术前TACE治疗对肝癌患者黏着斑激酶、核因子-κBp65表达及术后生存率的影响

原发性肝癌是世界上发病率最高的恶性肿瘤之一，在我国是排第4位 的常见恶性肿瘤，肿瘤致死病因排第2位，严重威胁人民的健康和生命

。肝细胞癌(HCC)占原发性肝癌的85%～90%

，手术切除是肝癌的首选治疗方法，但由于本病起病隐匿，发现时多为中晚期，80%～90%的患者就诊时就已失去了手术切除的机会

。即使可以手术的患者，其远期疗效差，患者3年复发率高达50%、5年复发率高达70%

。经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)是目前公认的中晚期肝癌的首选治疗方法，能够有效延长患者的生存时间，提高生命质量

。黏着斑激酶( FAK)是蛋白质酪氨酸激酶中的一个家族，近年来大量研究表明，FAK在多数肿瘤中高表达，尤其是在消化道肿瘤中，其活性与肿瘤的转移、 侵袭密切相关，可作为肿瘤诊疗、预后的评价指标

。激活核因子-κB(NF-κB)是一种广泛存在于哺乳动物中的转录因子，有研究表明，NF-κBp65的持续活化可促进肿瘤细胞的增殖，减弱肿瘤细胞的凋亡，在肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用

。本研究选择在原发性肝癌患者手术切除治疗前行TACE治疗的患者作为研究对象，收集患者术后病理标本，检测癌组织中FAK和NF-κBp65的表达，探究FAK、NF-κBp65表达与患者3年生存率间的关联。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2015年6月至2017年6月我院收治的在手术切除治疗前行TACE治疗的原发性肝癌患者56例作为研究对象。术前接受TCAE治疗的患者均因病灶位置及大小、肺功能障碍或高龄等原因不能直接手术切除。所有患者接受TACE治疗后行手术切除治疗，收集患者手术切除的癌组织及癌旁组织，癌旁组织距离肿瘤边缘2～5 cm。出院后对所有患者进行3年的随访，记录患者的生存状况。本研究已经本院医学伦理委员会审查通过。

1.2 方法 所有患者入院后均行TACE治疗，TACE治疗后2个月内行手术切除治疗。手术中收集患者癌组织标本，检测标本中FAK、NF-κBp65蛋白的表达。

1.3 结果判断 FAK、NF-κBp65主要位于细胞质，出现棕黄色颗粒为阳性细胞。每张切片随机观察5个高倍镜(×400)视野，根据阳性细胞数的百分数进行判定，阳性细胞<10%为阴性，阳性细胞数10%～50%为弱阳性，阳性细胞数>50%为强阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0进行统计学处理，计量资料采用(均数±标准差)表示，组间差异采用

检验；计数资料用率表示，组间差异采用χ

检验。随访结束，以患者是否死亡作为试验终点，采用Cox回归分析影响患者3年死亡的独立危险因素。

<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫组织化学结果 FAK在癌组织、癌旁组织以及正常肝组织的阳性率分别为75.0%(42/56)、41.07%(23/56)、10.71%(6/56)；NF-κBp65在癌组织、癌旁组织以及正常肝组织的阳性率分别为78.57%(44/56)、33.93%(19/56)、12.5%(7/56)，癌组织中FAK、NF-κBp65阳性表达率均显著高于癌旁组织。

2.3 癌组织NF-κBp65表达与一般临床资料间的关系 根据NF-kBp65表达情况，NF-kBp65表达阳性的患者，肝内转移、门静脉癌栓者所占比例显著高于NF-kBp65表达阴性患者；NF-kBp65表达阳性患者中，Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ、TNM分级Ⅲ～Ⅳ所占比例显著大于NF-kBp65表达阴性患者，差异具有统计学意义。NF-kBp65表达与患者的年龄、性别无关，见表2。

本次检测期间，天气晴朗，气温35℃左右，由于混凝土中钢筋吸收探地雷达电磁波脉冲信号，返回信息较弱，对测量数据造成一定干扰。

2.2 癌组织FAK表达与一般临床资料间的关系 根据FAK表达情况，FAK表达阳性患者，肝内转移、门静脉癌栓所占比例显著显著高于FAK表达阴性患者；FAK表达阳性患者中，Edmondson 分级Ⅲ～Ⅳ、TNM分级Ⅲ～Ⅳ所占比例显著大于FAK表达阴性患者，差异具有统计学意义。FAK表达与患者的年龄、性别比无关，见表1。

科恩于1922年出生在纽约市。他的父母均为法律专业人士，然而科恩在纽约市立学院求学时却选择了物理，并于1940年毕业。他在哥伦比亚大学获得了硕士学位，之后在1943年应召入伍，在医疗部队做研究工作。1945年，他被派往广岛，研究这座城市被投放原子弹后遭受的影响。

后期疫情防治工作的重点。商品活猪调运仍旧严格限制，严格管理调运车辆，查处生猪违规交易和违规跨省外调；防控境外疫情再次传入；保障区域猪肉供给；完善问责制度。

肝癌患者在行手术切除治疗前进行TACE治疗可有效提高患者的生存率，有研究表明，术前行TACE治疗后手术切除的原发性肝癌患者，癌组织中FAK、NF-κBp65表达阳性率显著提高，但FAK、NF-κBp65表达与患者的生存预后间的关联目前尚缺乏相关研究证明

。本研究通过检测癌组织FAK、NF-κBp65的表达情况，进一步分析了其与患者3年生存率间的关联。

政府认为20%～22%的核电份额目标是能够实现的，但需要满足三个前提条件：30台机组重启，2台在建机组按计划投运，以及允许在运机组延寿20年，即将运行寿期从最初的40年延长到60年。

3 讨论

2.4 影响患者3年生存率的独立危险因素 根据患者术后3年是否存活，采用多因素Cox回归分析影响患者3年生存率的独立相关因素。其中，年龄、肝内转移、门静脉瘤栓、FAK表达以及NF-kBp65表达均是影响患者术后3年生存的独立危险因素，见表3。

人FAK基因全长4285碱基，分子质量125 ku，FAK作为生长因子受体信号通路的下游分子，使得Caspase-3失活从而抑制细胞的凋亡

；FAK参与P130cas-Crk-JNK-C-Jun通路使得金属基质蛋白酶(MMP-2、MMP-9)活化，增强肿瘤的侵袭力

；FAK还可激活RAS-MAPK-ERK、PI3K-AKT等信号通路，促进肿瘤细胞的增殖

，FAK的过表达可改变细胞的局部粘附能力，促进细胞的增殖、转移和侵袭，与肝癌的发生、发展密切相关。目前研究发现，FAK核酸及蛋白水平在乳腺癌、前列腺癌、大肠癌以及卵巢癌等多种组织中处于过度激活和高表达的状态

。本研究结果表明，FAK在肝癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织以及正常肝组织。有研究表明，人肝癌细胞株在缺氧环境中，侵袭能力增强且FAK表达水平显著升高

。TACE治疗过程中，阻断肿瘤供血，造成环境缺氧，促进癌组织FAK表达阳性。FAK表达阳性与患者肿瘤病理分化程度、TNM分期、转移等因素存在相关性

。本研究中，术前行TACE的患者，肝癌组织FAK表达阳性与患者的肝内转移、门静脉癌栓Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ以及TNM分级等有关，与文献报道的结论一致。

p50和p65是人NF-κB家族中重要的核转录因子，NF-κB p65可诱导细胞表达大量的抗凋亡基因，抑制肿瘤细胞凋亡，并激活原癌基因

，研究表明，其表达与食管癌、胃癌、肝癌等恶性肿瘤密切相关

。本研究结果表明，癌组织NF-κB p65表达阳性率显著高于癌旁组织及正常肝组织，与文献报道的结论一致。肿瘤耐药机制研究表明，多种耐药细胞系中存在着异常的NF-κB表达，可能是化疗导致的DNA损伤激活NF-κB阻止细胞凋亡，从而导致NF-κB阳性表达

。有研究表明，肝细胞癌中NF-κB p65蛋白高表达，肿瘤的分化程度、存在淋巴结转移等与其高表达有关

。本研究结果表明，NF-κB p65蛋白表达阳性与患者肿瘤病理分化程度、TNM分期、存在门静脉癌栓、转移等因素存在相关性。有研究表明，NF-κB p65的阳性表达率在Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ的癌细胞显著高于Edmondson分级Ⅰ～Ⅱ的患者

，与本研究结论一致。

本研究结果表明，年龄、肝内转移、门静脉瘤栓以及FAK和NF-kBp65表达阳性均是影响患者术后3年生存的独立危险因素。存在门静脉癌栓易造成肝内外转移，加速门静脉高压的形成引起食管静脉曲张破裂出血，是目前统一认可的影响患者生存率的一大主要因素

。肿瘤转移是目前公认的影响预后的又一指标之一，原发性肝癌患者中，无转移、肝内转移、腹腔淋巴结转移患者的中位生存时间依次下降

。原发性肝癌患者中FAK、NF-κBp65表达阳性患者生存率显著小于表达阴性的患者，是影响患者生存的显著相关因素

。

综上所述，肝癌患者手术切除前行TACE治疗后癌细胞中FAK、NF-κBp65表达阳性是影响患者3年生存率的独立危险因素。本研究初步探究了FAK、NF-κBp65表达与手术切除前行TACE治疗原发性肝癌患者的3年生存率间的相关性，但样本量有限，未进一步探究TACE化疗药物及化疗次数、时间等对FAK、NF-κBp65蛋白及患者生存率的影响，肝癌细胞中FAK、NF-κBp65与患者生存预后间的确切关系尚需进一步扩大样本量进行探究。

[1] 中华人民共和国国家卫生健康委员会医政医管局.原发性肝癌诊疗规范(2019年版)[J]. 中华肝脏病杂志, 2020, 28(2):112-128.

[2] Likhitsup A, Razumilava N, Parikh ND. Treatment for advanced hepatocellular carcinoma: current standard and the future[J]. Clin Liver Dis (Hoboken), 2019,13(1): 13-19.

[3] Ponziani FR, Nicoletti A, Gasbarrini A,

. Diagnostic and therapeutic potential of the gut microbiota in patients with early hepatocellular carcinoma[J]. Ther Adv Med Oncol, 2019,11: 1758835919848184.

[4] Thylur RP, Roy SK, Shrivastava A,

. Assessment of risk factors, and racial and ethnic differences in hepatocellular carcino-ma[J]. JGH Open, 2020,4(3): 351-359.

[5] Moawad AW, Szklaruk J, Lall C,

. Angiogenesis in hepatocellular carcinoma; pathophysiology, targeted therapy, and role of imaging[J]. J Hepatocell Carcinoma, 2020,7: 77-89.

[6] Francalanci P, Giovannoni I, De Stefanis C,

. Focal Adhesion Kinase (FAK) over-expression and prognostic implication in pediatric hepatocellular carcinoma[J]. Int J Mol Sci, 2020,21(16).

[7] Xia L, Zhang B, Yan Q,

. Effects of saponins of patrinia villosa against invasion and metastasis in colorectal cancer cell through NF-kappaB signaling pathway and EMT[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2018,503(3): 2152-2159.

[8] 王惠文, 刘瑞宝, 刘岩,等.原发性肝癌TACE后FAK、NF-κBp65表达及意义[J]. 介入放射学杂志, 2011, 20(8):621-624.

[9] Kanteti R, Mirzapoiazova T, Riehm JJ,

. Focal adhesion kinase a potential therapeutic target for pancreatic cancer and malignant pleural mesothelioma[J]. Cancer Biol Ther, 2018,19(4): 316-327.

[10] Almstedt K, Sicking I, Battista MJ,

. Prognostic significance of focal adhesion kinase in node-negative breast cancer[J]. Breast Care (Basel), 2017,12(5): 329-333.

[11] Zhang J, Chen Y, Lin J,

. Cyclovirobuxine d exerts anticancer effects by suppressing the EGFR-FAK-AKT/ERK1/2-Slug signaling pathway in human hepatocellular carcinoma[J]. DNA Cell Biol, 2020,39(3): 355-367.

[12] Zhou J, Yi Q, Tang L. The roles of nuclear focal adhesion kinase (FAK) on Cancer: a focused review[J]. J Exp Clin Cancer Res, 2019,38(1): 250.

[13] Fang Y, Wang D, Xu X,

. Synthesis, biological evaluation, and molecular dynamics (MD) simulation studies of three novel F-18 labeled and focal adhesion kinase (FAK) targeted 5-bromo pyrimidines as radiotracers for tumor[J]. Eur J Med Chem, 2017,127: 493-508.

[14] Wang R, Yu Z, Chen F,

. miR-300 regulates the epithelial-mesenchymal transition and invasion of hepatocellular carcinoma by targeting the FAK/PI3K/AKT signaling pathway[J]. Biomed Pharmacother, 2018,103: 1632-1642.

[15] Awah CU, Tamm S, Hedtfeld S,

. Mechanism of allele specific assembly and disruption of master regulator transcription factor complexes of NF-KBp50, NF-KBp65 and HIF1a on a non-coding FAS SNP[J]. Biochim Biophys Acta, 2016,1859(11): 1411-1428.

[16] Torrealba N, Vera R, Fraile B,

. TGF-beta/PI3K/AKT/mTOR/NF-kB pathway. Clinicopathological features in prostate cancer[J]. Aging Male, 2019: 1-11.

[17] Zhang CN, Zhang JL, Huang Y,

. Dibutyltin depressed immune functions via NF-kappaB, and JAK/STAT signaling pathways in zebrafish (Danio rerio)[J]. Environ Toxicol, 2018,33(1):104-111.

[18] 于营. AEG-1、NF-κBp65在人原发性肝细胞癌中的表达及临床意义[D]. 贵州医科大学, 2016:1-52.

[19] Kang D, Shim S, Cho J,

. Systematic review of studies assessing the health-related quality of life of hepatocellular carcinoma patients from 2009 to 2018[J]. Korean J Radiol, 2020,21(6): 633-646.

[20] Liu A, Wu Q, Peng D,

. A novel strategy for the diagnosis, prognosis, treatment, and chemoresistance of hepatocellular carcinoma: DNA methylation[J]. Med Res Rev, 2020,40(5): 1973-2018.