儿童重症肌无力相关抗体检测及其临床意义

王蕊艳，陈辉，黄志新，钟建民

（江西省儿童医院神经内科，南昌 330006）

重症肌无力（Myasthenia Gravis，MG）为临床上较为常见的机体免疫性疾病，其是由相关免疫抗体介导的肌肉神经突触在传递过程中发生障碍导致的一类疾病[1]。临床主要表现为晨轻暮重、休息后减轻、活动后加重，有些患者胸部CT检查时发现有胸腺瘤或胸腺增生，血清检查AchR抗体滴度有明显升高，并对其肢体骨骼肌群、延髓及眼部产生严重影响[2-3]。儿童重症肌无力相较于成人有众多不同之处，成人平均发病率为8.0～20.0/10万人[4]，在40岁之前，女性发病率高于男性，40～50岁男女发病率相当，50岁之后，男性发病率略高于女性；儿童发病率约0.3-2.8/10万[5]，起病年龄较小（新生儿即可发病），1～5岁居多，无显著的性别差异，儿童合并胸腺瘤或胸腺增生少见，以眼肌型多见[6-7]。不同地域儿童其发病率也有较大差异，中国大陆的儿童期重症肌无力的发病率及重症比例不仅远远高于美国、欧洲和非洲等国家，也高于同为亚洲的日本和台湾等其他国家和地区[8]。重症肌无力发病机制与抗体有关[9]，如肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(MuSK-Ab)、乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)、兰尼碱受体抗体(RyR-Ab)、连接素抗体(Titin-Ab)等。自身抗体在MG的发病机制中起了很重要的作用，其与MG的发病年龄、性别、地域差异、临床分型、治疗及预后相关，因此抗体检测是诊断中的重要项目[10]。基于此，本研究对重症肌无力患儿的MuSKAb、AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab水平进行检测，并探讨上述抗体的临床意义，报道如下。

1 临床资料和方法

1.1 临床资料 选取我院2018年1月~2021年7月期间就诊的重症肌无力患儿88例为研究对象。纳入标准：诊断与患儿重症肌无力诊断标准[11]相符，新斯的明和疲劳试验都呈阳性；AChR-Ab试验呈阳性；胸部MR或CT检查发现有胸腺肿瘤或胸腺肥大者；单纤维肌电图项目检查时Jitter不小于55μs或肌电图呈衰减效应（多次刺激），或阻滞；年龄低于18岁，性别不限；临床资料完整者；知悉本研究内容，且签定知情同意书。排除标准：合并严重肝、肺、肾、心等重要器官功能疾病者；其他原因导致的肌肉神经损伤者；年龄大于18岁；临床资料不完整者。本研究通过我院伦理委员会审批。

1.2 方法 所选患者均于清晨空腹抽取4 mL外周血置于抗凝管中，经离心机离心后，取上清液后放置在-80℃备用。以酶联免疫分析法对MuSK-Ab、AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指标进行检测，抗AchR抗体酶联吸附检测试剂盒由英国RYR公司提供、抗Titin抗体与抗Musk抗体酶联吸附检测试剂盒均由德国AESKU.GROUP公司提供、抗RYR抗体酶联吸附检测试剂盒由武汉基因美科技有限公司提供，检测过程严格以说明书上步骤进行。结果判定标准：MuSK-Ab：样本滴度值≥15 U/mL（阳性）；AChR-Ab：样本滴度值≥0.45 nmol（阳性）；RyR-Ab：样本OD值≥临界值（阳性）；Titin-Ab：样本OD值≥15 U/mL（阳性）。

1.3 分型标准 以Ossermen改良法分为：I型(眼肌型)病变仅在眼外肌受累；II型(全身型)表现为眼、肢体和面肌无力或全身无力合并咽喉肌无力（球麻痹）；III型(暴发型)患者突发全身无力，并发生肌无力现象；IV型(迟缓型)病程较为反复，发病时间在2年以上，是由I型或II型缓慢发展而来；V型（肌萎缩型）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 24.0对检测数据进行分析，计数资料以[n（%）]表示，组间比较以χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床资料 本研究中重症肌无力患儿88例，男34例（38.64%），女54例（61.36%），平均年龄为（5.61±1.35）岁，病程在2个月~6年，平均病程为（3.22±0.21）年，BMI为（22.34±1.52）kg/m2。患儿合并发生甲亢5例（5.68%）

2.2 患儿发病年龄及临床分型 88例患儿中年龄在5岁以下患儿43例（48.86%），年龄在5~10岁患儿有35例（39.77%），10~18岁患儿有10例（11.36%）。根据Osserman分型将88例患儿分为Ⅰ型81例（92.05%），Ⅱ~Ⅲ型7例（7.95%）。

2.3 患儿外周血相关抗体检查结果 88例患儿所检测抗体结果：MuSK-Ab滴度最低值＜0.01 U/mL，最高值11.23 U/mL，均为阴性（＜15 U/mL）；AChRAb样本滴度值最低值＜0.01 nmol，最高值＞20.00 nmol，其中≥0.45 nmol定为阳性；RyR-Ab样本OD值≥临界值（阳性）；Titin-Ab低度最低值＜0.01 U/mL，最高值18.51 U/mL，其中≥15 U/mL定为（阳性），观察任一抗体阳性的患儿63例（71.59%），其中单纯AChR-Ab阳性病例数为57例（64.77%）、RyR-Ab阳性29例（32.95%）、Titin-Ab阳性9例（10.23%），88例患儿中MuSK-Ab指标均为阴性，Ⅰ型分型患儿的AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指标呈阳性的人数明显高于Ⅱ~Ⅲ型患儿，但Ⅰ型分型患儿在AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指标的阳性率明显低于Ⅱ~Ⅲ型患儿，对比差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 患儿外周血相关免疫指标检查结果

2.4 患儿外周血抗体合并阳性情况 88例患儿中AChR-Ab+RyR-Ab+Titin-Ab 3种免疫抗体均为阳性患儿6例（6.82%）、AChR-Ab+RyR-Ab 2种免疫抗体为阳性患儿12例（13.64%）、RyR-Ab+Titin-Ab 2种免疫抗体为阳性患儿1例（1.14%）、AChRAb+Titin-Ab 2种免疫抗体为阳性患儿1例（1.14%）。患儿合并2种免疫抗体阳性率与合并3种免疫抗体阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），而患儿合并AChR-Ab+RyR-Ab的阳性率明显高于单一RyR-Ab+Titin-Ab和AChR-Ab+Titin-Ab，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 患儿外周血免疫抗体合并阳性情况

3 讨论

重症肌无力主要累及患者的肌肉神经接头突触后膜，造成肌肉神经介质传递发生异常，其临床症状多为易疲劳，可累及眼外肌、延髓肌群及全身骨骼肌，病情严重者会出现肌无力危象，对患者的生命健康造成严重威胁[12-13]。此病病因及发病机制较为复杂，发病机制可能由遗传及环境多种因素相互作用导致的[14]。有研究证实[15-16]，此病的主要发病机制为患者机体内分泌的AChR-Ab，其在特殊情况下和乙酰胆碱受体互相结合，进而阻断了神经-肌肉接头处信号传导而引发重症肌无力的发生。

据文献报道[17]，18周岁以上人群患病率为8~20/10万[5]，女性患者年龄在40岁前，其发病率高于男性，而40~50岁期间，男女患病比例相当，但在50岁以后，男性患病率明显高于女性，但儿童肌无力发病情况与成人略有不同。本研究结果显示，88例患儿中男性34例（38.64%），女54例（61.36%），女性高于男性，发病年龄在5岁以下患儿43例（48.86%），5~10岁患儿有35例（39.77%），10~18岁患儿有10例（11.36%），说明重症肌无力患儿集中在10岁以下儿童，尤其5岁以下儿童发病率最高，与肖君等[18]研究结果一致，我国儿童重症肌无力的发病年龄较低，将近半数比例为5岁以下。也有研究证实[19]日本重症肌无力患儿的发病年龄在5岁前也是发病高峰期，但发病率远低于我国。

本研究结果显示，根据Osserman分型将88例患儿分为Ⅰ型81例（92.05%），Ⅱ~Ⅲ型7例（7.95%），抗体阳性的患儿63例（71.59%），88例患儿中MuSK-Ab指标均为阴性，Ⅰ型分型患儿的AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指标呈阳性的人数明显高于Ⅱ~Ⅲ型患儿，但Ⅰ型分型患儿在AChRAb、RyR-Ab、Titin-Ab指标的阳性率明显低于Ⅱ~Ⅲ型患儿（P＜0.05），与既往研究[20]结果相符，患者的病情越严重，抗体阳性率越高。本研究结果显示，患儿合并2种免疫指标阳性率与合并3种免疫指标阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明患儿合并发生2种免疫指标阳性率与患儿合并发生3种免疫指标阳性率差异性不大，而患儿合并AChR-Ab+RyR-Ab的阳性率明显高于单一RyR-Ab+Titin-Ab和AChR-Ab+Titin-Ab（P<0.05），是否具有临床意义需要进一步研究。

综上所述，血清抗体检测是诊断MG的主要方式，联合检测可降低因单项检测出现的漏诊和误诊；同时可作为判断患者病情严重程度的指标，为临床进一步开展针对性治疗提供重要依据。