一例苏尼特绵羊副结核病的诊断

付 胜 ，李彦军 ，刘佳利 ，张承天 ，高 雅 ，满达 ，孟克 ，郝学峰 ，王金玲 *

（1.内蒙古农业大学兽医学院和农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古阿拉善右旗动物疫病预防控制中心，内蒙古 阿拉善盟 737300；3.鄂尔多斯市乌审旗农牧局动物疫病防控控制中心 ，内蒙古 鄂尔多斯 017300；4.鄂尔多斯市伊金霍洛旗动物疫病预防控制中心，内蒙古 鄂尔多斯 017200）

副结核病（Paratuberculosis）是由副结核分枝杆菌（Mycobacterium paratuberculosis）引起的多种动物共患的一种慢性传染病。牛、羊等很多反刍动物易于感染，甚至马、驴和猪等单胃动物也可感染。该病在许多国家被发现，遍布全世界，呈地方性流行，常以散发形式出现。另外该病潜伏期长，病程长，有些患病动物临床表现不明显，防控困难，对畜牧业的危害严重[1-2]。世界卫生组织（OIE）将本病列为B类动物疫病，我国将其列为二类多种动物共患传染病。本研究通过临床病史、尸体剖检、组织病理学和抗酸染色方法综合诊断了1例绵羊副结核病，现报道如下。

1 临床病史

1只送检的2岁苏尼特绵羊于1岁左右开始发病，主要症状为顽固性腹泻和进行性消瘦，初期食欲正常，后期食欲逐渐减退，体温无明显变化，病程1年。发病期间用各种抗细菌和抗病毒药物治疗后无明显效果。

2 尸体剖检

严重腹泻，肛门周围、尾部和后肢羊毛上均附着大量稀便（图1）。严重消瘦，全身脂肪完全萎缩消失。皮下干燥，浅表淋巴结轻度水肿，腹腔内可见较多清亮腹水。空肠后段大部分和中段局部肠管明显增粗，肠壁增厚（图2），肠黏膜增厚明显，黏膜形成明显的脑沟回样褶皱（图3）；回肠和盲肠壁增厚，黏膜形成明显的大脑沟回样褶皱；肠壁淋巴结明显肿大（图4），肠系膜和肠浆膜淋巴管扩张。胸腔和心包积有较多清亮的腹水，肝、脾和肾等器官体积明显缩小，且带有褐色。其他组织器官眼观无明显病变。

图1 严重腹泻，肛门周围、毛部和后肢皮毛附着大量稀便

图2 空肠局部肠管增粗，管壁增厚

图3 空肠黏膜增厚，形成脑回样褶皱

图4 肠系膜淋巴结肿大

3 组织病理学变化

剖检时取全身各组织器官，特别是病变部位，取材大小约为1.5 cm、1 cm、1 cm，立即放入10%的福尔马林溶液浸泡固定。将已固定24 h的组织修成约为1.5 cm、1 cm、0.3 cm大小的组织块，再经过脱水、透明、石蜡包埋、切片（约4 μm厚）和苏木精-伊红染色（H.E.染色），封片后进行观察。结果显示，空肠后段（图5）、回肠和盲肠（图6）出现严重的增生性肠炎，空肠黏膜固有层和黏膜下层增厚，内有大量的上皮样细胞和少量淋巴细胞增生。肝细胞普遍脂肪变性，肝小叶内可见多个上皮样细胞和淋巴细胞增生灶 （图7）。肠系膜淋巴结皮质可见上皮样细胞增生灶（图8）。肾小管上皮细胞明显坏死，肺脏轻度淤血。其他组织器官无明显的特征性病理变化。

图5 空肠黏膜固有层上皮样细胞大量增生HE×400

图6 盲肠黏膜固有层上皮样细胞增生 HE×400

图7 肝组织内上皮样细胞结节 HE×400

图8 淋巴结内上皮样细胞结节 HE×200

4 抗酸染色

无菌取肠系膜淋巴结切面制备触片，自然干燥，经抗酸染色，用油镜观察。结果在触片内的上皮样细胞胞浆内外均见散在和成簇的典型的红色小杆状的副结核杆菌（图9）。

图9 淋巴结触片上皮样细胞内红色副结核杆菌抗酸染色法×200

5 诊断

根据典型的成年羊顽固性腹泻和进行性消瘦的临床症状，典型慢性增生性肠炎（肠黏膜固有层和黏膜下层有大量的上皮样细胞和少量淋巴细胞增生）、增生性肠系膜淋巴结炎（肠系膜淋巴结皮质上皮样细胞增生灶）以及在经抗酸染色的淋巴结触片内的上皮样细胞胞浆内外均见散在和成簇的典型的红色小杆菌，综合诊断为副结核病。

6 防治

本病药物治疗的意义不大，没有治疗价值，预防措施主要是加强饲养管理和减少疾病诱因。要注意加强羊只的营养，避免维生素和矿物质缺乏，提高机体抗病能力。坚持自繁自养，外来引进羊只要进行健康检查，加强检疫措施，防止引入病羊和带菌羊。对已存在该病例的羊群进行检疫净化，培育健康羔羊，淘汰病羊。对羊群中的疑似病例隔离饲养，每3个月做一次变态反应，连续3次均为阴性的可视为健康羊，此时便可调出隔离圈舍。若变态反应结果为明显排菌羊，则应立即安排扑杀。被污染的羊舍、饲槽、羊栏和运动场等要进行严格消毒，用漂白粉、氢氧化钠、生石灰、来苏儿等消毒液进行喷雾、浸泡冲洗等[3-4]。

有些地区疫病流行严重，全部扑杀将会面临巨大经济损失，经各项调查和长期试验论证认为，对新生羔羊进行免疫接种，配合兽医公共卫生措施是控制该病最有效的办法，但因免疫效果不佳和接种变态反应呈阳性等问题未能在全世界范围推广。

7 讨论

副结核病由副结核分枝杆菌引起，主要通过消化道感染，又称为副结核性肠炎，幼畜最容易感染。其特征性症状为顽固性腹泻和进行性消瘦，剖检时可见肠黏膜增厚，形成脑回状皱褶。该菌损伤宿主的免疫系统，使病畜对其他病原微生物的抵抗能力下降，进而导致机体进一步消瘦和虚弱。本病例送检的2岁苏尼特绵羊于1岁左右开始发病，病程较长，主要临床症状也有严重的腹泻和进行性消瘦，初期食欲正常，后期逐渐减退。剖检见皮下干燥，浅表淋巴结轻度水肿，腹腔内可见较多清亮腹水，这与营养不良导致的进行性消瘦有关；空肠、回肠、盲肠肠壁和肠黏膜明显增厚，且黏膜有明显大脑沟回样褶皱，多组织体积萎缩变小。病理组织学观察也可见空肠黏膜固有层和黏膜下层有明显增厚，大量上皮样细胞和淋巴细胞增生，肝细胞脂肪变性及多个器官发生变化。这与许多报道和专业课本描述一致。

副结核分枝杆菌为革兰氏阳性菌，短杆状，无鞭毛，不形成芽孢和荚膜，大小为0.2～0.5 μm×0.5～1.5 μm，在病料和培养基上呈纵排列，抗酸染色呈阳性。细菌分型上一般将该菌分为I型、II型和III型，分别为羊型、牛型和生物中间型[5]。不同反刍家畜分离的副结核分枝杆菌的菌落形态、颜色及生化特性有一定的差异。本病例中淋巴触片经抗酸染色呈阳性反应，触片见散在和成簇的典型的红色小杆状的副结核杆菌。

副结核分枝杆菌对自然环境的抵抗力比较强，可较长时间存活于粪便、土壤和饮水中[6]；且幼畜从感染到出现临床症状的潜伏期很长，往往症状不明显，不能及时发现并隔离，所以对畜牧业危害巨大。但其对热比较敏感，60℃经30 min或80℃经1～5 min即可被杀死。在日常饲养过程中尽量自繁自养，引进新羊时要加强检验检疫，若发现变态反应为阳性的羊要及时隔离，并对畜舍进行消毒处理，平时及时清理粪便，更换洁净的饮用水等。