产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌的分离、分布情况及耐药特点研究

全红

【摘要】 目的：探讨产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肠杆菌科细菌的分离、分布情况及耐药特点。方法：选取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心医院感染科送检的各类标本129份，对标本中的细菌进行分离、培养、鉴定，并进行药敏性试验。对产ESBLs肠杆菌的检出率、分布情况进行统计比较，并对药敏結果特点进行综合评估。结果：129份感染标本中，共检出各类菌株145株，其中产ESBLs肠杆菌92株，检出率63.45%，其中产ESBLs大肠埃希菌57株，产ESBLs肺炎克雷伯菌35株。分布情况：产ESBLs大肠埃希菌以引流液为主，科室分布以外科为主;产ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液为主，科室以内科为主。耐药性：产ESBLs大肠埃希菌和产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、氨曲南、万古霉素等耐药率低，对头孢菌素、青霉素类抗生素高度耐药。结论：在临床感染疾病中产ESBLs肠杆菌有较高的发病率，其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主，菌株标本来源及科室分布呈现规律性。对青霉素、头孢菌素等多数抗菌药高度耐药，对碳青霉烯类抗生素敏感，临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物进行治疗。

【关键词】 超广谱β-内酰胺酶 肠杆菌科细菌 分布情况 耐药特点

Analysis of Isolation， Distribution and Characteristics of Drug Resistance of Producing Extended Spectrum β-lactamase Enterobacter/QUAN Hong. //Medical Innovation of China， 2022， 19（05）： -172

[Abstract] Objective： To study the isolation， distribution and drug resistance characteristics of producing extended spectrum β-lactamase （ESBLs） Enterobacter. Method： A total of 129 specimens of various types submitted for inspection by the Department of Infectious Diseases of our hospital from January 2019 to January 2020 were selected to isolate， culture， and identify bacteria in the specimens， and conduct drug susceptibility tests. The detection rate and distribution of producing ESBLs Enterobacter were statistically compared， and the characteristics of drug susceptibility results were comprehensively evaluated. Result： A total of 145 strains of various strains were detected in 129 infected specimens， of which 92 strains of ESBLs-producing Enterobacter， with a detection rate of 63.45%， of which 57 strains of producing ESBLs Escherichia coli and 35 strains of producing ESBLs Klebsiella pneumoniae. Distribution： producing ESBLs Escherichia coli was dominated by drainage fluid， the distribution of departments was dominated by surgery， producing ESBLs Klebsiella pneumoniae was dominated by sputum， and departments were dominated by internal medicine. Resistance： producing ESBLs Escherichia coli and producing ESBLs Klebsiella pneumoniae had low resistance rates to Meropenem， Imipenem， Amikacin， Aztreonam， Vancomycin， etc.， and high resistant to Cephalosporins and Penicillin antibiotics. Conclusion： Producing ESBLs Enterobacter has a high incidence rate in clinical infectious diseases， among which Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae are the main ones， the source of strains and the distribution of the departments show regularity. It is highly resistant to most antibacterial drugs such as Penicillin and Cephalosporin， and is sensitive to carbapenem antibiotics， the clinical application of antibacterial drugs should be based on the results of drug sensitivity.

[Key words] Extended spectrum β-lactamase Enterobacteriaceae Distribution Characteristics of drug resistance

First-author’s address： Jiamusi Center Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.05.042

近些年随着抗菌药物的不断增多，以及致病微生物的物种不断复杂化，加之抗生素的滥用情况加剧，使得耐药菌株的种类和数量也在不断增多[1]。其中超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）肠杆菌引起的耐药现象最为严重。ESBLs是以灭活窄谱和广谱头孢菌素、单环类抗生素及抗革兰阴性杆菌青霉素等抗生素为特征的β-内酰胺酶，可通过与各种抗生素结合靶位的改变，使抗生素作用下降[2-3]。近些年产ESBLs细菌的耐药性也在不断发生变化，从单纯的院内感染发展到社区获得性感染，从以往的单纯耐药发展为多重耐药，其中以产ESBLs肠杆菌的耐药情况最为严重[4]。产ESBLs肠杆菌的出现不利于患者感染性疾病的抗感染治疗，若在治疗期间错误的选择抗菌药物将可能进一步恶化患者肠杆菌的耐药情况[5-6]。因此，为了更好地控制产ESBLs肠杆菌在院内、院外的传播和流行，以及在治疗过程中合理选取敏感的抗菌药物进行针对性的治疗，有着重要的临床实践意义[7]。为此，对佳木斯市中心医院近期感染可送检的各类标本进行产ESBLs肠杆菌的分离和检出，并深入分析产ESBLs肠杆菌的耐药情况，以期为临床选用合理的抗生素治疗方案提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心医院感染科送检的各类标本129份。（1）纳入标准：①标本均来自本院住院患者;②采集標本的患者均有发热、渗出等感染症状;③每例患者均采集一份相应的标本进行检测;④入组前未采取相应的治疗措施干预;⑤精神状态良好，能配合本研究。（2）排除标准：①已经明确感染的致病菌种类的患者;②基础资料、临床检测资料不完整;③其他未完成调查研究的各种情况。本研究已经医院伦理学委员会批准，患者及家属均知情同意并签署知情同意书。129例患者中，男65例，女64例;年龄34～76岁，平均（56.34±9.88）岁;体质指数（body mass index，BMI）18～26 kg/m，平均（22.81±2.76） kg/m;标本类型：血液23份，尿液32份，痰液31份，引流液27份，伤口分泌物16份;标本来源科室：内科34份，外科43份，妇产科9份，ICU 19份，肿瘤科18份，其他科室6份。

1.2 方法 病原菌培养按照《全国临床检验操作规程》的相关要求进行，所取标本置于灭菌容器中，立即送检进行细菌学培养实验。将标本接种于血琼脂培养基上，置于LHS-150型恒温培养箱（上海坤天科学仪器厂）中进行分离培养24～48 h。菌株分类后采用HX-21A型多功能细菌鉴定仪（上海铭远实业有限公司）进行鉴定，所采用的质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603。并进一步对产ESBLs进行鉴定，鉴定方法为在分离后的菌株中加入克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈相差≥5 mm时即可判断为产ESBLs阳性菌株。最后根据菌株分离鉴定结果，统计产ESBLs肠杆菌检出率，以及对应标本的类型、科室来源等进行统计。

采用梅里埃VITEK 2 Compact型全自动细菌鉴定及药敏分析系统（北京兰伯瑞生物技术有限公司）进行药敏实验，选用本院常用的抗菌药物青霉素钠、头孢哌酮、氨苄西林、头孢呋辛、哌拉西林、头孢唑林、阿米卡星、庆大霉素、万古霉素、美罗培南、呋喃妥因、氨曲南、亚胺培南、伏立康唑、两性霉素B、氟康唑等进药敏试验，检查方法为纸片琼脂扩散法。

1.3 统计学处理 采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，计数资料以率（%）表示。

2 结果

2.1 产ESBLs肠杆菌检出情况 129份感染标本中，共检出各类菌株145株，其中产ESBLs肠杆菌92株，检出率63.45%，其中产ESBLs大肠埃希菌57株，产ESBLs肺炎克雷伯菌35株，见表1。

2.2 产ESBLs肠杆菌标本类型分布情况 产ESBLs大肠埃希菌标本以引流液为主，产ESBLs肺炎克雷伯菌标本以痰液为主，见表2。

2.3 产ESBLs肠杆菌标本科室来源分布情况 产ESBLs大肠埃希菌科室分布以外科为主，依次为外科、内科、ICU、肿瘤科、妇产科、其他科室;产ESBLs肺炎克雷伯菌科室以内科为主，依次为内科、外科、ICU、肿瘤科、妇产科、其他科室。见表3。

2.4 产ESBLs肠杆菌耐药特点 产ESBLs大肠埃希菌和产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、氨曲南、万古霉素等耐药率低，对头孢菌素、青霉素类抗生素高度耐，见表4。

3 讨论

产ESBLs肠杆菌耐药问题是抗感染治疗中最为严重的一类细菌耐药问题，是由普通的β内酰胺酶基因突变而来，耐药性较常规的β内酰胺酶更为严重，突出表现为耐药的抗生素种类数量较多以及多重耐药现象严重，其耐药的机制主要是通过ESBLs使得抗菌药物与致病菌结合靶位的改变，进而使得抗菌药物杀菌和抑菌作用大大下降，另外ESBLs还可使得抗菌药物不能有效穿透细菌的细胞壁，阻断其与细菌的结合过程[8-10]。近些年随着抗生素药物的滥用加剧以及细菌等致病微生物谱系的变化，产ESBLs肠杆菌的耐药情况愈加严重，已成为感染科治疗研究的重点方向[11-12]。因此，对于产ESBLs肠杆菌的分离、鉴定、分布及耐药性特点的研究，有助于掌握产ESBLs肠杆菌的感染规律，为临床产ESBLs肠杆菌感染的抗菌治疗提供参考[13]。

在本研究中通過129份各类感染标本进行菌株培养和分离鉴定，共检出各类菌株145株，其中产ESBLs肠杆菌92株，检出率63.45%，其中产ESBLs大肠埃希菌57株，产ESBLs肺炎克雷伯菌35株。表明产ESBLs肠杆菌有较高的发病率，与既往临床报道的结果基本一致[14-15]，需引起临床感染科医师的高度重视。在产ESBLs肠杆菌标本类型分布中，产ESBLs大肠埃希菌以引流液为主，产ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液为主。在产ESBLs肠杆菌标本科室来源分布中，产ESBLs大肠埃希菌以科室分布以外科为主，产ESBLs肺炎克雷伯菌科室以内科为主[16-17]，这与本院临床治疗情况基本吻合，这是因为大肠埃希菌主要以肠道感染和肠道外的外伤术口感染为主，而本院外科收治的大部分是住院接受手术治疗的患者，术后均进行术后引流，而这类手术患者通常在围术期使用了预防性或治疗性的抗菌药物，加重了患者出现耐药的可能性，因此在引流液中检出较多的产ESBLs肠杆菌[18-19]。肺炎克雷伯菌是呼吸道和肠道中的常见菌，机体抵抗力降低时，便经呼吸道进入肺内而引起大叶或小叶融合性实变，因此较多的在痰液中检出，多以接受药物治疗内科呼吸系统疾病患者为主[20-21]。在药敏性结果中，产ESBLs大肠埃希菌和产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、氨曲南、万古霉素等耐药率低，对头孢菌素、青霉素类抗生素高度耐药，与既往临床报道的耐药特点基本吻合[22-23]，表明对于产ESBLs肠杆菌的治疗首选碳青霉烯类抗菌药物。产ESBLs肠杆菌对青霉素和头孢菌素类的高度耐药，充分体现了这类细菌有较强的产ESBLs能力，这些产酶的菌株可以在同种或异种菌间通过质粒发生传递，从而使耐药菌株广泛传播与流行，增强了对青霉素、头孢菌素等抗菌药物活性的抑制，呈现高度广谱的多药耐药机制。因此，根据产ESBLs肠杆菌耐药特点的分析，对于此类患者的抗菌治疗可经验性选用碳青霉烯类抗生素进行治疗，同时还应继续加强对患者病原菌分布和抗生素耐药性的监测，以防耐药菌株的出现，并及时调整抗菌药物的治疗方案[24-25]。

综上所述，在临床感染疾病中产ESBLs肠杆菌有较高的发病率，其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主，菌株标本来源及科室分布呈现规律性。对青霉素、头孢菌素等多数抗菌药高度耐药，对碳青霉烯类抗生素敏感，临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物进行治疗。

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（收稿日期：2021-06-04） （本文编辑：程旭然）