喜炎平注射液雾化吸入对小鼠祛痰抗炎作用研究

刘秀丽，王安娜，刘 博，陈世超，韩 冬

（吉林省中医药科学院，长春 130021）

喜炎平注射液是一种广谱抗病毒中成药，主要成分为穿心莲内酯、穿心莲新苷、脱水穿心莲内酯等。近来研究发现，其对一些病毒和细菌具有抑制作用，还可对抗内毒素，用于治疗急性上呼吸道感染、流感、手足口病、毛细支气管炎、疱疹性咽峡炎、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、病毒性脑炎等[1-11]。目前临床喜炎平雾化吸入给药能够有效改善临床症状，降低不良反应发生率。本研究通过小鼠祛痰实验、抗炎实验明确喜炎平注射液雾化吸入给药有效性。

1 材料与方法

1.1 材料 YLS-8B小动物雾化给药仪由济南益延科技发展有限公司提供，722可见分光光度计由上海精密科学仪器有限公司制造，EX-100A 由沈阳天平电子仪器厂制造。喜炎平注射液(江西青峰药业有限公司，批号20210130003)，吸入用乙酰半胱氨酸溶液（ZAMBON S.p.A，批号 28005190），地塞米松磷酸钠注射液（遂成药业股份有限公司，批号 22101031），苯酚红（天津市科密欧化学试剂有限公司，批号20180110），二甲苯（北京化工厂，批号20150111），0.9%氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司）。SPF级昆明种小鼠，体质量（20±2）g；由辽宁长生生物技术有限公司提供，合格证号SCXK（辽）2020-0001。

1.2 方法

1.2.1 小鼠气管酚红排泌试验 取小鼠50只，雌雄各半，随机均分为5组，分别为对照组（生理盐水组）、阳性药组吸入用乙酰半胱氨酸溶液0.39 mL/kg、喜炎平高剂量组5.2 mL/kg、喜炎平中剂量组2.6 mL/kg、喜炎平低剂量组1.3 mL/kg，每组每次雾化给药5 min，每日雾化1次，各组连续雾化给药5 d。末次给药30 min后，腹腔注射2.5 g/dL酚红生理盐水0.1 mL/10 g，0.5 h后脱颈处死，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分叉处的一段气管，放入盛有2 mL生理盐水的试管中浸洗0.5 h，再加1 mol/L NaOH 0.1 mL，用722型分光光度计在波长546 nm处测光密度（OD）值，A越大表示酚红排泌量越多，提示药物的祛痰作用越强。

1.2.2 小鼠二甲苯抗炎试验 昆明种雄鼠50只，随机均分成5组，即对照组（生理盐水组），阳性药组地塞米松磷酸钠注射液组0.26 mL/kg，喜炎平高剂量组5.2 mL/kg、喜炎平中剂量组2.6 mL/kg、喜炎平低剂量组1.3 mL/kg，每组每次雾化给药5 min，每日雾化1次，各组连续雾化给药5 d。末次给药后30 min，于每鼠左耳涂100%二甲苯40 μL致炎，右耳作对照，致炎15 min后，处死动物，用打孔器打下双耳同一部位，电子天平称重，肿胀值=左耳片重-右耳片重。

1.3 统计学分析 数据统计及分析运用SPSS 26.0进行处理，数据以均数±标准差（x±s）表示，各组之间运用单因素方差分析（onewayANOVA）的方法进行检验。

2 结果

2.1 祛痰实验小鼠气管酚红排泌试验 见表1。喜炎平注射液低剂量组与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），与阳性药组比较差异有统计学意义（P＜0.05），结果表明，喜炎平注射液低剂量组显著增加小鼠酚红排泌量，其效果优于吸入用乙酰半胱氨酸溶液。

表1 喜炎平注射液对小鼠气管酚红排泌量的影响（x±s）

2.2 小鼠二甲苯抗炎试验 见表2。阳性药组地塞米松磷酸钠注射液对抗二甲苯所引起的小鼠耳肿胀，肿胀值显著低于对照组（P＜0.05），喜炎平注射液各剂量组与对照组比较无明显差异。结果表明，喜炎平注射液雾化吸入给药对小鼠抗炎作用效果不明显。

表2 喜炎平注射液对小鼠二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（x±s）

3 结论

喜炎平注射液的主要活性成分17-氢-9-去氢穿心莲内酯、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-19-硫酸酯钠，体外实验结果17-氢-9-去氢穿心莲内酯、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-19-硫酸酯钠具有抗炎、抗病毒、抗菌活性[12]。试验表明喜炎平注射液雾化吸入给药有明确的祛痰作用，低剂量祛痰作用显著，效果明显优于临床中使用较多的吸入用乙酰半胱氨酸溶液，但抗炎作用效果不明显，与其他研究结果不同，考虑与动物对雾化气体耐受程度、吸入肺部的药物量、靶器官不同引起了拮抗作用所致。

喜炎平注射液雾化药物粒径分布显著影响药物沉积效率和药物在呼吸道的沉积位置，雾化吸入给药时最佳颗粒物粒径空气动力学直径应控制在1～5 μm[13]。其中4～5 μm的颗粒物主要沉积在主支气管和前端分支支气管[14]，而＜3 μm的颗粒物能够到达细末支气管和肺腺泡[15]，试验所用YLS-8B小动物雾化给药仪，仪器雾化粒子细度1～5 μm（占80%），能够确保喜炎平注射液有效到达小鼠肺部，保证试验可靠性。喜炎平注射液可以通过雾化吸入给药方式到达肺部（支气管、细支气管），并有部分在肺部沉降存留，吸入刺激性研究显示，试验期间无动物死亡、咳呛等异常表现；罗佳等研究表明喜炎平注射液各剂量组肺部组织病理学、主要组织检查、小鼠血液学指标、血清生化、脏器系数均无显著改变，初步认为其雾化吸入给药是安全可行的[16]。另有研究表明，喜炎平注射液系纯中药制剂，纯度高，对呼吸系统的刺激性较复方注射剂小。当吸入药物达到高浓度时，LDH活力系数大，细胞损伤加重，内容物大量释放所致。临床使用时，要注意给药剂量，避免肺损伤[17]。

目前喜炎平注射液雾化吸入虽属于超说明书用药，但临床应用较广，儿科呼吸系统疾病使用比例最大[18-21]，试验对喜炎平注射液的药效学进行了初步评价，后期将继续针对喜炎平注射液进行药效学评价，结合药代动力学对其组织分布特点及代谢产物进行分析，同时借助分子生物学手段，从分子、器官和整体动物水平对药理机制进行系统研究。