过敏性紫癜患儿血清基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-9和肿瘤坏死因子-α表达水平变化及意义

王晓亮，赵光宇

(1.榆林市第一医院检验科，陕西 榆林 719000；2.西安市中心医院儿科，陕西 西安 710004)

过敏性紫癜(Henoch-schonlein purpura，HSP)多见于幼儿园幼儿与小学生，可归为血管炎疾病类型，年发病率为万分之一左右，已成为了一种公共卫生问题[1-2]。该病在临床上的主要症状为紫癜，伴有腹痛、肾脏病变、关节痛等，机体可表现为小血管嗜酸粒细胞、周围中性粒细胞侵袭与浸润，存在血液高凝状态，甚至有微血栓形成。HSP常具有自限性，部分患儿不经过治疗就可好转，需要治疗的很多患儿在对症治疗后临床症状可明显好转[3]。但是部分患儿如果不及时进行诊治，可出现颅内出血而危及生命，因此对于HSP治疗的要求也比较高[4]。同时，HSP在发病时无特异性临床症状，容易导致误诊与漏诊情况发生，为此加强早期诊断也具有重要意义。HSP具体发病机制还不明确，病因比较多，涉及多种细胞因子的异常表达[5]。基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases，MMP)为一组蛋白水解酶，包括数十种蛋白，可降解细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)。MMP-13是MMP的主要类型，也是降解Ⅳ型胶原最主要的酶，与川崎病、大动脉炎的发生与发展密切相关[6]，但其具体机制尚不清楚。白细胞介素-9(Interleukin，IL-9)为常见促炎因子，不仅可对机体发生炎性反应，也可诱导其他促炎因子的释放，从而使患者病情恶化[7]。肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor，TNF-α)也为一种炎症因子，在局部组织炎症的发生中发挥重要作用，可诱导其他炎症因子的释放，增强细胞间黏附分子-1的表达，从而在多种炎性疾病的发生与发展中发挥重要作用[8]。本研究观察HSP患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平变化，并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年3月至2021年2月在本院接受诊治的HSP患儿96例为HSP组，选择同期在本院进行健康体检的儿童96例为对照组。HSP组中，男性49例，女性47例；平均年龄(7.39±0.58)岁；平均体重(24.02±2.14)kg；平均病程(2.92±0.25)周；平均身高(128.76±10.48)cm；腹型34例，关节型36例，肾型16例，混合型10例；急性期50例，缓解期46例；肾受累56例。对照组中，男性50例，女性46例；平均年龄(7.41±0.41)岁；平均体重(24.42±1.49)kg；平均身高(128.77±9.17)cm。两组儿童性别、年龄、体重、身高比较差异无统计学意义(均P>0.05)。病例纳入标准：HSP组患儿符合HSP诊断标准；所有儿童临床资料完整；检查前1个月未服用抗组胺类药物，检查前3个月未服用长效皮质类固醇激素；HSP组患儿为首次发病；所有儿童凝血功能正常。排除标准：合并肿瘤等免疫异常疾病的患儿；既往有凝血功能异常，导致出、凝血病史的患儿；继发性肾病患儿；患有肿瘤及合并心血管疾病的患儿。所有患儿家属签署知情同意书。本院伦理委员会批准了本研究。

1.2 治疗方法 HSP组所有患儿都给予综合治疗，予以维生素C(国药准字：H20058523)1.0 g/d静脉滴注，孟鲁司特钠颗粒(国药准字：H20203044)4 mg/d口服，西咪替丁氯化钠注射液(国药准字：H20030076)10 mg/kg静脉滴注，10%葡萄糖酸钙(国药准字：H20020311)1 ml/kg静脉滴注，低分子肝素钙(国药准字：H20060190)60～80 μg/kg皮下注射，连续治疗2周。

1.3 疗效判定标准 临床症状有显著缓解，治疗期间无复发，判定为痊愈；临床症状有好转，治疗期间无复发，判定为显效；未达到以上标准甚或恶化，判定为无效。有效包括痊愈和显效。有效率=(痊愈+显效)例数/总例数×100%。

1.4 血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平检测 采集所有儿童空腹肘静脉血2～3 ml，低温静置30 min后，2000 r/min离心10 min，取上层血清进行低温保温。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平(试剂盒批号依次为ab221839、ab242237、ab181421，均购自美国R&D Systems公司)，检测过程与检测体系的质量控制都符合要求。

1.5 统计学方法 采用SPSS 23.00统计学软件进行分析。MMP-13表达水平等计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验。相关性分析采用Spearsman法。多因素分析采用Logistic回归模型分析。计数资料以率(%)表示，组间比较采用卡方χ2检验； 检验水准α=0.05。

2 结 果

2.1 两组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平比较 见表1。HSP组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平高于对照组，两组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。

表1 两组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平比较

2.2 不同疗效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平比较 见表2。在HSP组中，治疗后痊愈54例，显效36例，无效6例，有效率为93.75%。有效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平低于无效患儿(均P<0.05)。

表2 不同疗效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平比较

2.3 HSP患儿预后与血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平相关性分析 Spearsman相关性分析显示，HSP患儿预后与血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平呈正相关(r=0.722、0.542、0.443，均P<0.05)。

2.4 HSP患儿预后影响因素分析 见表3。Logistic回归分析显示，血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平均为患儿预后的影响因素(均P<0.05)。

表3 HSP患儿预后影响因素分析

3 讨 论

HSP当前在临床上比较常见，是一种变态反应性疾病，主要表现为全身细小动脉、毛细血管异常[9]。HSP多发生在小儿，在不同性别患儿中的发病率无统计学差异，虽然发病比较急促，但是病程具有自限性，可反复发病，从而影响患儿的身心健康，也影响家庭生活质量。HSP病理改变为血管性炎性反应，涉及大量异常细胞因子的表达，但是具体发病机制还不明确。本研究显示，HSP组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平高于对照组，表明HSP患儿多伴有血清MMP-13、IL-9和TNF-α的高表达。从机制上分析，作为一种钙离子、锌离子依赖性蛋白水解酶，MMP-13可参与调节细胞外基质的炎症反应，其高表达可破坏血管内皮屏障，促进大量炎症因子释放和白细胞渗出、迁移，增加内皮细胞通透性，导致患儿出现血管性疾病[10-11]。IL-9具有强大的促炎作用，可直接或者与其他炎症因子协同驱动T细胞应答，诱发炎症活性基因表达，可参与HSP的发生与发展。在机体受到病原体侵袭时，血清中会产生大量TNF-α，后者可促进机体大量分泌趋化因子，还能刺激上皮细胞、成纤维细胞、气道平滑肌细胞分泌大量炎症因子与造血细胞因子，引起骨髓细胞系增生，以增强局部炎症[12-13]。

本研究显示，在HSP组中，治疗后痊愈54例，显效36例，无效6例，有效率为93.75%，有效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平低于无效患儿。HSP的治疗药物与方法比较多，包括维生素C、孟鲁司特、西咪替丁、葡萄糖酸钙、低分子肝素钙，在临床上多采用药物联合治疗，可根据患儿病情状况调整用药类型与用药剂量[14-15]。特别是孟鲁司特可降低免疫球蛋白水平、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的表达水平，发挥调节免疫及抗血管生成等作用，从而缓解HSP患儿临床症状，改善预后。

当前HSP患儿相对较多，也存在迁延不愈等特点，可严重影响患儿的生活质量[16-17]。本研究中，Spearsman相关性分析显示HSP患儿预后与血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平呈正相关，Logistic回归分析显示血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平为影响患儿预后的重要因素。从机制上分析，MMP-13多来源于内皮细胞、成纤维细胞等，正常情况下在机体中很少表达，但在内外在各种因素刺激下，MMP-13的大量释放可造成肾小球基膜的损伤，也可破坏血管基底膜及组织结构，导致机体出现血管性疾病[18]。IL-9也能增加微血管通透性，进而参与血管的病理损伤[19]。TNF-α高表达也能产生多种细胞因子，增加单核细胞及中性粒细胞，从而降解血管基底膜，直接破坏血管内皮屏障，导致患儿预后变差[20-21]。

综上所述，HSP患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α呈现高表达状况，与患儿预后存在相关性，也是影响患儿预后的重要因素。