2021年江苏省某妇幼保健医院细菌分布及耐药性分析

赵伟 蒋翠莲 冯晓丹

摘要：目的：了解2021年江苏省某妇幼保健院临床分离菌株对抗菌药物的耐药性及敏感性，以指导临床合理用药。方法：收集2021年1月1日-12月31日该院临床分离的3352株非重复细菌，采用纸片扩散法，自动化仪器法进行药敏试验，药敏结果按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）标准判读，采用WHONET5.6软件对该院分离菌株进行统计分析。结果：3352株非重复菌株中，革兰阳性菌占46.8%，革兰阴性菌占53.2%，革兰阳性菌中排名前3位为粪肠球菌20.6%、无乳链球菌10.6%、金黄色葡萄球菌4.9%。革兰阴性菌中大肠埃希菌占比最高为27.7%，其次为肺炎克雷伯杆菌5.8%、阴沟杆菌5.4%。分离菌株主要来自分泌物（主要为女性生殖器分泌物）75.8%，下呼吸道标本（痰）7.4%和血液5.2%。对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率各占40.2%和46.8%;目前还没有分离出耐利奈唑胺和万古霉素的葡萄球菌;腸球菌中检测出3株利奈唑胺耐药、1株万古霉素耐药粪肠球菌和1株利奈唑胺中介、1株万古霉素耐药屎肠球菌。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素仍然保持高敏感性;非发酵革兰阴性杆菌主要以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主，两者对大多临床常用抗生素均保持高敏感性，无碳青霉烯类抗生素耐药菌株。结论：该院主要临床分离菌对常用抗菌药物呈现不同程度耐药，细菌室专业人员应加强定期监测，加强与临床医师的沟通，临床应根据耐药情况，合理选择抗生素，预防和减少耐药菌的产生。

关键词：药敏试验;耐药性监测;抗菌药物;合理用药

【中图分类号】 R197.64    【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）03--04

近年来，由于临床上广谱抗生素的不合理使用乃至滥用，导致细菌耐药性问题日益严重，临床治疗面临越来越严峻的挑战，细菌耐药俨然已成为我国一个严重的公共卫生问题[1-2]。细菌耐药性监测报告对确定地区和部门的细菌耐药现状，预测细菌耐药性变化趋势以及指导临床抗感染治疗的经验治疗有着重要的作用。本文就2021年江苏省某三甲妇幼保健院的细菌检测结果进行分析，将细菌的分布特点以及对常见受试药物的敏感性情况报告如下，为抗生素在临床诊疗中的合理使用提供科学的参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

收集2021年1月1日-12月31号医院门急诊和住院患者临床分离菌株，剔除相同患者连续检测出的同一部位的重复菌株以及真菌、厌氧菌、分枝杆菌后，该院2021年临床分离得到共计3352株细菌。

1.1.2 培养基、药敏卡、药敏纸片及仪器

细菌培养和分离的平板购自郑州安图公司。药敏试验板卡为AST-GP67、AST-GN09和DL-96SA、DL-96NE、DL-96STR、DL-96E，分别购自法国生物梅里埃公司和广州珠海迪尔生物工程有限公司;药敏纸片产自英国Oxoid公司;游标卡尺、VITEK 2 Compact全自动细菌药敏分析仪，购自法国生物梅里埃公司;迪尔半自动细菌药敏分析仪购自广州珠海迪尔生物工程有限公司。

1.1.3 质控菌株

质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC229212、粪肠球菌ATCC29213、铜绿假单胞菌ATCC27853以及流感嗜血杆菌ATCC49247。

1.2 方法

1.2.1 菌株培养和鉴定

按照《全国临床检验操作规程》对临床标本进行分离培养，采用全自动VITEK 2 Compact分析仪，迪尔半自动分析仪鉴定菌株的种类。

1.2.2 药敏实验

自动化仪器法联合纸片扩散法（Kirby-Bauer method， K-B法）进行药敏实验，仪器法孵育结束后仪器自动判读每种临床药物的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration， MIC），K-B法用游标卡尺测量每种药物抑菌圈的直径（mm）。细菌药敏结果折点的判读参照CLSI指南M100 2020版。

1.3 统计分析

参照CLSI指南2020版细菌药敏折点对药敏结果进行判读;采用WHONET 5.6软件进行临床菌株的构成和相关耐药性分析，计数资料以例数或百分比表示。

2 结果

2.1 细菌分布与构成

2021年该院分离出细菌非重复临床分离株3352株，其中革兰阴性菌1782株（占53.2%），革兰阳性菌1570株（占46.8%），革兰阴性菌中排名前3位为大肠埃希菌929株（27.7%）、肺炎克雷伯杆菌196株（5.8%）、阴沟杆菌180株（5.4%）。革兰阳性菌中排名前3位为粪肠球菌691株（20.6%）、无乳链球菌357株（10.6%）、金黄色葡萄球菌164株（4.9%）。菌种构成见表1。分离菌株的标本类型以分泌物（ 包括女性生殖器分泌物）占比最多为75.8%，其他依次为下呼吸道标本（痰）7.4% 、血液5.2% 、羊水4.5% 、其他标本7.2%。

2.2 革兰阳性球菌对抗生素的敏感性和耐药性

2.2.1 葡萄球菌属细菌

金黄色葡萄球菌分离出164株，凝固酶阴性葡萄球菌分离出188株。金葡菌中甲氧西林耐药株（MRSA）的检出率为40.2%，凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药株（MRCNS）检出率分别为46.8%。MRSA对青霉素G、克林霉素、红霉素、四环素的耐药率显著高于MSSA（甲氧西林敏感株），而对甲氧苄啶-磺胺甲噁的耐药率低于低于MSSA。MRCNS对甲氧苄啶-磺胺甲噁的耐药率明显高于MRSA;除四环素外，MRCNS对各抗菌药物的耐药率均高于甲氧西林敏感的菌株。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺不敏感的菌株。见表2。

2.2.2 肠球菌属

肠球菌属细菌共检出741株，其中粪肠球菌691株（93.3%），屎肠球菌50株（6.7%），除四环素以及红霉素外，粪肠球菌对其余受试抗菌药物耐药率均低于50%，粪肠球菌对高浓度链霉素、四环素的耐药率分别为22.9%、79.5%，高于屎肠球菌的18%、62.5%，屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林、高浓度庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、红霉素的耐药率高于粪肠球菌。检测到3株利奈唑胺耐药、1株万古霉素耐药的粪肠球菌和1株利奈唑胺中介、1株万古霉素耐药的屎肠球菌，结果均用利奈唑胺、万古霉素纸片法复核确认。见表3。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感性和耐药性

2.3.1 肠杆菌科细菌

检出大肠埃希菌929株，对美罗培南、亚胺培南的耐药率分别为0.2%、0.2%，对氨苄西林、头孢曲松、复发新诺明、环丙沙星的耐药率比较高，对其他抗生素均保持较高的敏感性;检出肺炎克雷伯菌196株，除了氨芐西林、头孢曲松、复发新诺明、氨苄西林/舒巴坦，肺炎克雷伯对其他临床受试药物保持高度敏感性。耐碳青霉烯肠杆菌科细菌（CRE）检出率为0.5%（8/1626），分别为大肠埃希菌3株（37.5%）、阴沟肠杆菌3株（37.5%）、产气肠杆菌1株（12.5%）、肺炎克雷伯菌1株12.5%）;CRE检出率最高的科室为妇科（75%），其次为产科（12.5%）、新生儿科（12.5%）;标本主要来自分泌物（75%）、羊水（12.5%）、尿液（12.5%）。见表4。

2.3.2 不发酵革兰阴性杆菌

检出非发酵革兰阴性杆菌主要为铜绿假单胞菌46株和鲍曼不动杆菌18株;46株铜绿假单胞菌中有两株亚胺培南中介，对哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、妥布霉素、头孢他啶、阿米拉卡星、头孢吡肟均高度敏感。鲍曼不动杆菌对氨曲南耐药率比较高为66.7%，对其他药物均高度敏感。见表5。

3 讨论

2021年该院细菌耐药监测结果显示，共分离非重复临床病原菌3325株，其中革兰阴性菌1782株占53.2%，革兰阳性菌1570株占46.8%。革兰阳性菌检出率高于2020年CHINET监测数据（28.9%），革兰阴性菌检出率低于2020年CHINET监测数据（71.1%），与其他妇幼保健院数据接近[3-5]。革兰阴性杆菌中排名前3位的是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌。革兰阳性球菌球菌中排名前3位的是粪场球菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌，与全国耐药监测数据较为一致[3]。分离菌株主要来自分泌物标本（ 包括女性生殖器分泌物）75.8%、下呼吸道标本（痰）7.4%、血液5.2%、羊水4.5%，与CHINET监测数据差距较大[3]，提示妇幼专科医院患者与综合性医院患者的病原菌分布存在明显的差异，与该院女性生殖器分泌物标本、羊水标本高送检率有关。

该院耐药监测数据中金黄色葡萄球菌MRSA的分离率为40.2%，高于2018-2020年CHINET监测报告全国平均水平29.4%、30.2%、30.9%，接近江苏省平均水平42.2%、45.5%、45.8%[3，6-7]。但由于MRSA的耐药机制特殊，MRSA高耐药性给临床用药选择带来了严峻的挑战[8]。提示该院临床在抗生素的合理使用，院感预防和控制等措施方面仍需加强。凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS的分离率为46.8%，低于全国平均水平74.7%、75.4%，75.7%，同时也低于江苏省平均水平76.7%、77.5%，78.2%，MRSA和MRCNS对红霉素、克林霉素有较高的耐药率，均>50%。对氟喹诺酮类药物、庆大霉素、利福平有较高的敏感性。目前尚未检测出对利奈唑胺、万古霉素耐药的葡萄球菌属，提示上述两种药物仍是治疗MRSA的首选药物。

肠球菌原一般寄生于人体的肠道内，近年来由于大量广谱抗生素的使用以及不断增加的医源性侵入性治疗，肠球菌的异位寄生现象已成为院内重要的感染源[9-10]。中国耐药性监测网肠球菌的检出率也呈现逐年上升的趋势[3，6-7]。该院分离出的粪肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药率整体上低于屎肠球菌。屎肠球菌对环丙沙星、红霉素、四环素都有较高的耐药性（>60%）。除了对红霉素耐药率为56.1%、以及对四环素耐药率高达79.5%，粪肠球菌对临床上大多数的抗生素耐药率较低。耐万古霉素肠球菌（vancomycin resistantEnterococcus VRE）自20世纪80年代中期被发现后，随即在全球蔓延。该院粪场球菌、屎肠球菌对利奈唑胺、万古霉素耐药菌株均已出现，应引起重视，提示临床应合理选择抗菌药物。

该院检出的肠杆菌科细菌主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌。大肠埃希菌对氨苄西林、头孢曲松的耐药率>50%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率>50%。两者对其他受试药物均较敏感。该院CRE的检出率为0.5%，肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌CRE分别占各自菌种的0.3%、0.5%，且对碳青霉烯类抗生素的耐药率低于1%，远低于CHINET监测数据及其他相关文献报道[11]，CRE的标本主要来自妇科，从分泌物标本中检出，主要由于妇科病人免疫力低下，侵袭性操作多，容易发生医院感染[12]。医院需要加强对这些科室的病原菌管理及耐药性监测。

研究中，该院检出的非发酵革兰阴性杆菌中铜绿假单胞菌46株、鲍曼不动杆菌18株。铜绿假单胞菌对所有的抗菌药物的耐药率均在5%以下，未检测出耐碳青霉烯类菌株。18株鲍曼不动杆菌除了对氨曲南的耐药率为66.7%，对其他所检测的药物的感染均保持高度敏感性，有别于2020年CHINET监测数据全国平均水平以及其他三级医院的监测数据[13-14]。这主要是因为该院分离株主要来自儿童，病情较轻，与多重耐药铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌高检出率的三甲综合性医院有明显的区别。综合性医院两种菌的高检出率与患者基础疾病较严重复杂，长期的低免疫力状态、经常进行侵入性诊疗手段以及临床抗生素的不合理使用密切相关，因此，医务人员应注重隔离相关措施，加强手卫生以及抗生素的合理使用，以防止院内感染的发生。

综上所述，通过对2021年该院临床细菌耐药性监测数据的分析，发现该院细菌耐药形势依然不乐观，不同菌株对临床常用的抗菌药物耐药性不同。对该院的细菌耐药情况进行长期动态监测，实时了解耐药菌流行病学以及药敏变迁趋势是非常重要的，据此可为临床医师经验用药以及合理使用抗生素提供科学的实验室依据。在日常的工作中，微生物实验室也应加强与临床科室的沟通，协同多部门合作，加强病房的管理，以此来控制和减少医院常见耐药菌的播散和流行。此外，因本次耐药监测的样本量少，数据分析结果仍有待进一步深入。

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作者简介：赵伟（1990-），女，江苏沭阳人，江苏省南京市妇幼保健院检验科住院医师（检验医师），临床检验诊断学硕士，研究方向：微生物、免疫等临床检验。

基金项目：南京医科大学科技发展基金（No：NMUB20210095）

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