豆蔻饮片的质量标准研究

赵斌 韩丽丽

（潍坊市检验检测中心 山东潍坊 261100）

1 前言

豆蔻始载于《名医别录》，被列为上品，但并未区分白豆蔻与草豆蔻，统称“豆蔻”[1]，《开元本草》将其分列为“白豆蔻”与“草豆蔻”二项[2]。《中国药典》1953年版始收载豆蔻，其来源是小豆蔻而非白豆蔻或爪哇白豆蔻，又规定以白豆蔻代用小豆蔻[3]，《中国药典》1985年版将植物来源始定为白豆蔻、爪哇白豆蔻[4]。之后的历版中国药典均沿用此植物来源。

《山东中药饮片炮制规范》2012年版收载豆蔻[5]，其植物来源与药典相同，按照山东地区临床使用豆蔻的实际情况，将豆蔻分为豆蔻仁、豆蔻皮2种炮制规格。本文基于2012年版的《山东中药饮片炮制规范》，并参考《中国药典》的相关内容，结合市售豆蔻饮片的实际情况，对豆蔻饮片的质量标准进行修订和补充，为完善豆蔻饮片质量标准提供数据支撑。

2 仪器与试药

2.1 仪器

显微镜（LEICA，DM1000型）；千分之一电子天平（PB203型），万分之一电子天平（XSE204B型），百万分之一电子天平（XPR10型）（梅特勒公司）；恒温干燥箱（精鹰医疗，102型）；马弗炉（龙口电炉，SX2-5-12D型）；电热套（北京永光明，DZTW型）；气相色谱仪（安捷伦，7890A型）。

2.2 试药

α-蒎烯（批号：110897-201803，含量：99.9%）；桉油精（批号：110788-201707，含量：100%）；芳樟醇（批号：111503-201603，含量：97.8%）；樟脑（批号：110747-201409，含量：98.7%）；α-松油醇（批号：111859-201503）（中国食品药品检定研究院）。

水为超纯水；正己烷为色谱纯（国药）；其他试剂均为分析纯（国药）；硅胶G薄层板（青岛海洋，批号：20180612，规格：10 cm×20 cm）；11批豆蔻仁和8批豆蔻皮，均由山东潍坊当地饮片厂提供，饮片信息详见表1。

表1 豆蔻饮片信息

3 方法与结果

3.1 性状

豆蔻仁[5]：俗称“蔻球”，多集结成团，蔻球分三瓣，各瓣间有白色隔膜分隔，每瓣有种子7~10粒，习称“蔻米”，种子背面略隆起，呈不规则的多面体，直径3~4 mm，表面呈暗棕色或灰棕色，质坚硬，断面为白色，呈粉质，有油性，气芳香，味辛凉[5]，详见图1。

豆蔻皮[5]：不规则的薄片，有较深的在纵向凹纹，黄白色至淡黄棕色，体轻，质脆，气微香，味辛[5]，详见图1。

3.2 显微特征

使用水合氯醛将豆蔻仁与豆蔻皮的粉末进行透化，置于显微镜下观察。检验结果与《中国药典》2015年版一部[6]及《山东中药饮片炮制规范》2012年版[5]豆蔻项的相关描述内容进行对照，结果一致，方法合理。检验结果见图2。

3.3 薄层色谱

3.3.1 供试品溶液与对照品溶液制备

取豆蔻饮片，粉碎成粗粉，称取适量粗粉，按照《中国药典》2015年版四部通则2204挥发油测定法[8]进行测定，提取挥发油，分取上述挥发油0.1 ml，置于适宜容器中，加入正已烷20 ml使其溶解，制成供试品溶液[6]。另称取适量桉油精对照品，置于量瓶中，加入正已烷试剂，将其溶解为50 mg/1ml的对照品溶液[6]。

3.3.2 色谱条件

按照《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法[8]试验，吸取上述2种溶液各2μl，分别置于同一块10 cm×20 cm的硅胶G薄层板上[6]；按照《中国药典》2015年版一部[6]，将展开剂的配置比例定为：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯（15∶5∶0.5）；将展开剂倾入展开缸内，同时放入已点样的薄层板（保持在展开剂液面以上），密闭15 min；将薄层板置于展开剂液面以下进行展开，展开约8cm后，取出，晾干，以5%香草醛硫酸溶液均匀喷洒至薄层板上，将薄层板置于温度调至105℃的恒温干燥箱内，加热至斑点显色清晰[6]。

3.3.3 试验结果

按上述条件展开并显色后，供试品色谱与对照品色谱在相同位置有相同的斑点[6]，斑点齐整，分离度良好，结果见图3。

3.4 桉油精含量测定

3.4.1 色谱条件

参照《中国药典》2015年版一部[6]含量测定桉油精项下的色谱条件并根据试剂情况加以调整：色谱柱的固定相：甲基硅橡胶（SE-54）；涂布浓度：10%[6]；柱温：100℃；进样口温度：150℃；检测器：FID；检测器温度：200℃[6]；进样量：1μl；分流比：120∶1；理论板数：≥1 000（按桉油精峰计算）[6]。按此色谱条件进行试验，各项指标均符合要求[8]，色谱图见图4。

3.4.2 溶液制备

对照品溶液制备[6]：参照《中国药典》2015年版一部[6]含量测定桉油精项下对照品溶液的制备方法，制备本实验的对照品溶液，得每1 ml含25 mg的对照品溶液。

供试品溶液制备[6]：取豆蔻仁与豆蔻皮饮片，用粉碎机反复粉碎，使所有粉末均能过3号筛，取豆蔻仁粉末约5 g，取豆蔻皮粉末约25 g，精密称定，参照《中国药典》2015年版一部[6]含量测定桉油精项下供试品溶液的制备方法，制备本实验的供试品溶液。

3.4.3 方法学考察

线性考察[8]：按上述对照品溶液的制备方法，精密称取对照品适量，置于适宜容量的量瓶中，加正己烷试剂，分别制成浓度为6.3215 mg/ml、12.643 mg/ml、25.286 mg/ml、37.929 mg/ml、50.572 mg/ml、63.215 mg/ml的溶液[8]，按3.4.1中的色谱条件进行试验，分别吸取上述溶液，注入气相色谱仪，记录对照品的峰面积，进行线性回归统计，以进样量为横轴，以峰面积为纵轴[8]，绘制回归曲线，得回归方程y=308.01x+2.4674，相关系数为r=0.999 9。试验结果说明，桉油精浓度在6.321 5 mg/ml~63.215 mg/ml之间时，峰面积与浓度的线性关系良好[8]。

精密度试验[8]：按3.4.1中的色谱条件进行试验，精密吸取3.4.2中的对照品溶液1μl，注入气相色谱仪，记录对照品的峰面积，连续测定6次[8]，试验结果显示，峰面积的RSD为0.55%，表明仪器具有良好的精密度[8]。

稳定性试验[8]：按3.4.1中的色谱条件进行试验，精密吸取3.4.2中的供试品溶液1μl，注入气相色谱仪，每隔4 h进样1次，共考察24 h[8]，记录对照品的峰面积，试验结果显示，峰面积的RSD为0.88%，说明供试品溶液在24 h内具有良好的稳定性[8]。

重复性试验[8]：取供试品（批 号：19121603）适量，按3.4.2中的供试品溶液制备方法，制备6份平行样品[8]，按3.4.1中的色谱条件进行试验，注入气相色谱仪，测定对照品的峰面积，试验结果显示，峰面积的RSD为1.8%，表明该方法具有良好的重复性[8]。

加样回收试验[8]：取已粉碎且过3号筛的供试品（含量已测得，批号：19121603）约1g，精密称取6份[8]，向每份样品中精密加入2 ml浓度为25.286 mg/ml的桉油精对照品溶液[8]，再按照3.4.2中的供试品溶液制备方法，制备供试品溶液，按3.4.1中的色谱条件进行试验，计算RSD和回收率，结果显示，回收率为98.8%，RSD为1.7%，表明该方法具有良好的准确度[8]。

3.4.4 样品测定

取所收集的豆蔻仁饮片11批，豆蔻皮饮片8皮，按3.4.2中的方法制备供试品溶液和对照品溶液，按3.4.1中的色谱条件进行测定，记录峰面积，计算供试品中桉油精的含量，结果见表2、表3。拟定豆蔻仁含桉油精≥2.0%。

表2 豆蔻仁桉油精含量测定结果

表3 豆蔻皮桉油精含量测定结果

4 讨论

豆蔻的主要作用是利湿理气、温止呕吐，主要用于治疗湿阻中焦、湿温初起、脾胃虚寒所致的恶心呕吐，以及妊娠呕吐[9]。当代药理学研究表明，本品可增加胃黏膜的血流量，提高血清中的胃泌素水平，改善胃黏膜对抗氧自由基损伤的作用[10]。此外，本品还具有显著的抗氧化作用[11-12]。

《中国药典》虽收载豆蔻，但并未区分豆蔻仁与豆蔻皮2种炮制规格。本文在考虑山东地区临床用药实际情况的基础上，区分了2种炮制规格，同时也充分利用了豆蔻药材资源。

本文的显微特征鉴别是在参照《中国药典》[6]与《山东中药饮片炮制规范》[5]的基础上经实际检验确定的结果，与标准结果一致。考虑到标准的延续性，故采用了原标准的描述。

本文改进了《中国药典》[6]与《山东中药饮片炮制规范》[5]中的薄层色谱鉴别方法[5-6]。在研究中发现，将饮片提取的挥发油稀释200倍后点样，能得到更清晰的薄层色谱斑点。

对于豆蔻仁桉油精含量，本文在参考药典标准[4]的基础上，根据实际情况，对色谱条件及含量限度进行适当调整。豆蔻皮中的桉油精含量较低，不宜使用桉油精控制其质量。

对于杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分等检查项，以及浸出物测定法，因本文篇幅所限，将另文论述。