基于网络药理学探讨桂枝茯苓丸治疗子宫内膜异位症的作用机制

闫菲 史云 赵琦 王晓梅 高焕鹏 徐可 王亦姝 韩福国 刘清飞

摘要 目的：运用网络药理学研究方法探讨中医经典名方桂枝茯苓丸治疗子宫内膜异位症（EMS）的作用机制。方法：在TCMSP、BATMAN-TCM、TCMID中筛选桂枝茯苓丸的成分和靶点;并通过OMIM、GeneCards数据库检索EMS相关靶点;取交集后得到桂枝茯苓丸和子宫内膜异位症的共同靶点，利用Cytoscape 3.6.1构建化合物-靶点-疾病作用图;使用STRING网站完成蛋白质-蛋白质相互作用分析，通过David数据库完成基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。结果：共筛选出桂枝茯苓丸82个成分和962个预测靶点，子宫内膜异位症靶点1 158个;通过比对桂枝茯苓丸和EMS共同靶点，筛选出246个潜在基因;这些共同靶点涉及对化学物质反应、分子功能调节、信号受体结合等生物过程;生物学通路包括TNF、PI3K/AKT和MAPK信号通路等。结论：桂枝茯苓丸可能通过抑制血管生成、抗炎等途径对EMS产生治疗作用。

关键词 网络药理学;桂枝茯苓丸;子宫内膜异位症;成分-靶点-疾病

Abstract Objective：To explore the mechanism of action of Guizhi Fuling Pills，a classic traditional Chinese medicine，in the treatment of endometriosis（EMS） by using the method of network pharmacology.Methods：TCMSP，BATMAN-TCM and TCMID were used to obtain the components，and EMS targets of GP were predicted by OMIM and Gene Cards and literature review.Cytoscape 3.6.1 software was used to construct the “component-target-disease” network.The STRING website was used for the analysis of protein-to-protein interaction（PPI） data.DAVID 6.8 was used to carry on GO analysis and KEGG pathway analysis.Results：A total of 82 active ingredients and 962 potential targets of GP were obtained from TCMSP，BATMAN and TCM-ID，1158 EMS related targets were retrieved from the disease database.Then 246 common targets were obtained.Biological processes were related to reaction to chemicals，molecular function regulation，signal receptor binding，etc.The biological pathways mainly included TNF，PI3K/AKT，and MAPK signaling pathways.Conclusion：Guizhi Fuling Pills may treat endometriosis by inhibiting angiogenesis，anti-inflammatory and other biological pathways.

Keywords Network Pharmacology; Guizhi Fuling Pills; Endometriosis; Component-target-disease

中图分类号：R285文献标识码：A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2022.01.010

子宫内膜异位症（Endometriosis，EMS）定义为子宫内膜组织（腺体和间质）在子宫腔被覆内膜及子宫之外部位出现、生长、浸润、反复出血的一类多发于育龄期女性的常见疾病，表现为继发性痛经、月经紊乱、卵巢子宫内膜异位囊肿、不孕等症状[1]。由于人群样本和诊断方法存在差异，EMS的患病率不尽相同，据统计，在育龄期女性中患病率为10%～15%，其中36%～87%异位病灶位于卵巢，不孕率更是高达40%[2-3]。目前，有关EMS病因尚未阐明，现有手段主要包括药物、手术和辅助生殖等治疗方式。口服激素类药物可以改善患者临床症状，减低病灶活性，但不良反应多，停药后易复发;手术治疗可切除病灶，恢复盆腔解剖结构，但手术禁忌证多，适应人群范围窄;辅助生殖主要针对有生育要求但不具备自然受孕条件的患者群体。有临床研究显示，无论采用何种治疗方法，大约50%EMS患者的症状将会在5年内复发[4]。因此，寻找更有效的治疗EMS的措施以尽可能延缓病情和减少复发成为了妇科学研究领域重要的临床问题。

中医多根据EMS临床表现，将其归属于“痛经”“癥瘕”等范畴，该病以血瘀为主要病因病机，同时兼夹肾虚、气滞、寒凝、气虚等次要病因病机[5]。桂枝茯苓丸是仲景《金匮要略》中的经典方剂，主治妇女宿有癥块、妊娠胎动、漏下不止及瘀血所致的痛经、癥瘕痞块等症，现代临床多用于子宫内膜异位症、子宫肌瘤等的治疗，临床疗效显著[6-7]。临床研究证明桂枝茯苓丸能有效改善EMS患者盆腔疼痛症状，对盆腔包块及触痛结节等体征有明显改善作用[8-9];相关动物实验表明，桂枝茯苓丸对EMS大鼠性激素水平、血管生成、免疫功能均具有调节作用[10-11]。然而，有關桂枝茯苓丸治疗EMS的机制研究多仅为单一通路、单一机制研究，对其治疗EMS的主要组成成分和作用机制未能进行系统阐释。近年来，网络药理学凭借其能够系统整合药物“多成分-多靶点-多通路”的研究特征，能够很好结合药理机制、高通量测序和拓扑网络分析等，从而能全方位、多角度、全面化展示中药药理学作用的研究性质，成为研究中药药理的新兴学科[12-13]。因此，本研究将运用网络药理学方法探索桂枝茯苓丸治疗EMS的核心化学成分和内在药理作用，全面揭示其内在机制。

1 资料与方法

1.1 桂枝茯苓丸潜在化学成分及作用靶点筛选 桂枝茯苓丸内5种中药的化学成分将从中药系统药理学数据库与分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）、中药分子机制生物信息学分析工具（Bioinformatics Analysis Tool of Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine，BATMAN-TCM）、中药分子机制综合数据库（TCMID）中进行检索。一般认为，口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）≥30%和类药性（Drug Likeness，DL）≥0.18是化合物能否进入体内起效的核心指标。根据检索条件，将以上数据库预测成分合并，建立桂枝茯苓丸化合物-靶点数据集。

1.2 EMS疾病靶点筛选 EMS相关作用靶点将在在线人类孟德尔遗传数据库（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM，https：//www.omim.org/）和人类基因数据库（GeneCards，https：//www.genecards.org）中检索，检索关键词为“Endometriosis”，删除重复后合并数据集。将桂枝茯苓丸化合物对应靶点和EMS相关靶点取交集后，可得到桂枝茯苓丸和EMS共同靶点，并构建桂枝茯苓丸成分靶点-EMS疾病靶标映射关系，运用Cytoscape 3.6.1软件构建“成分-共同靶点”图，成分和靶点用“节点”表示，节点之间关系用“边”表示。

1.3 蛋白质-蛋白质相互作用网络构建 将共同靶点上传至STRING（https：//string-db.org/）在线数据库中，选择置信度分数score≥0.700（高置信度）为条件进行筛选，将无关联的节点进行隐藏，其他参数不变，得到共同靶点蛋白质-蛋白质相互作用（Protein-protein Interaction，PPI）网络图，并在Cytoscape软件中进行可视化展示。

1.4 基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析 David在线数据库是研究蛋白质功能的重要数据库，能够为多种基因及蛋白质提供功能注释信息。我们将共同靶点上传至David数据库进行基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）功能富集分析。GO分析能够注释基因功能，主要包括分子功能（Molecular Function，MF）、细胞组分（Cell Component，CC）和生物过程（Biological Process，BP）3种方式。KEGG分析主要根据最小二乘法计算得到目的蛋白在有关通路的富集结果。使用气泡图对GO和KEGG功能富集分析结果进行可视化展示。

2 结果

2.1 桂枝茯苓丸化学成分与作用靶点筛选 通过对TCMSP、BATMAN、TCMID数据库进行筛选，并结合文献筛选，最终得到桂枝茯苓丸潜在活性化合物82个，包括桂枝5个，茯苓18个，桃仁24个，赤芍31个，牡丹皮13个，共预测潜在靶点962个。

2.2 EMS潜在疾病靶点筛选 从OMIM、GeneCards疾病数据库检索EMS相關靶点，合并后得到EMS靶标1 158个。将化合物靶点和疾病靶标取交集后，最终获得AKT1、IL6、MMP9、VEGFR、MAPK8、TNF等246个潜在核心靶标。

2.3 “化合物-共同靶点”网络构建 将共同靶点及相关桂枝茯苓丸化合物相关关系导入Cytoscape，建立“成分-靶点-疾病”网络。见图1。用Degree表示网络中节点的中心性，Degree越高表示节点在网络中越重要。在本网络中，Quercetin（槲皮素）Degree为87，Kaempferol（山柰酚）为34，Baicalein（黄芩苷）为20，Beta-sitosterol（β-谷甾醇）为19，Dehydroeburicoic acid（去氢齿孔酸）为18，位于前5位。见表1。

2.4 PPI网络的构建 上传共同靶点至STRING在线平台，获得靶点之间的相互作用关系，并下载PPI.tsv，导入Cytoscape进行PPI展示。图中越靠近圆形中心Degree值越高，因此AKT1、TP53、EGF、VEGFR、IL6、TNF位于核心基因位置。见图2～3。

2.5 桂枝茯苓丸-EMS-基因的GO富集分析 GO富集分析结果显示桂枝茯苓丸-EMS-基因的BP显著富集在对含氧化合物的反应、对有机物质的反应、细胞对化学刺激的反应、细胞对有机化合物刺激的反应、对化学物质的反应;MF主要富集在信号受体结合、受体调节活性、受体配体活性、分子功能调节剂、酶结合上;CC主要富集在细胞外空间、细胞外区域、膜筏、膜微区、膜区域上。见图4～6。

2.6 桂枝茯苓丸-EMS-靶点KEGG分析 KEGG分析获得相关核心通路62条，通过查阅文献排除明确不相关富集结果，同时结合文献进行筛选，按P值排序挑选出重要性前20条信号通路使用气泡图展示。KEGG富集结果包括TNF、PI3K/AKT、Toll样受体、MAPK信号通路和凋亡相关信号通路等。见图7～8。富集前10位细节见表2。

3 讨论

3.1 桂枝茯苓丸组方分析 EMS是现代西医学病名，中医古籍中将其归属为“痛经”“癥瘕”“不孕症”等范畴。现代医家对本病理解虽略有不同，但总以血瘀为核心病因病机。桂枝茯苓丸出自《金匮要略》妇人病篇，原方主治妇人素有癥疾，而致妊娠胎动不安或漏下不止之症。全方共由5味中药组成，其中桂枝辛甘而温为君药，温通血脉行瘀滞，臣以桃仁活血化瘀破血结，加入一味牡丹皮，凉血祛瘀同时可清退瘀久所化之热，芍药缓急止痛以对症治疗，同时可柔肝理脾调气血，佐以茯苓淡渗下行利水湿，健脾益胃，以助消癥之功，丸以蜂蜜。全方寒温并用，有活血化瘀、缓消癥块之功用，对于瘀血阻滞胞宫之类病证，如子宫内膜异位症、痛经、子宫肌瘤等临床疗效显著[14]。

3.2 桂枝茯苓丸活性成分分析 通过分析得到桂枝茯苓丸治疗EMS的活性成分82个，包括槲皮素、山柰酚、黄芩苷、β-谷甾醇、二氢齿孔酸、茯苓酸、柳杉酚、藿香黄酮醇、鞣花酸、茯苓酸B等。槲皮素、山柰酚是主要的类黄酮醇类的功能性物质，有一定的抗炎、抑制血管增生的功效。有研究发现，槲皮素不仅可以诱导EMS模型大鼠的异位内膜萎缩[15-16]，还可以抑制异位症细胞End1/E6E7的增殖并诱导细胞周期阻滞，通过DNA断裂、线粒体膜电位损失和活性氧产生而促进细胞凋亡[17]。黄芩苷可以呈剂量依赖性地降低人体异位子宫内膜基质细胞的体外成活，并对细胞周期产生调控作用[18]。鞣花酸可以对体外子宫内膜间质细胞黏附、迁移和细胞周期均产生抑制作用。因此我们认为以上化合物是桂枝茯苓丸治疗EMS的重要活性成分[19]。

3.3 关键靶点分析 PPI分析得到前10位核心靶点包括VEGFA、IL6、MMP9、AKT1、MAPK8、PTGS2、INS、TNF。血管生成是EMS发病的关键步骤，新生血管的形成在EMS病变的形成和进展中具有基础性作用[20]。VEGFA是血管内皮生长因子VEGF家族的组成蛋白，在机体内复杂血管系统形成和血管稳态调控中具有关键作用。有临床研究表明，EMS患者腹腔液和异位病灶中的VEGFA水平显著高于正常组[21]。相关实验发现，使用高效孕激素——目前用于ENS治疗的一线药物，对腹腔移植有子宫内膜细胞的裸鼠进行干预后，异位组织VEGFA水平明显下降，病灶中微血管密度也显著下降[22]。EMS是一种具有免疫相关的慢性炎症性疾病，子宫内膜中的炎症环境和异常免疫应答被认为在内膜病变的发生和进展中起到重要作用，尤其是子宫内膜细胞与巨噬细胞之间的分子交流，免疫反应调节因子IL-6就被认为是其中重要的炎症介质[23-25]。EMS患者原代子宫内膜细胞的体外培养中的炎症介质分泌浓度显著高于非EMS患者，其中IL-6的表达含量更是与培养体系中的细胞数量强相关[26]。基质金属蛋白酶（MMPs）和金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）是细胞外基质合成和降解调节中的2个重要因子，其中又以MMP-9及其抑制剂TIMP-1最为重要，正常生理条件下二者以一定比例存在于子宫内膜组织中，而相关临床报道发现，EMS患者异位子宫内膜里MMP/TIMP系统处于失衡状态，失衡程度与疾病进展及分期密切相关[27]。在EMS大鼠模型中也可以发现，相对于正常子宫内膜，异位内膜病灶表现出更强的细胞分化、增殖及组织侵袭能力，进行免疫荧光检测证实病灶中的MMP-9、TIMP-1的荧光强度也显著高于正常子宫内膜[28]。

3.4 核心信号通路分析 通过查阅文献，发现KEGG富集结果中TNF、PI3K/AKT、Toll样受体、MAPK信号通路和凋亡相关信号通路等与EMS密切相关。EMS是一类复杂的免疫炎症性疾病，越来越多的研究证明，EMS相关性不孕与盆腔的炎症微环境导致的卵巢排卵失常密切相关，而TNF信号通路是核心炎症信号通路。有临床研究发现，ENS相关性不孕患者与非EMS相关性不孕患者比较，腹腔液中的TNF-α及其他炎症介质显著升高[29-30]。运用全基因组技术对EMS模型大鼠及正常对照组的卵巢对比分析，发现腹膜液中的TNF-α可以通过影响卵巢早期生长因子EGR1的表达而影响排卵，继而导致不孕[31]。PI3K/AKT信號通路是体内重要通路，能够调节多种生物过程如凋亡、增殖、自噬、血管生成、代谢等[32]。相关研究证明，PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达与EMS的进展分期、相关坐骨神经痛密切相关[33-34]，改变PI3K/AKT通路可以对子宫内膜间质细胞的上皮细胞-间充质转化（EMT）、子宫内膜细胞ESC的增殖和侵袭过程产生重要影响[35-36]。某些相关单体如萝卜硫素、人参皂苷Rg3的使用，更是可以通过调控PI3K/AKT信号通路诱导异位内膜细胞的凋亡、抑制病灶扩长、粘连和血管生成，进而减缓病程进展[37-38]。EMS作为一类激素依赖性的慢性炎症性疾病，子宫内膜细胞向腹膜表面的迁移过程可受到雌激素、各类生长因子及细胞内信号级联反应通路的快速激活，被认为是腹膜型及卵巢EMS发生的关键[39]。MAPK信号通路可以被多种类固醇激素和生长因子激活，在基因表达、细胞增殖、凋亡、恶变及浸润转移中起到重要作用，由于其在性激素及炎症之间的特殊调节作用，使其在EMS病变研究中越来越重要[40-41]。相关研究发现，雌二醇（E2）可以激活MAPK信号通路，使得EMS患者腹膜液中某些趋化蛋白如CCL2（一种具有趋化作用并激活单核细胞核巨噬细胞的特异性因子）的生成明显高于正常组，进而影响异位细胞的成活、增殖及侵袭功能，继而影响EMS的发病进展[42]。此外，MAPK信号通路还参与了EMS相关性盆腔痛，在疼痛的敏感性中起到重要作用[43]。

综上所述，桂枝茯苓丸治疗EMS的内在作用机制可能与血管生成、炎症反应和细胞信号转导等途径相关。本研究运用网络药理学方法，从多层面、多角度对桂枝茯苓丸治疗EMS内在机制进行了初步探索，今后还需借助动物与细胞实验对桂枝茯苓丸治疗EMS的化学成分和内在机制进行深入研究，为临床应用提供更重要的证据支持。

参考文献

[1]中国医师协会妇产科医师分会，中华医学会妇产科学分会子宫内膜异位症协作组.子宫内膜异位症诊治指南（第三版）[J].中华妇产科杂志，2021，56（12）：812-824.

[2]Zondervan KT，Becker CM，Missmer SA.Endometriosis[J].N Engl J Med，2020，382（13）：1244-1256.

[3]武梅，程雯，张丹英，等.子宫内膜异位症中医证型研究进展[J].中华中医药杂志，2019，34（1）：253-255.

[4]李春杏，刘桦.子宫内膜异位症治疗新药恶拉戈利的药理作用与临床评价[J].中国新药杂志，2019，28（11）：1303-1306.

[5]李紅，王东梅.中医药治疗子宫内膜异位症的研究进展[J].海南医学院学报，2021，27（1）：71-74.

[6]任艳青，成秀梅，方惠敏，等.基于调控HIF-1α表达探讨温经汤改善大鼠子宫内膜异位症的机制[J].中国实验方剂学杂志，2020，26（23）：63-70.

[7]张永涛，赵凤荣，刘文文，等.米非司酮联合桂枝茯苓丸治疗子宫内膜异位症的临床效果分析[J].现代生物医学进展，2017，17（19）：3703-3706.

[8]陈丽琼.桂枝茯苓丸联合GnRH类似物对子宫内膜异位病灶内细胞增殖、侵袭及MEK/ERK通路的影响[J].海南医学院学报，2017，23（19）：2683-2685，2689.

[9]陈芳，宋昳星，王芳.桂枝茯苓丸对子宫内膜异位患者细胞外调节蛋白激酶和性激素的调节作用[J].实用临床医药杂志，2017，21（13）：72-75，87.

[10]刘泽滨，林立鹏，晁艳，等.桂枝茯苓丸对子宫内膜异位症大鼠血清免疫球蛋白和炎症因子水平的影响[J].国际检验医学杂志，2018，39（16）：1955-1957.

[11]林立鹏，刘泽滨，吴晓宾.桂枝茯苓丸对大鼠子宫内膜异位症血管生成的抑制作用及机制研究[J].现代医院，2018，18（5）：725-727.

[12]Zhang R，Zhu X，Bai H，et al.Network Pharmacology Databases for Traditional Chinese Medicine：Review and Assessment[J].Front Pharmacol，2019，10：123.

[13]世界中医药学会联合会.网络药理学评价方法指南[J].世界中医药，2021，16（4）：527-532.

[14]李晓霞，徐旭，马会霞，等.经典名方桂枝茯苓丸的临床和实验研究进展[J].药物评价研究，2018，41（9）：1724-1729.

[15]张曦，王鑫，王红静，等.槲皮素对子宫内膜异位症的抑制作用及机理探讨[J].四川大学学报：医学版，2009，40（2）：228-231，244.

[16]Cao Y，Zhuang MF，Yang Y，et al.Preliminary study of quercetin affecting the hypothalamic-pituitary-gonadal axis on rat endometriosis model[J].Evid Based Complement Alternat Med，2014，2014：781684.

[17]Park S，Lim W，Bazer FW，et al.Quercetin inhibits proliferation of endometriosis regulating cyclin D1 and its target microRNAs in vitro and in vivo[J].J Nutr Biochem，2019，63：87-100.

[18]Jin Z，Huang J，Zhu Z.Baicalein reduces endometriosis by suppressing the viability of human endometrial stromal cells through the nuclear factor-κB pathway in vitro[J].Exp Ther Med，2017，14（4）：2992-2998.

[19]Mc Cormack BA，Bilotas MA，Madanes D，et al.Potential use of ellagic acid for endometriosis treatment：its effect on a human endometrial cell cycle，adhesion and migration[J].Food Funct，2020，11（5）：4605-4614.

[20]Yerlikaya G，Balendran S，Prstling K，et al.Comprehensive study of angiogenic factors in women with endometriosis compared to women without endometriosis[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol，2016，204：88-98.

[21]Danastas K，Miller EJ，Hey-Cunningham AJ，et al.Expression of vascular endothelial growth factor A isoforms is dysregulated in women with endometriosis[J].Reprod Fertil Dev，2018，30（4）：651-657.

[22]Mnckedieck V，Sannecke C，Husen B，et al.Progestins inhibit expression of MMPs and of angiogenic factors in human ectopic endometrial lesions in a mouse model[J].Mol Hum Reprod，2009，15（10）：633-643.

[23]Woo JH，Yang YI，Ahn JH，et al.Interleukin 6 secretion from alternatively activated macrophages promotes the migration of endometriotic epithelial cells[J].Biol Reprod，2017，97（5）：660-670.

[24]Kitawaki J，Kiyomizu M，Obayashi H，et al.Synergistic effect of interleukin-6 promoter（IL6-634C/G） and intercellular adhesion molecule-1（ICAM-1 469K/E） gene polymorphisms on the risk of endometriosis in Japanese women[J].Am J Reprod Immunol，2006，56（4）：267-274.

[25]Grandi G，Mueller MD，Bersinger NA，et al.The association between progestins，nuclear receptors expression and inflammation in endometrial stromal cells from women with endometriosis[J].Gynecol Endocrinol，2017，33（9）：712-715.

[26]Luckow Invitti A，Schor E，Martins Parreira R，et al.Inflammatory cytokine profile of co-cultivated primary cells from the endometrium of women with and without endometriosis[J].Mol Med Rep，2018，18（2）：1287-1296.

[27]Mabrouk M，Elmakky A，Caramelli E，et al.Performance of peripheral（serum and molecular） blood markers for diagnosis of endometriosis[J].Arch Gynecol Obstet，2012，285（5）：1307-1312.

[28]Brando V，Meola J，Garcia SB，et al.Increased Expression Levels of Metalloprotease，Tissue Inhibitor of Metalloprotease，Metallothionein，and p63 in Ectopic Endometrium：An Animal Experimental Study[J].Rev Bras Ginecol Obstet，2018，40（11）：705-712.

[29]Wang XM，Ma ZY，Song N.Inflammatory cytokines IL-6，IL-10，IL-13，TNF-α and peritoneal fluid flora were associated with infertility in patients with endometriosis[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2018，22（9）：2513-2518.

[30]Tao Y，Zhang Q，Huang W，et al.The peritoneal leptin，MCP-1 and TNF-α in the pathogenesis of endometriosis-associated infertility[J].Am J Reprod Immunol，2011，65（4）：403-406.

[31]Birt JA，Nabli H，Stilley JA，et al.Elevated peritoneal fluid TNF-α incites ovarian early growth response factor 1 expression and downstream protease mediators：a correlation with ovulatory dysfunction in endometriosis[J].Reprod Sci，2013，20（5）：514-523.

[32]Makker A，Goel MM，Mahdi AA.PI3K/PTEN/Akt and TSC/mTOR signaling pathways，ovarian dysfunction，and infertility：an update[J].J Mol Endocrinol，2014，53（3）：R103-118.

[33]Madanes D，Bilotas MA，Bastón JI，et al.PI3K/AKT pathway is altered in the endometriosis patient′s endometrium and presents differences according to severity stage[J].Gynecol Endocrinol，2020，36（5）：436-440.

[34]Liu Y，Qin X，Lu X，et al.Effects of inhibiting the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway on the pain of sciatic endometriosis in a rat model[J].Can J Physiol Pharmacol，2019，97（10）：963-970.

[35]Liu Y，Lu C，Fan L，et al.MiR-199a-5p Targets ZEB1 to Inhibit the Epithelial-Mesenchymal Transition of Ovarian Ectopic Endometrial Stromal Cells Via PI3K/Akt/mTOR Signal Pathway In Vitro and In Vivo[J].Reprod Sci，2020，27（1）：110-118.

[36]Diao R，Wei W，Zhao J，et al.CCL19/CCR7 contributes to the pathogenesis of endometriosis via PI3K/Akt pathway by regulating the proliferation and invasion of ESCs[J].Am J Reprod Immunol，2017，78（5）：e12744.

[37]Cao Y，Ye Q，Zhuang M，et al.Ginsenoside Rg3 inhibits angiogenesis in a rat model of endometriosis through the VEGFR-2-mediated PI3K/Akt/mTOR signaling pathway[J].PLoS One，2017，12（11）：e0186520.

[38]Zhou A，Hong Y，Lv Y.Sulforaphane Attenuates Endometriosis in Rat Models Through Inhibiting PI3K/Akt Signaling Pathway[J].Dose Response，2019，17（2）：1559325819855538.

[39]Makker A，Goel MM，Das V，et al.PI3K-Akt-mTOR and MAPK signaling pathways in polycystic ovarian syndrome，uterine leiomyomas and endometriosis：an update[J].Gynecol Endocrinol，2012，28（3）：175-181.

[40]徐歡欢，柯丽娜，陈琴华，等.紫草素抗妇科恶性肿瘤作用机制的研究进展[J].中成药，2020，42（10）：2687-2690.

[41]周卫东，陈琼华，陈清西.p38 MAPK及其抑制剂在子宫内膜异位症中的作用[J].药学学报，2010，45（5）：548-554.

[42]Li MQ，Li HP，Meng YH，et al.Chemokine CCL2 enhances survival and invasiveness of endometrial stromal cells in an autocrine manner by activating Akt and MAPK/Erk1/2 signal pathway[J].Fertil Steril，2012，97（4）：919-929.

[43]Liu Z，Yi L，Du M，et al.Overexpression of TGF-β enhances the migration and invasive ability of ectopic endometrial cells via ERK/MAPK signaling pathway[J].Exp Ther Med，2019，17（6）：4457-4464.

（2020-08-23收稿 本文编辑：魏庆双）