北京地区近八年对种猪氟烷基因监测情况及分析

郑美丽，郭 峰，王晓凤，李 爽，陈少康

（北京市畜牧总站，北京 100107）

猪应激综合征（porcine stress syndrome，PSS）是指猪遭受多种不良因素（如运输、转栏、高温、配种等）刺激引发的非特异性应激反应。主要表现为猪呼吸急促、心跳加快、体温升高、肌肉僵直并突然死亡或屠宰后猪肉苍白、柔软和水分渗出，从而影响肉的品质，形成PSE肉或DFD肉，进而对养猪产业造成很大的经济损失。

氟烷基因（Halothane gene）也叫兰尼定受体基因，是发现最早的影响猪肉质的一个重要主效基因，也是导致猪应激综合征（PSS），形成PSE肉或DFD肉的重要遗传因素。多年来已有研究证明，当位于猪第六常染色体上的氟烷基因发生隐性突变并且隐性纯合后，会发生猪应激综合征，进而导致猪突然死亡或影响猪胴体性状。研究证明，正常猪的钙释放通道主要由钙离子、三磷酸腺苷、镁离子、调钙蛋白共同调节，如果猪受到突然的刺激，其钙离子通道也会短暂开放，保证肌肉正常的收缩和舒张。而当猪氟烷基因突变形成隐性纯合后，就会直接导致氨基酸的改变，影响到结构和功能，此时一旦钙离子通道受到刺激，就会迅速开放，却不能迅速关闭，从而导致肌纤维收缩后不能舒张，猪产生恶性高热，并产生劣质肉。所以对猪场种猪进行氟烷基因的监测工作，从而及时淘汰隐性纯合子种猪具有重要意义。

目前检测氟烷基因的方法主要包括血液遗传标记选择法、氟烷测定法、聚合酶链式反应-单链构象多态（PCR-SSCP）法和限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（PCRRFLP）法等，随着分子生物学技术的发展，目前普遍采用PCR-RFLP进行检测，其准确率已经基本能达到100%。在种猪活体质量监测工作中，我们也是通过此方法对抽测种猪进行氟烷基因的检测。

1 材料与方法

1.1 材料

每年对北京市7个区的种猪场开展种猪活体质量监测工作，采集抽测种猪的抗凝血样，品种包括大白猪、长白猪和杜洛克猪。具体8年检测种猪场数、品种、种猪数量见表1。

表1 2013—2020年种猪检测采样情况

1.2 方法

使用世纪元亨公司的猪应激基因PCR-RFLP检测试剂盒，来检测种猪血凝块中的氟烷基因，具体实验步骤参见产品说明书。

1.2.1 检测结果

2013年对收测种猪235份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型30份，HalNHalN阴性纯合型202份，HalnHaln阳性纯合型3份。在两个品种中，Haln基因频率平均为7.66%；

2014年对收测种猪135份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型16份，HalNHalN阴性纯合型119份，HalnHaln阳性纯合型0份。在两个品种中，Haln基因频率平均为5.93%；

2015年对收测种猪167份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型22份，HalNHalN阴性纯合型142份，HalnHaln阳性纯合型3份。在三个品种中，Haln基因频率平均为6.59%；

2016年对收测种猪143份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型9份，HalNHalN阴性纯合型131份，HalnHaln阳性纯合型3份。在两个品种中，Haln基因频率平均为5.24%；

2017年对收测种猪118份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型8份，HalNHalN阴性纯合型110份，HalnHaln阳性纯合型0份。在两个品种中，Haln基因频率平均为3.39%；

2018年对收测种猪138份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型3份，HalNHalN阴性纯合型135份，HalnHaln阳性纯合型0份。在三个品种中，Haln基因频率平均为1.09%；

2019年对收测种猪200份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型2份，HalNHalN阴性纯合型198份，HalnHaln阳性纯合型0份。在三个品种中，Haln基因频率平均为0.50%；

2020年对收测种猪70份样本进行氟烷基因检测，HalNHaln杂合型2份，HalNHalN阴性纯合型68份，HalnHaln阳性纯合型0份。在三个品种中，Haln基因频率平均为1.43%。

2013年至2020年具体参测种猪场氟烷基因检测情况参见表2至表9。

表2 2013年氟烷基因频率统计结果

表9 2020年氟烷基因频率统计结果

1.2.2 讨论与分析

从2013年至2020年8年时间，共对北京地区种猪场采样检测1 206头种猪，从氟烷基因监测结果可以看出，北京市种猪的氟烷基因频率基本呈逐年下降的趋势（见图1），这充分证明，在种猪场种猪育种工作中，氟烷基因的筛选已经作为非常重要的一项育种内容，北京市种猪场在逐年加强对种猪氟烷基因的淘汰工作，种猪质量明显提高。另外从每年参测种猪情况可以看出，北京地区现有种猪群中，杜洛克种猪现存数量明显较少，主要集中在大白猪和长白猪上，而分别分析比较这两个猪种各自近八年氟烷基因频率，可以发现，每个品种的频率也基本呈逐年下降趋势，其中长白猪Haln基因频率下降情况优于大白猪（见图2）。这也提醒我们，在今后的育种过程中，一方面要保证对种猪场种猪氟烷基因监测工作的不放松，另一方面也要着重关注对大白猪的氟烷基因检测情况，发现隐性纯合的个体要及时淘汰，对于杂合个体，在配种过程中也要做到慎重使用。

图1 2013年至2020年种猪氟烷基因检出频率

图2 2013年至2020年大白猪和长白猪氟烷基因检出频率

表3 2014年氟烷基因频率统计结果

表4 2015年氟烷基因频率统计结果

表5 2016年氟烷基因频率统计结果

表6 2017年氟烷基因频率统计结果

表7 2018年氟烷基因频率统计结果

表8 2019年氟烷基因频率统计结果

2 结论

生猪产业关系国计民生，而良种培育无疑是保障生猪产业健康发展的重要基础，因此，多年来种猪育种工作是养猪业的重要组成部分。近年来，我国种猪育种工作自主创新能力持续提高，良种供给能力不断增强，有力地支撑了现代生猪产业的发展。但种猪育种工作周期长、见效慢，与世界先进水平相比，我国生猪性能还存在一定差距，育种基础工作相对薄弱，育种机制还不够完善，再加之2018年后非洲猪瘟对养猪行业的重创，致使种猪育种工作出现严重倒退现象，种猪市场以次充好现象普遍，给种猪育种工作敲响警钟。氟烷基因突变一方面会影响胴体性状，另一方面也会对猪的繁殖性状产生不良影响。张新银等研究者通过检测经产母猪的基因型，并分析其对母猪产仔数和产活仔数的影响，发现带有隐性氟烷基因的母猪，其产仔数和产活仔数均比纯合显性的母猪少，且隐性携带母猪均表现出高度敏感，遇到应激影响后，难以再次配种，怀孕后也容易受不良因素影响而造成流产。因此，在提高我国种猪尤其是北京地区种猪场种猪质量，建立优秀种猪群的过程中，不能忽视对氟烷基因的检测工作，及时淘汰隐性基因携带者，避免由该基因造成的经济损失。

通过种猪活体质量监测工作，我们发现北京地区在近八年来，对氟烷基因筛选工作做得越来越好，这能帮助我们切实根除隐性氟烷基因在北京地区养猪业中的发展和蔓延，从而促进我们进一步实现通过选种选育工作，来提高北京地区种猪质量及猪肉品质的目标。北京市种猪活体质量监测工作的开展，帮助我们基本掌握了北京地区每年的现有种猪群氟烷基因型情况，也为北京地区种猪育种工作的更好开展提供了可靠的数据支持，是一项非常有效的基础性、长期性育种工作。