类风湿关节炎患者血清及关节液ANGPTL4和IL-17及RANKL的表达及意义

张南廷，高琴，吴记平

（1.东莞市人民医院检验科，广东 东莞 523000；2.东莞市人民医院肾内科，广东 东莞 523000；3.东莞市人民医院风湿免疫科，广东 东莞 523000）

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种病因不明的自身免疫性疾病，以滑膜炎为病理基础，以侵蚀性关节炎为典型表现，患者早期主要表现为晨僵、关节疼痛及肿胀等，但随着疾病的进展，部分患者可发展为关节畸形，影响患者正常功能[1]。血管生成素样蛋白（angiopoietin1ikeprotein，ANGPTL）是一种新型蛋白因子，虽与血管生成素有相似的结构域，表现出一定程度的同源性，但由于ANGPTL不与酪氨酸受体结合，在功能方面具有多样性，可调节糖、脂代谢，抑制血管发生。近年来，部分研究学者发现，ANGPTL-4 参与系统性硬化病的病程进展，且与RA 炎症因子具有相关性[2]。刘秀婵等[3]研究发现，RA 患者血清及滑液ANGPTL-4 水平呈高表达状态。核因子κB 受体活化因子配体（receptoractivatorof NF-κB ligand，RANKL）对破骨细胞分化成熟至关重要，而RA致病过程中，滑膜炎症会破坏关节骨质，参与破骨细胞的激活与分化[4]。白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）是由活化的T细胞产生的炎性细胞因子，可参与炎症反应[5]。基于此，本研究旨在探究RA患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL表达情况及意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取 2019 年 11 月至 2020 年 11 月本院收治的50例类风湿性关节炎患者作为研究组，另选取同期收治的50 例骨伤患者作为对照组。研究组男 17 例，女 33 例；年龄 30～65 岁，平均（50.24±5.69）岁；体重指数 18.00～24.00 kg/m2，平均（21.04±2.27）kg/m2。对照组男22例，女28例；年龄25～60 岁，平均（49.58±5.49）岁；体重指数18.50～24.50 kg/m2，平均（21.43±2.31）kg/m2。 两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。

纳入标准：所有患者均符合2010 年ACR/EULAR[6]中RA 的诊断标准；入院前未接受其他治疗；精神、意识正常，治疗依从性高，配合完成研究者。排除标准：合并严重心、肺、肝、肾功能不全者；合并系统性红斑狼疮、反应性关节炎、系统性硬化病、原发性干燥综合征等其他风湿类疾病者；有严重抑郁、狂躁、焦虑等精神或心理问题，不能配合完成临床诊疗工作者。

1.2 方法 于清晨取患者空腹静脉血5～8 ml，以3 000 r/min离心5 min，取上层清液用酶联免疫吸附法测定血清ANGPTL4、IL-17、RANKL水平，同时测定RA患者关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平。

1.3 观察指标 比较两组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平；采用RA 病情活动度表（DAS28-3）评估RA患者病情活动度，低活动度：2.6＜DAS28≤3.2；中度活动度：3.2＜DAS28≤5.1；重度活动度：DAS28＞5.1。依据DAS28 评估低、中、重度活动度，将 RA 患者依次分为 L 组、M 组、H 组，并比较 3 组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平。并用 Spearman 分析血清 ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平与血清抗环瓜氨酸多肽抗体（抗CCP）、类风湿性因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）及DAS28-3相关性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料以“”表示，组间比较采用t检验，计数资料以[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，用Spearman 进行相关性分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比较 研究组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平均高于对照组，且研究组关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平高于血清水平，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比较（）

表1 两组血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比较（）

注：ANGPTL4，血管生成素样蛋白4；IL-17，白细胞介素-17；RANKL，核因子κB受体活化因子配体。与血清比较，aP＜0.05

组别研究组（n=50）对照组（n=50）t值P值关节液0.27±0.04a 0.08±0.01a 34.381＜0.05 ANGPTL4（μg/L）血清5.24±1.04 2.87±0.36 16.020＜0.05关节液7.69±1.11a 2.87±0.36a 30.749＜0.05 IL-17（pg/ml）血清89.69±12.26 16.89±3.15 42.601＜0.05关节液124.51±18.54a 16.89±3.15a 42.776＜0.05 RANKL（μg/L）血清0.12±0.02 0.08±0.01 13.233＜0.05

2.2 不同疾病活动度RA 患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平比较 随着病情活动度逐渐加重，RA患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平依次呈上升趋势，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同疾病活动度RA患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比较（）

表2 不同疾病活动度RA患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比较（）

注：ANGPTL4，血管生成素样蛋白4；IL-17，白细胞介素-17；RANKL，核因子κB受体活化因子配体

疾病活动度L组（n=16）M组（n=14）H组（n=20）F值P值关节液0.21±0.03 0.26±0.05 0.33±0.06 26.869＜0.05 ANGPTL4（μg/L）血清4.26±0.81 5.14±1.00 6.09±1.20 14.023＜0.05关节液6.69±1.01 7.58±1.08 8.57±1.15 13.382＜0.05 IL-17（pg/ml）血清78.14±11.48 88.58±11.98 99.71±12.84 14.015＜0.05关节液102.69±17.84 124.89±18.03 141.70±19.57 19.534＜0.05 RANKL（μg/L）血清0.09±0.01 0.12±0.02 0.15±0.03 31.707＜0.05

2.3 血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平与 RA 各项疾病各项指标相关性 血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平与 RA 患者 ESR、抗 CCP、DAS28-3、CRP、关节压痛数成显著正相关，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 血清和关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平与RA各项疾病各项指标相关性

3 讨论

RA是以手、足小关节呈对称性，且多关节病变为主要特征的自身免疫性疾病，常累及关节外器官，易引起关节畸形，甚至导致功能丧失，严重影响患者的正常工作及生活。RA关节炎主要病理变化为大量炎性细胞浸润间质，微血管新生、血管翳形成，软骨、骨组织破坏等[7-8]。RANKL参与破骨细胞的激活、分化、存活等过程，对破骨细胞的增殖、活化具有重要意义，早期国外研究发现，通过去除小鼠RANKL 基因的血清转移模型诱发关节炎，炎症仍继续发展，但经CT和病理学检测判定，基因组小鼠骨质损伤明显轻于对照组，可见，RANKL 在RA关节破坏和骨侵蚀中起重要作用[9]。刘洪江等[10]研究发现，关节滑膜细胞和活化T细胞产生的RANKL是促使破骨细胞分化，导致骨侵蚀的关键原因。ANGPTL4分布较为广泛，但主要在白色脂肪组织、肝脏中表达，对调节脂代谢有重要作用，聂华翎等[11]研究发现，RA 患者血清ANGPTL4 水平高于健康人，提示ANGPTL4 可能参与RA 致病过程。IL-17可诱导并驱化炎症因子，进而招募大量免疫细胞到达关节炎症部位，加剧机体炎症反应。

本研究结果显示，RA患者血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平显著高于骨伤患者，且随着RA 患者病情活动度加剧，血清及关节液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平依次呈上升趋势；血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平与RA 患者ESR、抗CCP、DAS28-3、CRP、关节压痛数成显著正相关，差异有统计学意义（P＜0.05），王玉梅等[12]研究结果一致。

综上所述，RA 患者血清及关节液水平显著升高，参与RA 致病机制，与疾病活动度密切相关，可为临床防治RA提供重要依据。