎儿等缺陷儿的出生率会随着孕妇年龄的增加而成倍增加，这表明产妇的年龄与先天缺陷的发生率密切相关[10]。高龄产妇的卵子质量远低于最佳孕龄女性，其染色体也会发生变化，易导致胎儿畸形的出现。本研究发现，35～39岁高危产妇异常核型检出率高于<35岁者，这说明染色体核型异常发生的风险性与年龄有关，因此需对高龄产妇做好排畸检查，以减少畸形儿的出生。但本研究结果显示35～39岁高危产妇异常核型检出率高于≥40岁产妇，与冯杏琳等[11-12]研究结果存在差异，可能是由于40岁以上高龄组样本量较小，检出率低于实际发生率。

产前诊断一般分为创伤性、无创性两类，创伤性产前诊断主要包括羊膜腔穿刺、脐血取样等，超声和无创DNA是最常用的无创性产前诊断方法，但超声只能对已出现的器官或肢体畸形做出诊断，无法判断染色体异常疾病[13]。无创DNA产前检测是一种新型产前检测方法，用于检测各种染色体数目异常类疾病，无创DNA高风险是指胎儿患先天愚型的概率较高[14]。有报道指出，无创DNA检测染色体异常核型的准确率较高[15]。本研究结果显示，无创DNA高风险产妇染色体异常核型检出率高于其他产前诊断指征(P<0.05)，且超声诊断的检出率仅为7.59%，这说明无创DNA检测的准确率较高，与上述研究一致，因此可将无创DNA检查应用于产前诊断中，但无创DNA由于价格昂贵，现阶段尚不能完全普及。21三体综合征检查又称为唐氏综合征检查，本研究在进行无创DNA高风险检测时，发现21三体高风险组异常核型检出率高于13三体高风险组及性染色体数目异常组，与古丽娜孜·米吉提等[16]的研究结果相同，说明胎儿染色体异常中21号染色体异常发生率较高，这主要是因为唐氏综合征的发病率高于其他染色体数目异常疾病。

不良孕产史是指患者曾经有过死胎、出生缺陷等非正常妊娠情况。有生育过畸形或染色体异常患儿的产妇再次出现染色体核型异常的概率远高于正常产妇，这表明不良孕产史与产妇再次生育时出现染色体核型异常具有相关性[17]。夫妻一方存在染色体异常者生育染色体异常核型胎儿的概率较大，这主要是因为夫妻一方携带异常染色体时遗传给胎儿的概率远高于正常人群。但在本研究中，不良孕产史各组异常核型检出率比较差异无统计学意义，这与唐敬龙等[18]大样本不良孕产夫妇染色体核型分析结果不一致。笔者认为主要与本研究不良孕产史高龄组样本量较小有关，有待与进一步扩大样本量进行对照研究。在临床产诊中该类孕妇仍需按时进行孕检及相关检查，以做到早发现早干预，减少缺陷儿的出生。

综上所述，在染色体核型异常中，常染色体数目异常的检出率高于性染色体异常检出率，无创DNA检测诊断染色体异常核型的准确率高于其他产前诊断指征。21三体高危孕妇异常核型检出率高于其他染色体数目异常孕妇。因此，需加强高龄不良孕史及具有DNA高风险孕妇的唐氏儿无创产前筛查，以减少缺陷儿的出生，提高出生人口质量。