云南省文山州地区猪戊型肝炎血清流行病学调查

左永光，杨廷环，李蛟龙

（1.云南省富宁县洞波乡农业综合服务中心，云南 文山壮族苗族自治州 663404；2.云南省砚山县维摩乡农业综合服务中心，文山壮族苗族自治州 663199；3.云南省丘北县曰者镇农业综合服务中心，文山壮族苗族自治州 663215）

戊型肝炎（Hepatitis E, HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E Virus, HEV）引起的一种急性病毒性肝炎，主要通过粪-口途径传播的重要的人畜共患传染病[1-2]。20世纪70年代该病在印度克什米尔地区首次发现，戊型肝炎在发展中国家呈流行形势，而在发达国家则呈散发性流行[3]。20世纪80年代在我国新疆地区首次暴发戊型肝炎，近年来，在四川[4]、广东[5]、上海[6]、重庆[7]、西藏[8]等地区都有猪戊型肝炎流行情况的报道。有研究发现，猪中的戊型肝炎病毒感染率高达70%以上[9]。

为了解文山州地区猪戊型肝炎病毒的感染情况，以期为此类疫病防控提供参考。笔者采集了文山州8个县市2 548份健康猪的血液样品，采用ELISA方法对猪戊型肝炎病毒的感染情况进行调查，并对不同养殖方式、不同地区、不同类别猪群的猪戊型肝炎病毒感染情况进行比较分析。

1 材料与方法

1.1 血清样品

2021年4—11月期间共采集到文山州8个县市的血清样品2 548份，其中规模养殖场42户978份，散养户279户438份，在云南农业大学动物医学院进行检测。采集分离到的血清放置于EP管内保存备用。

1.2 主要试剂和仪器

猪戊型肝炎病毒ELISA抗体检测试剂盒购自百沃特（天津）生物技术有限公司。全自动酶标仪购自赛默飞世尔（上海）仪器有限公司，恒温水浴锅、37 ℃恒温箱、微量移液枪等。

1.3 猪血清戊型肝炎病毒抗体检测

采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定血清样本中猪戊型肝炎病毒（HEV）。用纯化的戊型肝炎病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中戊型肝炎病毒相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的戊型肝炎病毒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定血清样品中是否存在猪戊型肝炎病毒。

1.4 结果判定

阳性对照孔平均值≥1.00，阴性对照平均值≤0.10方能判定试验有效。临界值=阴性对照孔平均值+0.15，样品OD值<临界值为戊型肝炎抗体阴性；样品OD值≥临界值为戊型肝炎抗体阳性。

2 结果与分析

2.1 不同养殖方式的猪戊型肝炎抗体检测结果

本次试验共检测了2 548份血清样品，共检测出阳性数470份，总阳性率为18.45%。其中规模养殖场的样品数1 376份，阳性数为287份，阳性率为20.86%；散养户的样品份数为1 172份，阳性数为183份，阳性率为15.61%。规模养殖场的阳性率高于散养户（表1）。

表1 文山州地区不同养殖方式猪戊型肝炎的血清抗体检测结果

2.2 不同类别猪群的猪戊型肝炎的感染情况

不同类别猪群的猪戊型肝炎的感染状况存在着一定的差异，其中母猪的阳性率最高为27.61%（209/757），公猪的阳性率最低为11.45%（56/489），仔猪的阳性率为15.75%（205/1 302），见表2。

表2 文山州地区不同类别猪群猪戊型肝炎的血清抗体检测结果

2.3 不同地区的猪戊型肝炎的感染情况

不同地区的猪戊型肝炎的感染情况存在着一定的差异，其中D县血清样品抗体阳性率为25.69%（65/253），E县的血清抗体阳性率最低为12.43%（43/346），见表3。

表3 文山州不同地区猪戊型肝炎的血清抗体检测结果

3 讨论

本次调查对文山州地区的2 548份健康猪的血清样品进行了血清学检测，发现被调查的规模养殖场和散养户的猪戊型肝炎抗体阳性率为18.45%，表明在文山州地区存在着猪戊型肝炎流行的情况。对比云南省不同地区的猪群戊型肝炎调查，2009年李文贵等[10]报道了云南省部分地区的猪戊型肝炎抗体阳性率为64.4%。2012年黄芬等[11]对云南某农村猪戊型肝炎分子流行病学调查中检测阳性率为10.26%。2015年严红亚等[12]对云南省部分猪场猪戊型肝炎检测体抗体阳性率为12.7%。2018年艾志琼等[13]对大理地区屠宰生猪的戊型肝炎病毒的流行病学调查抗体阳性率为23.7%。2020年王源等[14]对昆明市某猪场猪戊型肝炎病毒流行情况调查中阳性率为38.9%。与本次试验中云南省文山州部分地区流行情况相比阳性率存在一定的差异。这说明云南省猪戊型肝炎的流行情况呈一定的流行趋势且存在一定的地域差异。

本次共调查了文山州8个县市的2 548份血清样品。结果发现，在文山州部分地区均有阳性检出，不同地区阳性率存在一定差异的，其中D地区阳性率较高，为25.69%，而E地区阳性率最低，仅为12.43%。抗体阳性率的地区差异可能与不同地区规模养殖场和散养户的饲养环境、日常饲养管理水平、生物安全防护措施等多种因素有关。

此外，本次试验共检测了2 548份血清样品，共检测出阳性数470份。其中规模养殖场的样品数1 376份，阳性数为287份，阳性率为20.86%；散养户的样品数为1 172份，阳性数为183份，阳性率为15.61%。规模化猪场阳性率高于散养户，其原因可能与规模养猪场养殖密度大，猪群接触传播的可能性增加等有关，说明规模养殖场应加强对该病的重点防控；不同类别猪群的猪戊型肝炎的感染状况存在着一定的差异，其中母猪的阳性率最高为27.61%，其次是仔猪的阳性率为15.75%，公猪的阳性率为11.45%，母猪的抗体阳性率较高的原因可能是由于母猪和公猪的饲养周期较长，增加了感染的几率，这说明在平时防控猪戊型肝炎时应重点防治母猪和仔猪。目前，猪戊型肝炎病毒垂直传播还未见报道，但本次调查中仔猪的抗体阳性率较高，很可能是由于仔猪受母源抗体的影响，这与检测到母猪血清中猪戊型肝炎病毒抗体阳性率较高相符。

综上所述，文山州地区猪戊型肝炎病毒抗体阳性率较高，需要加强对猪群密切接触者如兽医、饲养员等的猪戊型肝炎病毒感染情况的研究。本实验室将进一步开展戊型肝炎病毒抗体监测，为更好地防止该病蔓延、跨种间传播提供更多防治依据。