气相色谱-质谱法测定新会陈皮中甲氨基苯甲酸甲酯含量

◎ 高绮倩

（广东省江门市质量计量监督检测所，广东 江门 529000）

陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮。药材分为陈皮和广陈皮，其中广陈皮中又以新会陈皮独居道地药材特色，是广陈皮的上品[1-2]。研究表明，陈皮所含的化学成分较多，其中以黄酮类成分为主，此外还含有柠檬苦素类、生物碱类及挥发油类等。广陈皮和新会陈皮在化学成分如黄酮类、生物碱类、挥发油类的种类和含量略有差异[3]。在挥发油中，新会陈皮含有含量较高的2-甲氨基苯甲酸甲酯成分，与其他产地的陈皮区分显著[4-5]。但陈皮挥发油的提取耗时较长，且其中的2-甲氨基苯甲酸甲酯的含量并不能直观体现新会陈皮中的含量。因此，建立直接测定新会陈皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯含量的方法，具有较大的实际意义。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

气相色谱质谱联用仪：GCMS-QP2010，岛津；2-甲氨基苯甲酸甲酯：5 g，95.0%，CAS 号为85-91-6，上海安谱；无水乙醇：色谱纯，德国CNW。

1.2 仪器条件

1.2.1 色谱条件

SH-I-5Sil MS 石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度：250 ℃；升温程序：初始柱温130 ℃，保持4 min；以20 ℃·min-1升温至280 ℃，保持5 min；载气：氦气（纯度99.99%）。

1.2.2 质谱条件

电离方式：电子轰击电离源（EI）；电离能量0.3 kV；接口温度：250 ℃；离子源温度：230 ℃；选择离子监测模式（SIM）；保留时间：6.33 min；定性离子（m/z）：165、105、104、132；定量离子（m/z）：165；溶剂延迟：2.5 min。

1.3 标准溶液的配制

准确称取0.052 6 g 2-甲氨基苯甲酸甲酯，用无水乙醇溶解并定容于50 mL 容量瓶中，配制成1 000 mg·L-1标准储备溶液，于4 ℃冰箱中避光保存。使用前根据需要稀释成所需浓度的系列标准溶液。

1.4 试样的制备与处理

1.4.1 试样的制备

取约100 g样品，经粉碎后过二号筛（孔径0.85 mm，24 目），混匀后装入密封袋待用。

1.4.2 试样的处理

准确称取1.0 g 试样于250 mL 具塞碘量瓶中，加入100 mL 无水乙醇，涡旋混匀1 min，超声提取30 min，上清液用慢速滤纸过滤。吸取过滤后的试液2.00 mL于10 mL 容量瓶中，加入无水乙醇至刻度，摇匀后上机测定。

1.5 样品的测定

将试样溶液注入气相色谱质谱仪，得到2-甲氨基苯甲酸甲酯的定量离子（m/z）165 的峰面积，根据浓度绘制外标法标准曲线，结合前处理稀释倍数，得出样品中2-甲氨基苯甲酸甲酯的含量。离子相同保留时间的相对偏差不大于0.5%，定性离子各离子丰度与标准品相差不大于20%，可定性确证目标物。

2 结果与分析

2.1 提取溶剂的选择

2-甲氨基苯甲酸甲酯几乎不溶于水和甘油，溶于大多数挥发性油、乙醇等。本研究以实验室常用的甲醇、乙醇和正己烷作为样品提取溶剂，结果表明，各提取溶剂的提取效果相近，均可满足分析要求。根据实际条件和操作安全，本研究选择乙醇作为样品提取溶剂。

2.2 色谱条件的选择

新会陈皮的化学成分以黄酮类为主，还含有柠檬苦素类、生物碱类及挥发油类等。2-甲氨基苯甲酸甲酯的沸点为252.4 ℃，性质较稳定，可选择较高的进样口温度，采取分流进样。新会陈皮成分复杂，需要通过程序升温分离目标物与杂质。选用SH-I-5Sil MS石英毛细管色谱柱，优化条件后得到较理想的分离效果，如图1 所示。

图1 新会陈皮样品的选择离子质量色谱图

2.3 质谱选择离子监测

为了减少干扰，提高方法选择性和灵敏度，采用选择离子监测模式（SIM），如图2 所示，2-甲氨基苯甲酸甲酯的质谱图中，强度较高的峰为m/z165、105、104、132，选取高质量端的4 个离子进行测定：m/z165（基峰，100%），m/z105（分子离子峰，相对丰度98.16%），m/z104（相对丰度82.54%），m/z132（相对丰度52.02%）。新会陈皮样品的选择离子质量色谱图见图1。目标物峰的峰形较好，附近干扰峰少，测定结果准确度高。

图2 2-甲氨基苯甲酸甲酯标样的质谱图

2.4 检出限和检测范围

取1.3 项下配制的2-甲氨基苯甲酸甲酯标准溶液稀释成浓度为0.05 mg·L-1、0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、1.50 mg·L-1和2.00 mg·L-1的系列标准工作溶液，进行GC-MS/SIM 分析。以基峰离子m/z165 的峰面积（Y）和标准点的浓度（X）作定量标准曲线，线性方程为y=17 772.3x，相关系数R2=0.999 4，2-甲氨基苯甲酸甲酯在0.05 ～2.00 mg·L-1线性关系良好。结合样品处理的稀释倍数，以3 倍信噪比计算得方法检出限为0.82 mg·kg-1，以10 倍信噪比计算得定量限为270 mg·kg-1。

2.5 精密度与回收率试验

取一款不含2-甲氨基苯甲酸甲酯的柑橘皮样品，分别加入不同浓度的标准溶液，按试验方法进行回收率试验。每个水平浓度重复测定7 次，考察方法的精密度，结果见表1。结果表明，2-甲氨基苯甲酸甲酯的平均加标回收率为92.8%～98.5%，相对标准偏差为0.24%～0.46%。表明本法具有良好的准确度和精密度。

表1 2-甲氨基苯甲酸甲酯加标回收率与精密度试验结果表（n=7）

2.6 实际样品分析

根据本法确定的试验条件对市售的7 个新会陈皮样品进行测定，2-甲氨基苯甲酸甲酯的检测结果 分 别 为536 mg·kg-1、287 mg·kg-1、446 mg·kg-1、651 mg·kg-1、840 mg·kg-1、597 mg·kg-1和383 mg·kg-1。对市售的云南蜜桔、巴西柑的果皮晒干后进行测定，均未检出2-甲氨基苯甲酸甲酯。

3 结论

本研究建立了快速测定新会陈皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯的气相色谱-质谱分析方法。该方法稳定可靠，灵敏度高，操作简单，适用于新会陈皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯的定性定量分析，有利于新会陈皮的质量指标鉴别与评价，完善相关验收标准。