止痛消炎软膏对甘露醇所致静脉炎兔血清TNF-α和IL-6表达的影响

金海琴 石晓雯 于志芳 吴彩虹

静脉炎是临床上静脉用药后常见的并发症，导致局部血管内皮受损，引起血管内皮细胞凋亡，局部血管炎症反应。血清肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）是机体炎症与免疫的重要调节因子，其浓度高低直接反映了炎症的严重程度[1]。近年来，临床上常见使用止痛消炎软膏外敷来预防静脉炎。然而其说明书中并未明确说明对静脉炎有效，因此，本次研究通过动物实验观察止痛消炎软膏对静脉炎的防治效果，并通过测定IL-6和TNF-α炎症因子的表达水平，探索其对静脉炎的防治作用机制，为临床用药提供理论依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料与设备 2020 年8 月购买由浙江中医药大学动物实验研究中心提供的24 只新西兰兔，体重2.2～2.5 kg，雌雄各12 只，在清洁环境中单笼适应性喂养1 周。将24 只健康大耳白兔按随机数字表法随机分为四组：止痛消炎膏组、硫酸镁组、模型组和空白组，每组6 只。四组实验兔一般资料比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。

1.2 方法 四组实验兔均使用物理方法备皮，范围为兔耳缘静脉全长，注射部位为兔耳缘静脉距耳尖2 cm 处，用甲紫标记，近心方向穿刺，每次定点穿刺，所有实验兔的两耳均同时利用（两耳都注射）。静脉输注时避免药物外渗，有明确外渗时废弃模型。采用目前通用的静脉炎造模方式，即常温下静脉输注20%甘露醇溶液，用药量2.5 ml/kg，给药速率为5.0 ml/min，每日2 次，间隔6 h，共2 d。造模成功后，模型组实验兔不给予任何干预措施；硫酸镁组实验兔予25%硫酸镁湿纱布外敷，每日2 次更换，间隔6 h；止痛消炎膏组实验兔予止痛消炎软膏沿裸露静脉外敷，厚度为3 mm，用纱布包裹固定，每日2 次更换，间隔6 h；空白组实验兔常规饲养，不做任何处置。

1.3 评价指标 评价四组实验兔的双耳静脉炎发生情况和在6 h、24 h、48 h 静脉炎严重程度评分。静脉炎严重程度评价标准根据美国护理学会《输液治疗护理实践标准》中静脉炎的判断标准[2]，结合动物特点去除疼痛指标，将静脉炎分为5 个等级并评分，评分越高，静脉炎程度越重。比较四组实验兔在6 h、24 h、48 h 的IL-6和TNF-α水平变化。

1.4 统计学方法 采用SPSS 18.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（）表示。计量资料比较采用单因素方差分析和t检验；计数资料比较采用χ2检验。设P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组实验兔在实验期间饮食、活动基本正常。模型组兔耳静脉可见红肿，伴有条索状改变，可触及硬结，部分出现溃烂；硫酸镁组、止痛消炎膏组兔耳静脉炎症均有不同程度的减轻。空白组兔耳静脉正常。

2.2 四组实验兔耳静脉炎评分、IL-6 和TNF-α 水平比较见表1

由表1 可见，四组实验兔6 h、24 h、48 h 耳静脉炎评分比较，差异均有统计学意义（F分别=21.44、29.94、34.45，P均＜0.05）；四组实验兔6 h、24 h、48 h的血清IL-6、TNF-α 表达水平比较，差异均有统计学意义（F分别=5.56、25.90、4.30；9.51、16.26、9.08，P均＜0.05）。其中模型组实验兔6 h、24 h、48 h 的静脉炎评分、IL-6、TNF-α 指标均高于空白组，差异均有统计学意义（t分别=5.64、8.71、11.17；3.58、2.88、2.79；2.37、6.31、4.75，P均＜0.05）；止痛消炎膏组和硫酸镁组实验兔6 h、24 h、48 h 静脉炎评分、IL-6 水平均低于模型组（t分别=3.80、5.00、8.02；3.22、4.92、7.25；3.26、5.44、2.93；2.47、2.58、2.64，P均＜0.05）；止痛消炎膏组实验兔6 h、24 h、48 h 的TNF-α 指标均低于模型组，差异均有统计学意义（t分别=2.60、3.64、3.91，P均＜0.05）；硫酸镁组实验兔6 h、24 h、48 h 的TNF-α 指标与模型组比较，差异均无统计学意义（t分别=2.19、1.23、0.88，P均＞0.05）；止痛消炎膏组实验兔6 h 静脉炎评分及6 h、48 h IL-6 和TNF-α 指标和硫酸镁组实验兔6 h 的IL-6 和TNF-α 指标与空白组比较，差异均无统计学意义（t分别=1.61；0.30、0.13；0.20、0.75；1.03、0.34，P均＞0.05）；止痛消炎膏组实验兔24 h、48 h 和硫酸镁组实验兔6 h、24 h、48 h 静脉炎评分均高于空白组（t分别=3.41、2.72；2.42、3.79、3.92，P均＜0.05）；止痛消炎膏组实验兔24 h IL-6、TNF-α 指标和硫酸镁组实验兔24 h、48 h IL-6、TNF-α 指标均高于空白组，差异均有统计学意义（t分别=2.88、2.67；4.97、3.41；5.52、3.55，P均＜0.05）；止痛消炎膏组实验兔24 h的IL-6和TNF-α指标均低于硫酸镁组，差异均有统计学意义（t分别=2.31、2.67，P均＜0.05）；止痛消炎膏组6 h、24 h、48 h 静脉炎评分及6 h、48 h IL-6、TNF-α 指标与硫酸镁组实验兔比较，差异均无统计学意义（t分别=0.81、0.38、1.21；0.74、0.46；0.56、2.19，P均＞0.05）。

表1 四组实验兔耳静脉炎评分、IL-6和TNF-α水平比较

3 讨论

止痛消炎软膏作为临床广泛应用的中药制剂，主要用于治疗关节疼痛，风湿病，关节炎等导致的疼痛，有止痛消炎的功效，近年来也被广泛应用于静脉炎的预防。本次研究利用20%甘露醇诱导兔耳静脉炎模型，应用止痛消炎软膏外敷可有效防治静脉炎。本次研究结果显示，模型组实验兔6 h、24 h、48 h 的静脉炎评分、IL-6、TNF-α 指标均高于空白组（P均＜0.05），说明应用20%甘露醇造模方法造模成功，这主要是由于20%甘露醇是一种高渗性液体，输注时可以使血浆渗透压升高，导致静脉壁通透性增加，引起血管炎性改变，导致血管内皮细胞凋亡，各类炎症细胞释放[3，4]。IL-6 和TNF-α作为炎症反应的早期和重要的炎症指标，其浓度高低与炎症反应的程度密切相关[5]。本次研究结果显示，止痛消炎软膏外敷干预后静脉炎的评分、IL-6、TNF-α 各指标均较模型组低（P均＜0.05），说明止痛消炎软膏外敷能降低静脉炎的发生，这与林燕如等[4]、张益娥等[5]的研究结果一致，原因可能与中药外敷时药物直接作用于血管，通过透皮吸收，直接发挥药效有关。止痛消炎软膏成份中包含独活、生天南星、生草乌、皂荚、芒硝、水杨酸甲酯和冰片，这些中药成份有祛风散寒、止痛、散结、消肿、行气、通络之功效。同时，止痛消炎软膏中的独活含有香豆素、挥发油等类化学成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等药理活性。也有动物实验表明，独活的活性成分为二氢山芹醇、二氢山芹醇乙酸酯等，能有效抑制IL-6 和TNF-α 等炎症因子的表达，有抗炎作用[6]。止痛消炎软膏的辅助成份芒硝和冰片属于性寒之物，外用时芒硝的主要成分硫酸钠水解产生大量硫酸根离子，使局部渗透压升高，从而减轻局部炎症以及降低急性炎症指标，起到抗炎作用[7]。另外，本次研究结果显示，硫酸镁组的IL-6 表达浓度与模型组比较，差异有统计学意义，而TNF-α 表达浓度与模型组比较，差异无统计学意义，这可能是因为IL-6 比TNF-α 在炎症指标表达过程中灵敏度更高[8]。止痛消炎膏组在24 h 时IL-6 和TNF-α 表达水平均低于硫酸镁组，这说明止痛消炎软膏在24 h 对静脉炎的疗效优于硫酸镁，这与多项临床观察研究结果一致[5，9，10]。这可能是因为硫酸镁湿敷后会在皮肤表面形成结晶，水分较快挥发，纱布干燥，影响药效的发挥，而止痛消炎软膏为混合油状膏体，直接涂擦于皮肤表面，不仅接触更好，而且其为油状，涂擦后不易干燥挥发，可长时间保持湿润状态，故能更好的发挥药效。而6 h 和48 h 两者疗效无差异，可能与静脉炎的严重程度有关，从模型组的数据可见，随着时间的延长，静脉炎的程度越重，硫酸镁可能对轻度的静脉炎疗效确切，而止痛消炎软膏对静脉炎的疗效相对更加持久且有效，而对于重度静脉炎的疗效还有待进一步研究。

综上所述，止痛消炎软膏能够防治甘露醇引起的静脉炎，不仅改善了静脉炎的症状，同时，对IL-6和TNF-α 炎症因子均有不同程度的减轻，特别是对轻中度静脉炎的疗效优于硫酸镁，这为止痛消炎软膏在临床上的应用提供了重要的依据。但是，本次研究由于样本量有限，可能对相关研究结果造成偏差，因此，今后会进一步扩大样本量验证止痛消炎软膏对静脉炎的防治作用，及对IL-6和TNF-α炎症因子表达的影响。另外，目前认为静脉炎的病理机制为药物的刺激对血管内膜造成损伤，促使静脉壁发生炎症反应，释放炎症因子，产生的炎症介质NF-KB p65 被激活。因此，今后的试验研究方向考虑从NF-KB 炎症信号通路进一步探讨止痛消炎软膏防治静脉炎的作用及机制，寻找更有针对性的防治静脉炎的方法。