血清整合素β1、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白在子宫内膜异位症中的临床价值

傅 萍

复旦大学附属妇产科医院妇产科，上海 200090

子宫内膜异位症(EMT)是妇科的常见疾病，现发病机制仍不清楚，其中主要的学说为经血逆流学说，认为子宫的内膜细胞随着经血倒流到盆腔，并在盆腔种植、生长和蔓延，形成异位内膜[1-2]。EMT形成过程中涉及内膜与细胞基质之间，细胞与细胞之间的相互关系，其中细胞外基质在EMT形成过程中具有重要作用，其主要成分为糖蛋白、胶原和蛋白聚糖。纤维粘连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)是细胞外基质中的糖蛋白成分，能够与相应受体结合，与细胞分化、黏附和迁移具有密切联系[3]，虽然EMT是良性疾病，但也有类似恶性肿瘤的生物学特性。整合素β1(ITGb1)是黏合素超家族成员，介导细胞与细胞外基质的黏附及白细胞与内皮细胞的黏附，在EMT的发生发展过程中具有重要作用[4]。本研究通过联合检测EMT患者血清ITGb1、FN和LN水平，观察其在EMT发生发展中的作用。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年1月至2020年12月在本院就诊的EMT患者96例为EMT组。年龄22～45岁，平均(35.46±7.67)岁；体质量指数(BMI)为(22.81±2.83)kg/m2；美国生殖医学协会子宫内膜异位症(r-AFS)分期：Ⅰ期24例，Ⅱ期27例，Ⅲ期31 例，Ⅳ期14例。根据痛经评分标准将患者分为轻度(<8分，31例)、中度(8～13.5分，36例)和重度(>13.5分，29例)；病理结果：结节内具有新鲜血液为活动型(66例)，无新鲜血液为非活动型(30例)。纳入标准：所有患者均经手术确诊为EMT；自愿参与，依从性良好。排除标准：子宫腺肌病；血液系统和免疫系统疾病；内分泌系统疾病；6个月内接受过激素药物治疗；妊娠期和哺乳期女性。选择同期体检健康者52例为对照组，年龄23～45岁，平均(35.78±8.67)岁，BMI为(22.72±1.96)kg/m2。两组年龄、BMI等基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有研究对象均签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会审核通过。

1.2方法

1.2.1痛经评分标准 经前小腹疼痛基础分为5分，腹痛明显为0.5分，腹痛难忍为1分，疼痛坐立不安为1分，出现休克为2分，面色苍白为0.5分，四肢发冷1分，冷汗淋漓1分，疼痛需要卧床休息1分，影响工作和学习1分，一般止痛措施不能缓解为1分，用一般止痛措施能缓解为0.5分，伴随腰部酸痛、肛门坠胀和恶心呕吐分别赋值0.5分；疼痛1 d以内为0.5分，每增加1 d加5分。

1.2.2血清标本留取及检测 患者入院后抽取肘静脉血约5 mL，在室温下静置约20 min，然后以3 000 r/min离心10 min，离心半径为15 cm，去上清液约3 mL，放置于-80 ℃的冰箱中待测。采用酶联免疫吸附试验检测血清ITGb1、FN和LN水平，所有试剂盒采用R&D公司产品，严格按照试剂盒说明书操作。

1.2.3观察指标 (1)比较两组血清ITGb1、FN和LN水平；(2)血清ITGb1、FN和LN对EMT的诊断效能；(3)血清ITGb1、FN和LN水平与痛经严重程度、EMT分期和分型的关系。

2 结 果

2.1两组血清ITGb1、FN和LN水平比较 EMT组血清ITGb1、FN和LN水平明显高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清ITGb1、FN和LN水平比较

2.2血清ITGb1、FN和LN对EMT的诊断效能 血清ITGb1、FN和LN对EMT均具有较好的诊断效能，3项联合检测的灵敏度为97.9%，特异度为86.5%，曲线下面积(AUC)为0.973，高于ITGb1(Z=3.847，P<0.05)、FN(Z=5.196，P<0.05)和LN(Z=4.268，P<0.05)单项检测。见表2、图1。

表2 血清ITGb1、FN和LN对EMT的诊断效能

图1 血清TGb1、FN和LN诊断EMT的ROC曲线

2.3血清ITGb1、FN和LN水平与EMT分期的关系 EMT患者血清ITGb1、FN和LN水平随着r-AFS分期的升高而升高(P<0.05)。见表3。

表3 血清ITGb1、FN和LN水平与EMT分期的关系

2.4血清ITGb1、FN和LN水平与痛经严重程度的关系 血清ITGb1、FN和LN水平随着痛经严重程度的升高而出现明显升高(P<0.05)。见表4。

表4 血清ITGb1、FN和LN水平与痛经严重程度的关系

2.5血清ITGb1、FN和LN水平与EMT分型的关系 EMT活动型患者血清ITGb1、FN和LN水平高于非活动型患者(P<0.05)。见表5。

表5 血清ITGb1、FN和LN水平与EMT分型的关系

3 讨 论

整合素是一种黏附分子受体，广泛分布于细胞表面，具有多种生物学功能，主要参与细胞与细胞，细胞和细胞外基质(FN、LN和胶原蛋白等)之间的信号传递和黏附，与炎性反应和血管生成具有重要联系，对细胞增殖、迁移和分化等具有重要作用[5]。现有研究表明，整合素在EMT形成过程中具有重要的作用，而整合素表达失调可能是导致EMT形成的重要原因[6]。本研究发现EMT患者血清ITGb1水平明显高于对照组，且血清ITGb1水平随着EMT分期和痛经评分升高而出现明显升高，活动型EMT患者血清ITGb1水平明显高于非活动型患者，说明ITGb1在EMT发生发展过程中具有重要作用，能够反映EMT疾病和疼痛的严重程度，血清ITGb1水平越高，提示EMT越可能为活动型。关于ITGb1的研究主要集中于癌症，血清ITGb1水平与子宫内膜癌的发生发展具有密切联系，并且血清ITGb1水平与子宫内膜癌的恶性程度、转移和预后具有密切的联系[7]，在一项有关宫颈癌的研究中发现，沉默ITGb1基因的表达能够明显抑制癌症细胞的增殖和迁移[8]。EMT具有类似肿瘤的特性，如侵袭和种植，但很少会发生恶变，本研究进一步证实血清ITGb1水平能够反映EMT的生物学特性和疾病的严重程度，与既往文献报道一致[9]。本研究结果显示，血清ITGb1>3.62 μg/mL时，其诊断EMT的灵敏度为74.0%，特异度为88.5%，AUC为0.877，说明血清ITGb1水平对EMT具有较好的诊断效能。

本研究结果显示，EMT患者血清FN水平明显高于对照组，并且随着EMT分期和痛经评分的升高而升高，活动型EMT患者明显高于非活动型患者，说明FN参与了EMT的发生发展，是反映EMT严重程度的指标，FN可能参与了EMT的粘连形成过程，并且影响子宫内膜的植入和生长。FN是细胞外基质的重要细胞黏附分子，不仅在维持组织形态方面具有重要作用，而且在调控黏附、生长、分化和促进细胞的增殖和迁移方面具有重要作用，在阻断FN表达后，胶原纤维形成受阻[10]。FN是细胞外基质的主要成分，在细胞生长中具有重要作用，在恶性肿瘤晚期阶段，FN表达水平出现明显升高，有利于肿瘤细胞侵袭周围组织，导致肿瘤进一步发展，FN被认为可作为肿瘤早期转移的指标[11-13]。FN引起EMT发生增殖和侵袭的机制可能为：FN与特异性受体整合素结合后，对细胞的黏附起到定向移动作用，促进内膜细胞向降解后的基质区发生浸润，有利于内膜细胞的侵袭和增殖[14]。本研究发现血清FN水平>128.64 μg/mL时，其诊断EMT的灵敏度为62.5%，特异度为86.5%，AUC为0.813，说明血清FN对EMT具有较好的诊断效能。

本研究结果显示，EMT患者血清LN水平明显高于对照组，并且随着EMT分期和痛经评分升高而升高，并且发现活动型EMT患者血清LN水平明显高于非活动型，说明LN与EMT的发生发展具有密切联系，血清LN水平与EMT严重程度相关。现已知LN是一种存在于基底膜的大分子非胶原性糖蛋白，与整合素结合后可发挥多种生理功能[15]。LN最早是作为恶性肿瘤预后评估的重要指标，在一项研究中发现肿瘤患者LN水平明显高于健康对照组，LN水平随着肿瘤浸润程度的升高而升高，并且发现其水平与恶性肿瘤的预后具有明显相关性，LN水平越高，其生存期越短[16-18]。在一项对子宫腺肌病患者的研究中发现，LN水平与子宫腺肌病的病灶增大有密切相关性，其会影响子宫腺肌病的发展[19]。有研究显示，EMT患者无论腹腔液还是血液中的LN水平均高于对照组，并且随着疾病严重程度的升高而升高[20]。本研究发现血清LN>93.90 ng/mL时，其诊断EMT的灵敏度为89.6%，特异度为69.2%，AUC为0.858，说明LN对EMT具有较好的诊断效能。

本研究结果显示，血清ITGb1、FN和LN联合诊断EMT的灵敏度高达97.9%，特异度为86.5%，AUC为0.973，明显高于各项单独检测，说明3项指标具有某种内在联系和互补性。现已知FN和LN是细胞外基质的主要成分，广泛分布于基底膜透明层，与胶原蛋白结合形成基底膜的骨架，在基底膜的形成过程中具有重要作用，与ITGb1结合后，对基质进行破坏，导致EMT的发生发展[21]。故ITGb1、FN和LN在EMT发生过程中具有不同的作用，联合检测有助于提高其对EMT的诊断效能。

综上所述，血清ITGb1、FN和LN水平能够反映EMT的严重程度，3项联合检测对EMT具有较好的诊断效能。