不同厂家六味地黄浓缩丸的质量分析

詹国平，朱丽芳，蔡家宝，黄晓瑜，詹成思

(深圳市南山区蛇口人民医院药剂科，广东 深圳 518067)

六味地黄丸大多用于滋补肾阴，主要是由牡丹皮，熟地黄，茯苓，酒茱萸，山药以及泽泻六味药材组成，对头晕耳鸣，肾阴亏损，腰膝酸软患者具有显著效果。而六味地黄浓缩丸是一类由常规丸剂改制成的现代剂型类型，其将现代药剂技术及传统中医药共同联系起来，不仅保留了传统汤剂中的优势，还将现代制药技术原有的先进性进行有效体现[1]。近年来，伴随着中药浓缩丸制剂技术不断完善，六味地黄浓缩丸的临床使用量越来越大，国内有诸多厂家均生产此类药物[2]。2010年版《中国药典》中规定的质量控制指标景关注于马钱苷与丹皮酚其含量检测方法为高效液相色谱法，在使用过程中方法准确性较高，但在检测时采用不同液相色谱法分别检测丹皮酚以及马钱苷含量使后期检测时费时较长，同时过程较为繁杂，会由于操作步骤较多产生分析误差，而牡丹皮是六味地黄丸中主要原材料，区别于其他五味药材生产过程中提取的是丹皮酚进行入药，因此需要观测丹皮酚在生产过程中的转移规律，有效控制生产质量情况，而熟地黄中5-羟甲基糠醛含量较高，该类物质对人体具有一定毒素反应，在食品中多数作为危害因子进行控制。因此本研究参考2015版《中国药典》测定市售5个不同厂家生产的六味地黄浓缩丸，对各项检验指标进行差异分析，基于现有质量标准对药品质量控制的作用进行评估，能在一定程度上科学系统的指导临床用药[3-4]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2020年1月—2020年12月市售5个不同厂家生产的六味地黄浓缩丸作为研究对象，并通过2015版《中国药典》规定项下溶出度、含量测定以及装量差异等相关内容对不同厂家的产品质量进行分析研究。

1.2 方法

1.2.1 仪器与材料

(1)仪器MSA225S-000-DU型电子天平、Agilent1260型高效液相色谱仪、ZB-1C型智能崩解仪(北京医疗设备四厂)、ZRS-8G型智能溶出仪、HHS21—4S型数显式电热恒温水浴锅、JBT/D—GXST380/26型超声波清洗器以及DHG-9070A型电热鼓风干燥箱(上海昕仪仪器仪表有限公司)。

(2)试剂马钱苷对照品(批号：111640-200901)以及丹皮酚对照品(批号：0708-9704)，甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯；MilliP<0.052ore纯水机制备超纯水。

(3)材料佛慈六味地黄浓缩丸(批准文号：国药准字Z62020664，兰州佛慈制药股份有限公司)、同仁堂六味地黄浓缩丸(批准文号：国药准字Z19993068，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂)、仲景六味地黄浓缩丸(批准文号：国药准字Z41022128，仲景宛西制药股份有限公司)、九芝堂六味地黄浓缩丸(批准文号：国药准字Z43020145，九芝堂股份有限公司)以及修正六味地黄浓缩丸(批准文号：国药准字Z22023388，通药制药集团股份有限公司)等5个不同厂家的六味地黄浓缩丸。

1.2.2 水分测定

(1)依据烘干法进行测定，选取2～5g供试品，将其在干燥且恒重的扁形称量瓶内妥善放置，厚度≤5mm，并对其进行精密的称重，之后将瓶盖缓缓打开，置于105℃的条件下进行5h干燥处理，并及时把瓶盖盖紧，放置在干燥器内，进行30min左右的冷却处理，再次精密称定，105℃干燥1h，再次冷却称重，连续两次称重相差<5mg即停止。依据减失之后的实际重量来系统计算供试品中的含水量，计算公式：Q=K×W+R+V×T

(2)溶散时限的检测，要采取供试品6丸，放置在适当孔径的吊篮玻璃管中，增加挡板后需要启动崩解仪进行检测。

1.2.3 含量测定

对照品溶液的制备：选取适量的马钱苷对照品、莫诺苷对照品及丹皮酚对照品适量，精密称定，加入50%甲醇，制成每lmL含有马钱苷、莫诺苷各40μg、含丹皮酚90μg的混合溶液，即得20μg马钱苷的对照品溶液。

(1)马钱苷含量测定

色谱条件：色谱柱Agilent EclipsePlusC18柱(100mm×4.6mm，3.5μm)；流动相：四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液(1：4：8：87)；柱温设置为40℃，检测波长数值设置为236nm；流速数值设置为1.0mL/min。

供试品溶液的制备：选取本品适量，全部研细，取出0.5g左右，精密称定，于具塞锥形瓶中放置，对其进行精密量取之后，将25mL浓度为50%的甲醇溶液缓缓加入，并进行密塞处理，之后对实际重量进行测量，并给予其1h加热回流处理，放冷之后，再次测量重量，经由50%甲醇溶液把已经减失掉的重量重新补足，精密抽取续滤液10mL放置在中性氧化硅柱上，其指标为4g，200目，铝柱内径为1cm，并使用10mL浓度为40%的甲醇进行洗脱后续收集流出液以及洗脱液，蒸干后需要将残渣采取浓度50%甲醇进行溶解，并转移到10mL量瓶中等待使用，完成后利用50%甲醇稀释到相应刻度，并将其充分摇匀，然后进行滤过，最终续滤液取出，即得。

测定法：依次对供试品及对照品溶液进行严密吸取，均需10μL，之后于液相色谱仪内缓缓注入，并对其实施测定，即得。

(2)丹皮酚含量测定

色谱条件：色谱柱：Agilent EclipsePlusC18柱；流动相：甲醇-水(70：30)；柱温为处于室温状态下；检测波长数值设置为274nm；流速数值设置为1.0mL/min。

供试品溶液的制备：选取本品适量，全部研细，取出0.5g左右，精密称定，于具塞锥形瓶中放置，对其进行精密量取之后，将50mL浓度为50%的甲醇溶液缓缓加入，并进行密塞处理，之后对实际重量进行测量，需要对供试品溶液进行超声处理，维持仪器参数为250W，频率保持35kHz，持续处理半小时，放冷之后，再次测量重量，并采取50%甲醇溶液补足已经解释掉的重量，将其充分摇匀后滤过处理，最终续滤液取出，即得。

1.3 观察指标

(1)观察分析五个不同厂家六味地黄浓缩丸重量差异情况。

(2)观察分析五个不同厂家六味地黄浓缩丸含量测定情况。

1.4 统计学处理

2 结果

由研究可以发现，不同厂家生产的六味地黄浓缩丸在重量并未有统计学差异，其全部符合2015版《中国药典》相关规定，见表1。

表1 五个不同厂家六味地黄浓缩丸重量差异情况

本研究发现，不同厂家马钱苷以及丹皮酚的含量均存在统计学差异，见表2。

表2 五个不同厂家六味地黄浓缩丸含量测定情况

3 讨论

3.1 六味地黄丸质量控制情况

六味地黄丸是目前应用广泛的中成药之一，主要是由熟地黄，山药，泽泻，茯苓，牡丹皮以及酒茱萸组成。熟地黄能够滋阴补精，泽泻能够去除湿气，山药可以健脾养胃，酒茱萸能够养肝收敛，牡丹皮可以清泻肝火，茯苓能够渗湿，帮助山药健脾，该药物使用时补泻结合，但以补为主。六味地黄丸还能用于治疗头晕耳鸣，骨蒸潮热，消渴等症状。现代医学研究表明，六味地黄丸在使用时能够提高自身免疫功能，起到抗低温，抗衰老的效果，因此需要重视六味地黄丸质量控制情况，提高药效。

3.2 六味地黄丸原材料作用分析

六味地黄丸中各类药材对患者机体均具有一定价值，药方中牡丹皮可长时间放置，使用时能够起到解毒、润喉的作用，同时还能增强免疫细胞功能。中药材牡丹皮主要成分为丹皮酚被规定为六味地黄丸质量分析控制的主要指标。现代医学研究证明丹皮酚以及牡丹皮中存在的糖类成分能够起到降温，消炎，解热的效果。

六味地黄丸另一配方为酒茱萸具有止汗、补肾、壮阳的效果，同时还能抑制血小板聚集，该类中药材中含有马钱苷、熊果酸以及莫诺苷等有效成分，在对酒茱萸进行质量控制时，以上有效成分均被作为酒茱萸的常规检测成分。研究表明，2005年起《中国药典》将马钱苷作为六味地黄丸的主要质量控制指标，该有效成分能够起到抗癌、抗辐射的效果，还能止咳化痰。

熟地黄又被称之为熟地以及地黄，地黄可分为生地和熟地，男性患者多服用熟地黄，女性患者多服用生地黄，熟地黄在使用过程中能够治疗月经不调及头晕等症状，起到补血益肾的效果。熟地黄中重要化学成分包括毛蕊花糖苷、氨基酸等，糖类成分高于生地黄。由于熟地黄中糖类会脱水生成果糖以及5-羟甲基糠醛，研究分析表明，药材中5-羟甲基糠醛含量较多，会对机体产生毒理反应，因此需要严格控制六味地黄丸研究。

山药应用时可起到化痰止咳，补脾养胃的效果，现代营养学研究证明，山药在使用过程中能够增强免疫功能，并且含有大量蛋白质和维生素。同时山药中主要成分为淀粉，日常生活中使用能够增加脾胃消化吸收能力，防止出现便秘，其他化学成分包括山药碱、尿囊素以及氨基酸等，尿囊素能够促进细胞生长，并且加速皮肤组织生长，能够治疗皮肤创伤。

茯苓能够治疗头痛，膝关节积液等症状，起到解毒效果。该类中药材主要化学成分包括茯苓酸，去氢茯苓酸等，由于茯苓中化学成分较为复杂，同时含量较少，目前对该类药材质量分析研究不多。

泽泻具有较好利尿功能，促进尿素以及氯化钠排出体外，还能降低胆固醇，起到降血脂的效果，分析原因在于泽泻能够抑制小肠脂化胆固醇的能力，与茯苓相同，泽泻化学成分较为复杂，含量较少，因此质量控制分析研究较少。

3.3 六味地黄浓缩丸的质量控制情况

通过以上六味地黄丸中药材成分介绍表明中成药临床效果较好，同时广泛应用使六味地黄丸质量控制效果重要性提高。而目前六味地黄制剂类型较多，包括浓缩丸，软胶囊，片剂，口服液等多种形式，其中六味地黄浓缩丸使用率较高，因此质量控制是其研究重点。当前中药材的来源具有一定的复杂性，且中药材科属种类、环境以及栽培采收等方式均存在差异，因此不同批次药材原料的质量会具有明显的差异性[5]。依据2015年版《中国药典》中关于药物质量标准检验可以发现不同厂家的六味地黄丸其水分、容散时限及含量等多个环节均同有关规定相符合。药典中规定其水分不能超过9.0%，且不同厂家六味地黄浓缩丸并未存在显著差异性；同时溶散时限不能大于120min，且不同厂家之间具有较大差异，其全部符合2015版《中国药典》相关规定，同时不同厂家马钱苷以及丹皮酚的含量均存在明显差异，表明不同厂家不同批次的药品中马钱苷以及丹皮酚的含量是不一致的[6]。研究发现，不同厂家马钱苷以及丹皮酚的含量均存在明显差异，其中依据含量的多少顺序依次为：仲景六味地黄浓缩丸>同仁堂六味地黄浓缩丸>九芝堂六味地黄浓缩丸>佛慈六味地黄浓缩丸>修正六味地黄浓缩丸，这可能是因为不同厂家所应用的中药材存在差异。因为当前中药材的来源相对比较复杂且存在明显的差异性，其栽培、环境及采收加工方式差异较大，因此使得批次不同的药材原料在质量上出现一定程度的差异性。同时药材质量合格，但制剂工艺并不恰当或者是未依据规程完成操作，导致未彻底提取药材有效成分，进而使六味地黄浓缩丸含量存有差异。

综上所述，当前市售六味地黄浓缩丸在质量上已经达到了国家标准所规定的基本要求，但在具体指标上存在明显的差异性，因此需要有效提高药品质量控制范围，保证后期患者用药安全性。