乙肝病毒患者HBV-DNA与血清学指标检验结果分析
2022-04-08李春梅
李春梅
钦州市第二人民医院 广西 钦州 535000
乙肝病毒是引起乙型肝炎的病原体，可造成肝实质炎症性损伤，并进展为肝硬化、肝功能衰竭、肝细胞性肝癌等恶性肝脏疾病，对健康造成影响[1]。血清学指标是乙肝病毒检验常见方式，诊断价值较高，具有操作简单、诊断快速的优点，但无法反映乙肝病毒在体内复制情况[2]。乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）可对血清中HBV-DNA复制情况进行分析，从而区别不同时期的感染及诊断乙肝突变株。本文现针对院内427例患者进行研究，内容如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
自本院收治的乙肝病毒患者中抽取214例作为疾病组，另从院内体检中心进行健康体检的健康人员中抽取213例作为健康组，所有患者均于2021年8月-2021年10月期间在本院就诊。疾病组纳入患者男女比114：100，16岁～90岁，均值（53.26±6.43）岁；健康组纳入患者男女比110:103，17岁～90岁，均值（53.54±6.36）岁。组间无差异，P＞0.05。
1.2 方法
两组患者均进行HBV-DNA及血清学指标检验，详细步骤如下：
HBV-DNA检验：于患者晨起空腹状态下抽取静脉血3～5ml，3000r/min离心五分钟后分离出血清，如果没有及时检测可将血清放置于-20℃环境内保存，保存期6个月，检测时取出200uL血清与450uLDNA提取液混合，用振荡器剧烈震荡混匀15S，瞬时离心数秒。100℃恒温处理10分钟。离心速度为12000r/min，离心时间为5min，取出上清备用。分别取2uL处理后的样品及标准品，加入PCR反应管中进行离心处理，离心速度为8000r/min，离心数秒后取出将其放入仪器样品槽，相关反应参数设置为93℃预变性2min，1个循环；93℃45秒→55℃ 60秒 10个循环，93℃30秒→55℃ 45秒 30个循环循环完成后如果在FAM检测通道扩增曲线无对数增长期或CT值等于30，在VIC检测通道扩增曲线有对数增长期，则判样品的HBV-DNA浓度小于检测灵敏度。如果在FAM检测通道扩增曲线有对数增长期且CT值小于30，则按以下方法判断：若样品的C<100，则该样品的HBV-DNA浓度<100IU/mL:若样品的100≦C≦5.00E+008，则该样品的HBV-DNA浓度=C IU/mL:若样品的C>5.00E+008,则该样品的HBV-DNA浓度>5×108IU/mL。如果需要精确定量结果，可将样品用阴性质控品稀释到线性范围后再检测。则该样品的HBV-DNA浓度=（C×稀释倍数）IU/mL。
血清学指标检验：于患者晨起空腹状态下抽取静脉血3～5ml，3000r/min离心五分钟后分离出血清，如果没有及时检查将血清放置于-20℃环境内保存，保存期为6个月，检测时采用乙型肝炎血清标志物ELISA定性试剂盒进行检测，按照试剂盒说明书进行操作，诊断标准如下：①HBsAg阳性：≧0.2ng/ml，阴性：＜0.2ng/ml；②抗-HBs浓度阳性：≧10mIU/ml，阴性：＜10mIU/ml；③E抗原阳性：≧0.5PEIU/ml，阴性：＜0.5PEIU/ml；④核心抗体阳性：≧0.45IU/ml，阴性：＜0.45IU/ml；⑤e抗体阳性：≧0.2PEIU/ml，阴性：＜0.2PEIU/ml。
1.3 观察指标
比较组间HBV-DNA及血清学指标检验结果。
1.4 统计学处理
2 结果
疾病组相较于健康组HBV-DNA、HBsAg、抗-BHs浓度、e抗原、核心抗体、抗-HBe水平较高，P＜0.05，见表1。
表1 组间HBV-DNA及血清学指标检验结果比较
3 讨论
乙肝病毒可通过血液、母婴、密切接触等途径进行传播，感染后可对患者肝脏造成损伤，从而诱发乙型肝炎，对患者机体健康造成影响，因此临床需及时采取有效检验方式进行疾病诊断，便于临床治疗[3]。
血清标志物检验是临床常见的乙肝病毒检验方式，可准确分辨出是否携带乙肝病毒，在临床筛查中具有重要意义，但无法反映乙肝病毒在体内的复制情况。HBV-DNA是乙肝病毒感染最直接、特异性强及灵敏性高的指标，可直接、准确地反映乙肝病毒复制情况[4]。本文经过研究发现，疾病组相较于健康组HBV-DNA及血清标志物水平较高，P＜0.05。表明通过HBV-DNA与血清标志物检验可进行乙肝病毒患者鉴别。当机体内感染乙肝病毒后，可对免疫功能造成影响，出现免疫功能低下的情况下，乙肝病毒可在体内不断复制，同时血液中HBeAg水平升高，出现免疫功能较高的情况时，乙肝病毒停止复制，血液中HBeAg水平降低，但e抗体升高，因此联合应用HBV-DNA与血清标志物检验，可使疾病诊断准确率提高。
综上所述，在乙肝病毒检验中，可采用HBV-DNA联合血清标志物的方式进行检验，获得较为准确的检验结果，及时进行疾病诊断及治疗。
