中油桃4 号丛生芽诱导及增殖激素配比试验

陈 雪

（大连市现代农业生产发展服务中心 大连 116030）

桃[Prunus persica（L.）Batsch]是世界上重要的落叶果树之一，其果实味道鲜美、营养丰富，颇受消费者欢迎。传统桃树育种周期长、工作量大，如何缩短桃的育种时间和提高育种效率是桃树育种工作者长期追求的目标[1]。中油4 号油桃是由中国农业科学院育成的油桃新品种具有早熟、口感好等优点，中油4 号油桃呈淡黄色，色泽光亮，核较小，果实较大，平均单果质量为156 g，最大可达到202 g。相比于其他同类水果中油4 号油桃质量较优且更加耐长途运输，是大连地区温室桃栽培的主要品种，颇受大连地区农户的欢迎，随着温室桃需求的增加，传统的苗木繁殖方法受时间限制，且易受病害侵染，降低了生产能力，鉴于植物组织培养快繁技术趋于成熟[2-3]，其繁殖的速度快，且不受地区、气候的影响，可及时提供大量优质种苗。目前在中油桃4 号快速繁殖技术方面还处于空白阶段，因此本试验对中油桃4 号丛生芽诱导及增殖的激素配比进行筛选，旨在为中油桃4 号快速繁殖奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 无菌外植体 选取1 年生中油桃4 号健壮、无病虫害的嫩枝茎段为外植体[4]。茎段长度为2 cm，流水冲洗30 min。75%酒精浸泡外植体30 s，无菌水冲洗3 次，再用5% NaClO 浸泡外植体5 min，无菌水冲洗3 次。外植体接种到不同激素（玉米素ZT 和赤霉素GA3）配比的芽诱导培养基中[5]，见表1。接种后置于培养室内光照培养，光照时间为10~12 h/d，光照强度为2 000 lx，培养室温度25 ±2 ℃[6]。

1.2 芽萌发诱导 每种处理接种60 个外植体于芽萌发诱导培养基中，诱导培养基均以MS 培养基为基本培养基（见表1），培养35 d 后，统计其萌芽率[7]。

表1 芽萌发诱导培养基 /（mg/L）

1.3 丛生芽诱导 经过芽萌发培养后，切取脱毒嫩芽，接种到丛生芽诱导培养基，诱导培养基均以MS 培养基为基本培养基（见表2）。每种处理接种30 个外植体；35 d后统计其平均株高、平均叶片数及增殖系数[8]。平均株高=苗的总高度/苗的总数平均叶片数=叶片总数/苗的总数增殖系数=增殖后的幼芽数/接种的外植体数

表2 丛生芽诱导培养基 /（mg/L）

1.4 生根诱导 丛生芽分切为的单芽，接种到生根培养基，诱导培养基均以MS培养基为基本培养基（见表3）。每种处理接种30 个外植体；35 d 后统计其平均根数、平均根长、平均株高及生根率。平均根数=生根总数/接种外植体数平均根长=根的总长度/根的总数生根率=（生根的外植体数/接种的外植体数）×100%

表3 生根诱导培养基 /（mg/L）

2 结果与分析

2.1 外源激素对中油桃4 号诱导芽萌发的影响 本试验的9 种芽萌发诱导培养基对中油桃4 号芽萌发的影响差异较大。表4 可见，经9 种处理组合培养基诱导后，都能够促使中油桃4 号初代外植体萌芽，但以在处理中M6 的萌芽率最高，达到87%，随着ZT 浓度的增加，萌发率逐渐呈降低趋势，当ZT在适当的浓度时，GA3对芽萌发的诱导影响较小。

表4 外源激素对中油桃4 号芽萌发诱导的影响

2.2 外源激素对中油桃4 号诱导丛生芽的影响 在MS 培养基中添加不同浓度GA3、ZT 对中油桃4 号带芽茎段进行增殖培养，培养35 d后的统计结果见表5。

表5 外源激素对中油桃4 号丛生芽诱导的影响

腋芽萌发后再加入GA3（0.5 mg/L）和ZT（3.0 mg/L）的Z2 处理中，中油桃4 号的长势最好，增殖系数最高可达4.37，高于其他处理。在继代两次后统计不同培养基上芽增殖率中发现，ZT 的浓度不易过高，过高影响腋芽的增殖。将丛生芽分割反复进行继代，能够获得大量的无菌苗，可以满足大批量的规模化生产。

2.3 外源激素对中油桃4 号诱导生根的影响 从表6 可见，9 种处理组合均可诱导中油桃4 号带芽茎段生根，在MS 为基本培养基的处理组合中，综合而言，在所有处理组合中以处理S5 的效果最好，其主根粗壮、须根较多，培养苗整体长势较壮，生根率达到了63%。因此，中油桃4 号最适生根培养基的组成为MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

表6 外源激素对中油桃4 号生根诱导的影响

3 结论与讨论

本研究对影响中油桃4 号的离体快繁的激素进行分析，初步筛选出芽萌发、丛生芽及生根诱导的培养基配方。最适芽萌发培养基MS+ZT（2.5 mg/L）+GA3（0.5 mg/L）；丛生芽诱导最佳增殖培养基为MS+GA3（3.0 mg/L）+ZT（0.5 mg/L）；最适生根培养基MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

同时发现光照度对中油桃4 号增殖培养是影响组培苗光合作用和生长的内在因素。光照为3 000 lx时，增殖系数和平均芽长均最高，植株生长健壮；光照度为0 lx 时，虽然增殖系数较高，但组培苗出现严重的徒长、畸形现象，不利于不定芽的生长。