复方黄柏液涂剂对深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中血管化的影响研究

肖长栓 刘娅平 孙奎 杨景哲

[摘要]目的：探討复方黄柏液涂剂外用对深Ⅱ度烧伤创面组织愈合及血管化的影响。方法：选择2018年3月-2019年12月承德医学院附属医院烧伤整形科确诊的深Ⅱ度烧伤患者60例，采用随机数字表法分为两组，两组均采用标准化创面处理，在此基础上，对照组（n=30）烧伤创面外用碘伏溶液，每日换药1次，治疗组（n=30）烧伤创面外用复方黄柏液涂剂，每日换药1次。两组于伤后7 d、14 d、21 d分别抽取静脉血及留取创面组织标本，按照酶联免疫吸附法测定血清及创面组织中血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子-7（FGF-7）水平，观察各组创面伤后第0天及第14天病理学改变，计算伤后14 d、21 d创面愈合率。结果：伤后7 d、14 d治疗组血清VEGF、FGF-7水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），伤后21 d两组血清VEGF、FGF-7水平对比，差异无统计学意义（P>0.05）。伤后7 d、14 d、21 d，治疗组创面组织VEGF、FGF-7水平显著高于对照组（P<0.05）。对照组、治疗组在伤后第7天出现上皮化，光镜下治疗组较对照组伤后第14天组织水肿减轻，炎症细胞浸润减少。伤后14 d、21 d，治疗组创面愈合率显著高于对照组（P<0.05）。结论：复方黄柏液涂剂外用可能通过促进部分生长因子的产生和释放，进而促进烧伤创面再血管化及创面愈合，值得临床推广应用。

[关键词]复方黄柏液涂剂;烧伤创面;血管内皮生长因子;成纤维细胞生长因子

[中图分类号]R282.71    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2022）02-0001-04

Effect of Compound Cortex Phellodendri Fluid on Neovascularization in Healing Process of Skin with Deep Ⅱ Degree Burn

XIAO Changshuan1，LIU Yaping2，SUN Kui1，YANG Jingzhe1

（1.Department of Burn and Plastic Surgery，Affiliated Hospital of Chengde Medical University， Chengde 067000，Hebei，China; 2.Gynaecology of Affiliated Hospital of Chengde Medical University，Chengde 067000，Hebei，China）

Abstract： Objective To observe the effect of Compound Cortex Phellodendri Fluid of certain concentration as treatment on wound surface healing and neovascularization for skin with deep Ⅱ degree burn. Methods 60 patients with Deep Ⅱ Degree Burn diagnosed by the Department of burn and plastic surgery of the Affiliated Hospital of Chengde Medical College from March 2018 to December 2019 were randomly divided into two groups. Both groups were treated with standardized wound treatment. On this basis， the control group （n=30） was treated with iodophor solution externally， and the dressing was changed once a day. The treatment group （n=30） was treated with compound Huangbai liquid coating externally， Change dressing once a day. The levels of vascular endothelial growth factor （VEGF） and fibroblast growth factor-7 （FGF-7） in serum and wound tissue were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The pathological changes on day 0 and day 14 were observed， and the wound healing rate on 14 d and 21 d was calculated. Results The levels of serum VEGF and FGF-7 in the treatment group were significantly higher than those in the control group at 7 d and 14 d after injury （P<0.05）. There was no significant difference between the two groups at 21 d after injury （P>0.05）. At 7 d， 14 d and 21 d after injury， the levels of VEGF and FGF-7 in the wound tissue of the treatment group were significantly higher than those of the control group （P<0.05）. Epithelialization occurred on the 7th day after injury in the control group and the treatment group. Under light microscope， the tissue edema and inflammatory cell infiltration in the treatment group were less than those in the control group on the 14th day after injury. At 14 d and 21 d after injury， the wound healing rate in the treatment group was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. Conclusion Compound Cortex Phellodendri fluid treatment can accelerate wound healing and neovascularization， by inhibiting the production and release some growth factors， and is worth clinical promotion.

Key words： compound cortex phellodendri fluid; burn wound; vascular endothelial growth factor; fibroblast growth factor

烧伤是由热液、火焰、蒸汽、高温气体等所导致的体表组织损害，有较高的致残率和致死率，其预后主要和院前救治、年龄、营养状况等原因有关[1]。由于深Ⅱ度创面属难愈性创面范畴，除手术干预外，创面处理显得尤为重要[2-3]。合理使用外用药物可缩短创面愈合周期，因此外用药物及敷料的选择仍然是目前的研究热点。有研究表明，复方黄柏液涂剂具有清热解毒、消肿止痛、祛腐生肌的功效，对褥疮、糖尿病足溃疡等慢性创面具有良好的治疗效果[4-5]。但对深Ⅱ度烧伤创面的干预作用却少有报道。本试验选择深Ⅱ度烧伤患者，通过复方黄柏液涂剂对相关生长因子表达的影响，探索其在创面愈合及血管化中的作用。

1  资料和方法

1.1 一般资料：选择2018年3月-2019年12月承德医学院附属医院烧伤整形科确诊的深Ⅱ度烧伤患者60例，采用随机数字表法分为两组。对照组30例，男18例，女12例;年龄20～65岁，平均年龄（45.23±2.36）岁;烧伤创面占体表面积为（8.75±2.01）%;火焰烧伤8例，热液烫伤15例，电烧伤7例;躯干14例，四肢16例。治疗组30例，男17例，女13例;年龄20～67岁，平均年龄（47.41±3.25）岁;烧伤创面占体表面积为（7.98±3.54）%;火焰烧伤9例，热液烫伤13例，电烧伤8例;躯干13例，四肢17例。两组在治疗过程中均无脱落病例，经单因素方差分析，两组患者基本资料差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 诊断标准：具有明确烧伤病史;体表可见烧伤创面;创面采用三度四分法判定为深Ⅱ度烧伤：局部肿胀，表皮较白或棕黄，间或有较小的水疱，创面基底微湿、微红或红白相间、质较韧，感觉迟钝，温度降低，并可见粟粒大小的红色小点或细小树枝状血管枝即可诊断。

1.3 纳入和排除标准

1.3.1 纳入标准：①符合深Ⅱ度烧伤创面的诊断标准;②无严重的心、肝、肾功能不全，无遗传性、传染性疾病、恶性肿瘤、严重营养不良;③采用中国九分法计算烧伤面积，成人体表面积（TBSA）计算方法为：头颈部为9%（1个9%），双上肢为18%（2个9%），躯干（含会阴1%）为27%（3个9%），双下肢（含臀部）为46%（5个9%+1%），共为11×9%+1%=100%;④选择深Ⅱ度创面面积在10%TBSA以下，无明确Ⅲ度创面轻度患者，以1%TBSA以上的深Ⅱ度创面作为观察区域;⑤签署知情同意书，自愿参加本研究。

1.3.2 排除标准：①大面积烧伤中重度患者，需以手术治疗方式为主的患者;②严重肝肾功能不全、重度营养不良、肿瘤、精神病患者;③孕妇或备孕的妇女;④不签署知情同意书者。

1.4 治疗方法

两组进行标准化创面处理方案。首先用大量流动清水冲洗创面，减轻创面疼痛，边冲洗边用干净棉球轻轻拭去泥沙、粉尘等异物;其次以千分之一的新洁尔灭反复冲洗创面三次，对水疱行低位引流，剪除坏死表皮，再次用千分之一的新洁尔灭棉球自中心至边缘消毒创面，达创面边缘约5 cm。

对照组使用碘伏原液（北京四环卫生药械厂有限公司，京卫消证字2014第0302号500毫升/瓶），浸泡两层无菌纱布覆盖创面，再以凡士林纱布覆盖创面，并用干燥、清洁敷料包扎，每日换药1次;治疗组采用原液复方黄柏液涂剂（山东汉方制药有限公司，国药准字Z10950097，150 毫升/瓶），约每1%TBSA创面应用35 ml浸泡两层无菌纱布，使其完全覆盖创面，余下方法同对照组。

两组患者住院治疗期间，应用常规治疗方案：①应用广谱抗生素防治创面感染，如克林霉素、头孢类抗生素;②补液治疗，常用乳酸钠林格氏液、5%葡萄糖注射液等;③不使用其他针对创面的药物及治疗措施，两组治疗均为21 d。

1.5 标本采集：①于伤后7 d、14 d、21 d两组分别抽取静脉血5 ml，3 000 r/min离心15 min后取上清液，-20℃冷冻保存待测VEGF、FGF-7水平;②于伤后7 d、14 d、21 d两组分别取创面组织（方法：将创面分泌物及残存药物用干燥无菌纱布拭干，新洁尔灭消毒，选取烫伤创面基底部组织，用眼科剪剪取少许创面组织，深约5 mm）充分研碎，制作组织匀浆，3 000 r/min离心15 min后取上清液，-4℃冷冻及时保存待测VEGF、FGF-7水平。随机选择伤后0 d及各组伤后7 d、14 d病例各5例按照上述方法取创面组织置于4%甲醛中固定，待病理观察。

1.6 观察指标和检测方法：①解冻血清及组织匀浆标本，按照试剂盒（购自武汉华美生物工程有限公司）说明书以双抗体夹心酶联免疫吸附法测定VEGF、FGF-7水平（pg/ml）;②将固定好的创面组织按照脱水、石蜡包埋、切片等程序，HE染色后光镜下观察;③创面愈合率（%）=（创面总面积-残余创面面积）∕创面总面积×100%。

1.7 统计学分析：统计学分析运用SPSS 20.0统计软件进行处理，本试验所有数据，均进行方差齐性及正态检验，以均数±标准差为表现形式，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2  结果

2.1 两组患者不同时段血清VEGF水平比较：两组患者在伤后7 d、14 d血清VEGF水平均呈上升水平，伤后21 d血清VEGF水平均出现了下降。伤后7 d、14 d，治疗组血清VEGF水平均高于对照组，差异有統计学意义（P<0.05）;伤后21 d，治疗组血清VEGF水平与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.2 两组患者不同时段血清FGF-7水平比较：两组患者在伤后7 d、14 d血清FGF-7水平均呈上升水平，伤后21 d血清FGF-7水平均出现了下降。伤后7 d、14 d，治疗组血清FGF-7水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;伤后21 d，治疗组血清FGF-7水平与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.3 两组患者不同时段创面VEGF水平比较：两组患者在伤后7 d、14 d创面VEGF水平均呈上升水平，伤后21 d创面VEGF水平均出现了下降。伤后7 d、14 d、21 d，治疗组创面VEGF水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。见表3。

2.4 两组患者不同时段创面FGF-7水平比较：两组患者在伤后7 d、14 d创面FGF-7水平均呈上升水平，伤后21 d创面FGF-7水平均出现了下降。伤后7 d、14 d、21 d，治疗组创面VEGF水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表4。

2.5 创面病理切片检查：如图1A所示，伤后第0天创口未见明显血管化，可见大量炎性细胞聚集、浸润、组织细胞结构不清、血管通透性明显升高。如图1B～1C所示，伤后第7天两组均出现少量上皮化，但差异不明显。如图1D所示，对照组伤后第14天可见一定数量的炎性细胞浸润、聚集和迁移，有一定程度的血管化，血管通透性较伤后第7天减轻。如图1E所示，治疗组伤后第14天切片可见适量红、白细胞浸润，血管化较明显。

2.6 两组患者不同时段创面愈合率比较：在伤后14 d、21 d，两组自14 d到21 d创面愈合率逐渐增高，且相同时间点内治疗组创面愈合率显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表5。

3  典型病例

某男，50岁，火焰烧伤双下肢8%，深Ⅱ度，入院时患者创面散在水疱形成，表皮松脱，基底红白相间，触痛迟钝，按前述治疗方法行创面标准化处理，采用复方黄柏液涂剂每1%TBSA创面应用35 ml进行治疗。治疗14 d后，患者部分创面愈合，未愈创面基底转为红色或结痂;治疗21 d后，患者大部创面愈合。见图2。

4  讨论

大量研究表明，深Ⅱ度烧伤创面病理机制复杂，可导致较高的致死率和致残率，严重影响烧伤患者的生命安全和生活质量[1]。虽然某些外用药物可通过诱导部分生长因子的表达在创面愈合中发挥一定作用，但在药物安全性及作用机制等方面一直未能形成共识。因此，积极寻找可行有效的促愈合药物及研究其具体作用机制成为临床医生亟需解决的问题。

复方黄柏液涂剂由黄柏、连翘、金银花、蒲公英和蜈蚣组成，连翘与黄柏共为君药，可清热解毒、散结排脓，为疮家之圣药。臣药为金银花，佐药为蒲公英，可助君药解毒、排脓，使药蜈蚣则具有攻毒散结、退炎治疮之功[6-7]。有研究发现，复方黄柏液涂剂具有广谱抗菌及调控部分生长因子的表达作用，可抑制创面炎症反应，迅速减轻伤口红肿，减少分泌物，加快伤口愈合作用，在难愈性创面转归中发挥重要作用[7-8]。

在烧伤创面愈合过程中，新生血管的形成是不可或缺的条件，因其可排出代谢废物，为创面愈合提供营养[9]。研究表明，多种生长因子（如FGF、VEGF）可刺激上皮细胞迁移、增殖、从而促进微血管形成、改善局部微循环[10-11]、加速创面愈合。FGF家族包括23个成员，其中对FGF-7研究较多，机体组织损伤会使FGF-7在一定程度上表达增加，从而加快了上皮细胞增殖及上皮化的速率，其高水平表达与组织损伤恢复时间一致[12-13]。此外，FGF-7的表达还能增加内皮细胞的增殖能力及VEGF表达水平，其是一种促血管生长因子，在正常组织中低表达，在组织损伤的早期VEGF即可有少量转录和分泌，使血小板、巨噬细胞活化，进一步释放VEGF，诱导表皮基底细胞移行，加速创面的上皮化[14-16]。另外，VEGF具有较强的促分裂和趋化作用，可以特异地作用于血管内皮细胞，形成血管萌芽和细小管腔，并可一定程度改善微血管通透性，促进新生血管的形成[17]。本研究相关数据表明，两组血清及创面组织中VEGF、FGF-7水平自伤后7 d到21 d均呈先升后降的趋势，各时间点中14 d为最高，21 d有所下降，且治疗组下降幅度较大。其中两组间第21天血清VEGF、FGF-7水平无明显差异，考虑可能与第21天创面坏死组织脱落，刺激减弱，微血管形成和局部微循环已建立，血管化程度降低有关。另外，应用复方黄柏液涂剂后，治疗组在各时间点血清中生长因子水平均高于对照组，但升高幅度较小，而局部创面组织中生长因子水平升高幅度大，這可能与本研究所选病例为轻度烫伤患者，创面面积较小，全身刺激较弱有关。说明对于轻症患者，局部指标的检测更具有说服力及临床意义，而对于中重症患者全身及局部指标的意义和重要性还需临床医生进一步研究探讨。上述研究结果说明复方黄柏液涂剂可通过改善血清及局部创面组织中相关生长因子水平有效促进深Ⅱ度烧伤创面血管化及愈合。

此外，从本研究病理切片中可看出，伤后第0天创面组织明显红肿、光镜下有大量炎性细胞聚集、浸润、组织细胞结构不清、血管通透性明显升高，伤后第14天治疗组组织红肿及血管通透性程度轻于对照组，炎性细胞浸润、聚集和迁移数量减少，血管化明显。伤后第14天、21天，治疗组较对照组愈合率显著升高，提示复方黄柏液涂剂可显著促进烧伤创面血管化及上皮化、减轻炎症反应，其在深Ⅱ度烧伤创面的再血管化及愈合过程中具有积极作用。

综上，通过本研究，笔者认为复方黄柏液涂剂可通过诱导和加强相关生长因子的表达对深Ⅱ度烧伤创面的血管化及愈合发挥积极作用，但治疗中用药的剂量、给药方式、作用机制还需更深层次的探讨研究。

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[收稿日期]2021-03-08

本文引用格式：肖长栓，刘娅平，孙奎，等.复方黄柏液涂剂对深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中血管化的影响研究[J].中国美容医学，2022，31（2）：1-5.