佳木斯地区女性人乳头瘤病毒感染基因情况分析①

王庄舒,宋继荣,王 勇,王汉卿,孙玉鸿

(佳木斯大学，黑龙江 佳木斯154007)

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，是全球妇女中第3大常见恶性肿瘤。2012年全球约有527600例宫颈癌患者，其中26570例死亡，每年新增的宫颈癌病例约1/3分布在中国，约150000例，其中有20000左右女性最终死于该疾病[1]。作为世界上人口最多的发展中国家，中国仍然面临着严重的子宫颈癌疾病负担，特别是在全国70%以上人口居住的医疗资源有限的农村地区。流行病学调查显示,不健康的性行为、早婚早育、多产早产、口服避孕药、人乳头瘤病毒(humanpapllmavirus,HPV)感染和吸烟等都有可能增加女性患宫颈癌的风险[1]。人乳头瘤病毒感染是宫颈癌的主要致病因素，高危型HPV(HR-HPV)检测对宫颈癌的诊断具有较高的敏感性，尽管目前人类乳头瘤病毒(HPV)疫苗针对HPV16和18型，它们仍然无法防止已确定的感染或其他HPV类型[2]。HPV感染的生命周期包括两个阶段:第一阶段是病毒建立感染的游离阶段，HPV感染基底细胞，L1和L2包住病毒基因组并在细胞核内形成子代病毒，之后子代病毒释放，重新引发新的感染。因此，病毒的游离阶段是指L1衣壳蛋白表达的早期阶段。第二阶段是病毒的整合阶段[3]，HPV DNA整合到宿主DNA中，HPV E6和E7癌蛋白作用于宿主调节蛋白从而导致许多蛋白的表达发生改变，其结果是p53抑癌基因和Rb通路的降解，从而抑制细胞的分化、凋亡和免疫应答，导致高级别鳞状上皮内病变的发生，遗传和表观遗传的改变进一步使病变发展为侵袭性肿瘤。

不同地区人群HPV感染类型并不十分相同，因此需要针对本地区人群HPV感染类型，总结常见的感染亚型，并统计复查人群中常见的HPV感染类型，为本地区女性宫颈癌的防治工作提供指导依据，为疫苗接种类型的选择提供查参考意见。

1 材料与方法

1.1 材料

收集2019～2021年在佳木斯大学附属第一医院就诊及健康体检患者宫颈标本，PCR法检测HPV基因分型8895例。

1.2 试剂与仪器

HPV基因分型检测试剂盒(杭州艾康生物科技公司)、基因扩增仪(杭州博日科技有限公司)、核酸分子杂交仪(亚能生物技术有限公司)、一次性宫颈脱落细胞采集器(宫颈刷)。

1.3 方法

样本采集：暴露宫颈，擦拭分泌物，将宫颈刷伸入宫颈口，顺时针或逆时针旋转3～5圈，将采集的脱落细胞放入细胞保存瓶里，立即密闭送检。加样，杂交，洗膜，显色，根据检测位点信号观察结果。

1.4 统计学方法

采用SPSS 26.0软件分析数据，计量资料采用ANOVA单因素分析，计数资料用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 在8895例患者中，HPV感染阳性患者2732例，阳性率为30.71%。HPV单一感染类型前3种是16型(8.97 %)、52型(8.24%)和53型(5.34%)。不同年龄组之间6型、16型、18型、59型感染率有差异，(P值分别为0.00、0.00、0.04、0.02)，见表1。

表1 HPV亚型分析

2.2 不同年龄组之间比较：不同年龄层患者在HPV阳性率，感染形式即单一型和多重型感染率上差异明显，有统计学意义(P值均为0.00)，见表2。

表2 不同年龄层HPV感染形式

2.3 按照低危、疑似高危、高危感染分组， 不同组的年龄差异具有统计学意义(P=0.01)；按照单一、多重感染分组，不同组的年龄差异也具有统计学意义(P=0.00),见表3。

表3 HPV感染患者的年龄分析

3 讨论

高危型HPV持续性感染是引起宫颈癌和宫颈上皮内病变的主要因素，但并非感染HPV就一定会引起癌变[4]。HPV病毒主要是通过性传播，在感染以后大部分病毒会被自身免疫清除，只有当持续的高危型HPV感染，自身免疫低下，其中的一部分会发展为宫颈癌。

3.1 不同地区HPV感染亚型存在差异

HPV亚型在不同国家、不同地区感染趋势不同，西方以16型和18型最为常见[5]。杭州地区[6]、云南地区[7]感染亚型前三种依次为52型、16型、58型，蚌埠[8]的前三种依次为16型、52型、58型，石家庄市[9]、徐州地区[10]HPV感染前三种亚型是16型、52型、53型。本研究显示，本地区HPV感染亚型前3位是16型、52型、53型。

3.2 HPV初次筛查和复查患者感染亚型存在差异

在7937名初次筛查的患者中，HPV阳性率为29.41%，25种亚型中，首诊患者感染亚型最多的是16型、52型、53型。低危型5.12%，高危型12.93%。这和低危型感染以后自身免疫机制启动，及时清除病毒感染有关。高危型HPV感染，病毒感染其包膜蛋白，靶向pRB基因并使其降解，导致CDK、E2F基因的上调，细胞增殖调控异常活跃，细胞周期失衡一系列变化[11]。在958名复查的患者中，阳性率为41.54%，与初次筛查的29.41%相比，阳性率升高明显。可能与患者感染以后，自身免疫机制减弱有关，HPV感染亚型最多的是52型、16型、58型。复查的患者在按时服药之外，要注意加强运动，安排合理的饮食，放松心态，不必要过度惊慌和害怕。40岁以上感染率呈升高趋势，随着生育、性生活、自身免疫机制下降带来的影响，导致感染率增加。

宫颈癌作为全球的公共卫生问题，可以通过HPV疫苗接种、宫颈癌筛查和相应的治疗得到减缓消除，2018年5月世界卫生组织呼吁全球采取行动实现这一目标。2006年以来，预防性HPV疫苗已经在100多个国家中得到许可，目前有3种疫苗类型：2价、4价、9价。2价HPV疫苗包括16型和18型人乳头瘤病毒颗粒，这两种亚型导致了约70%宫颈相关的恶性肿瘤。4价疫苗包括16型、18型、6型和11型人乳头瘤病毒颗粒，6型和11型和90%的生殖器疣感染有关[12]。9价疫苗针对6/11/16/18/31/33/45/52/58型，和90%宫颈癌相关。疫苗接种可以减少男性和女性生殖道疾病的发病率已经得到证实，包括由HPV感染引起的口腔、宫颈、阴道、外阴、阴茎和肛门的上皮内瘤变。中国食品药品监督管理局在2016年7月批准了2价乳头瘤病毒疫苗，这是中国当局的一个开创性决定。

综上所述，目前宫颈癌的防治工作仍是以不断优化并调整宫颈癌筛查方案，预防性接种HPV疫苗为主[13]，因此HPV亚型感染的分布特征可以被充分利用，对本地区而言，40岁以上女性注意筛查，生育期年龄女性也要引起重视，按时体检，并积极接种疫苗。在感染HPV以后，也要积极配合治疗，保持平和的心态，避免过度紧张和焦虑。