蒙药草果四味汤散挥发油的GC-MS法分析

全 霞 赵智娟

1.呼和浩特市蒙医中医医院，内蒙古 呼和浩特 010000；2.科尔沁左翼中旗食品药品检验所，内蒙古 通辽 029300

蒙药复方制剂草果四味汤散又名嘎古拉-4汤，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》(蒙药分册)，可调节“赫依”、健脾胃[1]。蒙医临床上用于上行“赫依”、持命“赫依”之病。本方出自经典蒙医药著作《医方封集》，本方性温，为脾赫依病主方，方中以祛脾胃寒气之草果为主药；以抑赫依，止痛之良药丁香和木香为辅药；配以小茴香为伍；共研细末，制成散剂[2]。现代药理学研究[3]表明，草果四味汤散具有抗胃炎、抗镇静、抗镇痛及一定的保护心肌细胞损伤等作用。在蒙医临床上治疗赫依病的药材多数含有挥发性成分，也是蒙医药治疗疾病的特色之处。本方草果四味汤散中的草果、丁香、木香和小茴香均含有挥发油性[4-7]成分，但是未见到对于草果、丁香、木香和小茴香组成的蒙药复方制剂草果四味汤散的挥发油分析的报道，因此，笔者从草果四味汤散中挥发性成分治疗赫依病为出发点，采用GC-MS法分析本方中的挥发性成分，为该复方组成后挥发性成分的变化规律及复方配伍规律的进一步研究开发提供科学依据。

1 材料

5977B-8890型气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦)；环己烷为分析纯(天津市大茂化学试剂厂)；试验用草果四味汤散购买于内蒙古库伦蒙药有限公司(批号：200710)。

2 方法

2.1 色谱条件 色谱柱HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；载气为氦气(99.999%)；载气流速为1.0 mL·min-1；检测器温度为250 ℃；分流比为20∶1；进样口温度260 ℃；柱温采取程序升温：起始温度为60 ℃柱温，以流速10 ℃·min-1速率升至120 ℃，恒温5 min；再以10 ℃·min-1速率升至180 ℃，恒温10 min；再以5 ℃·min-1速率升至240 ℃,进样量为 1 μL，溶剂延迟2 min。

2.2 质谱条件 电离方式为电子轰击离子源(EI)；电子能量为70 eV；传输线温度280 ℃；离子源温度230 ℃；四级杆温度为150 ℃；质量扫描范围50～550 amu；溶剂延迟2 min；草果四味汤散的GC-MS图谱如图1所示。

2.3 草果四味汤散挥发性成分的提取与供试品的制备 称取草果四味汤散200 g，置500 mL的圆底烧瓶中，加2倍量的蒸馏水，采用水蒸气蒸馏法提取4 h，得到草果四味汤散挥发油；取100 μL草果四味汤散挥发油，加环己烷定容至1 mL，用 0.25 μm 滤头滤过，备用。

3 结果

按照上述“2.1”和“2.2”项下测定条件下，对草果四味汤散挥发油进行GC-MS分析，并将所分离得出的草果四味汤散挥发油化合物的质谱图与NIST08谱库进行相关检索，以及结合相关文献报道数据对草果四味汤散挥发油化学成分进行结构解析；采用峰面积归一化法计算草果四味汤散挥发油各化学成分的相对百分含量。草果四味汤散挥发油主要化学成分及其相对百分含量结果见表1。

表1 草果四味汤散挥发油主要化学成分及其相对百分含量结果

续表1 表1 草果四味汤散挥发油主要化学成分及其相对百分含量结果

4 讨论

挥发油是草果四味汤散的一类主要化学物质群，治疗“赫依”病的药材大多数含有挥发油，本文首次对草果四味汤散的挥发油进行GC-MS分析，在图谱库检索以及文献报道的基础上，从草果四味汤散挥发油中共分离出25个峰，其中鉴定出24种化学成分，其中主要成分是茴香烯(Anethole)、1,8,11,14-十七烷四烯(1,8,11,14-Heptadecatetraene)、苦艾素(Azuleno[4,5-6]furan-2-(3H)-one)、石竹烯(Garyophyllene)、乙酸香叶酯(Geranyl acetate)等，分别占总挥发油的19.07%、7.86%、7.24%、5.50%、5.22%等。通过查阅相关文献，从草果四味汤散挥发油中鉴定的成分与草果、丁香、木香和小茴香所含的挥发油进行比较，发现草果所含的乙酸香叶酯[4]、丁香所含的苦艾素[5]、木香所含的石竹烯[6]、小茴香所含的茴香脑(即茴香烯)[7]等共性成分均被从草果四味汤散挥发油中鉴定出来，也有一些丁香酚和木香烃内酯等主要成分未被检出，其化学成分的变化规律有待进一步深入研究。对于草果四味汤散来说，它的化学成分具有复杂性和多样性，其中挥发油是多种成分中的一类，本实验首次对其进行GC-MS分析，希望通过进一步的深入研究，为阐明其活性部位、作用机制等提供科学依据。

草果四味汤散是由草果、丁香、木香和小茴香组成的经典蒙药验方，其中四味组成药物均含有挥发油，挥发油也是草果四味汤散治疗“赫依”病的物质基础，草果、丁香、木香和小茴香组成草果四味汤散后所含有的挥发油发生了哪些改变、是结构发生改变、还是含量有所变化、这些问题目前还未待阐明，针对上述问题，作者首先对草果四味汤散进行挥发油的提取，通过气相色谱-质谱联用技术对其进行挥发油成分的分离鉴定，并在草果、丁香、木香和小茴香的挥发油研究文献报道的基础上，对单味药和复方中挥发性成分进行比较讨论，初步阐明了草果四味汤散组方后挥发油的变化。