人脑胶质瘤miR-145-5p的表达与病人预后的关系

张海军 曹培超 郑占强 薛长理 梁春东 张圣旭

胶质瘤是常见的颅内原发性肿瘤，发病机制复杂，预后不良[1]。 研究指出微小核糖核酸（microRNA，miRNA）参与细胞凋亡、增殖、分化等过程，与肿瘤发生密切相关[2]。张雨薇等[3]指出miR-145-5p 与多种肿瘤的发生有关，例如前列腺癌、膀胱癌、胃癌、非小细胞肺癌等，具有抑癌作用，受竞争性内源RNA 的调控。本文探讨脑胶质瘤miR-145-5p的表达及其与病人预后的关系，为临床胶质瘤的诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 标本来源 纳入标准：术后病理证实为脑胶质瘤；术前无免疫治疗、放疗与化疗史；无先天疾病。排除标准：复发性胶质瘤；患其他恶性肿瘤；长期使用激素、免疫抑制剂；心、肝等重要脏器功能不全；患血液系统、免疫系统疾病；既往有脑血管疾病、脑膜炎等病史。选择2016 年6 月～2018 年6 月手术切除的人脑胶质瘤组织155例，其中男89例，女66例；年龄31～69 岁，平均（55.93±12.16）岁。取同期颅脑损伤颅内减压术切除的非肿瘤脑组织56例为对照，其中男32 例，女24 例；年龄30～72 岁，平均（56.19±10.98）岁。

1.2 miR-145-5p 的检测 利用qRT-PCR 法检测miR-145-5p 的表达水平。Trizol 试剂（美国Genecopia 公司）提取组织总RNA，逆转录成cDNA（美国Genecopia 公司）。实时定量PCR 反应条件：95 ℃5min 预变性；95 ℃10s 变性；58 ℃20 s 退火；72 ℃30 s 延伸；循环45 次。引物序列：miR-145-5p 上游引 物5'-GTGTAACAAATCTATAGGGCCA-3'，下 游引物5'-GAGGCCCAGCAGACAATGAGACT-3'；内参U6上游引物5'-GCGAAGTGTGAAGCGTTC-3'，下游引物5'-GTGTGGAGCCGAGGT-3'。利用2-△△CT法计算miR-145-5p相对表达水平。根据miR-145-5p表达水平均值分成高表达与低表达。

1.3 随访 术后第1 天开始随访，截止2021 年6 月30日，随访方式为门诊随访与微信或电话随访，记录病人生存预后情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件分析；计量资料以±s表示，行t检验；计数资料采用χ2检验；利用多因素Cox比例回归风险模型分析脑胶质瘤生存预后的危险因素；利用Kaplan-Meier 生存曲线分析miR-145-5p 表达水平与病人生存预后的关系；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 人脑胶质瘤miR-145-5p的表达变化 脑胶质瘤组织miR-145-5p相对表达量[（4.36±1.64）]明显低于对照组[（9.41±1.17）；P＜0.001]。

2.2 脑胶质瘤病人生存预后的影响因素 随访截止时，生存85例，死亡70例。单因素分析显示，肿瘤病理分级、肿瘤大小、肿瘤切除程度、术后化/放疗、miR-145-5p 表达水平与胶质瘤预后有关（P＜0.05，表1）。多因素Cox 比例回归风险模型分析显示，WHO分级Ⅲ～Ⅳ级、肿瘤直径≥5 cm、肿瘤未全切除、术后未放化疗、miR-145-5p低表达是胶质瘤生存预后不良的独立危险因素（P＜0.05，表2）。

表1 本文人脑胶质瘤生存预后影响因素的单因素分析

表2 本文人脑胶质瘤生存预后影响因素的多因素Cox 比例回归风险模型分析

2.3 miR-145-5p表达水平与脑胶质瘤生存预后的关系 生存曲线分析显示，miR-145-5p低表达组3年累积生存率（54.74%）较高表达组（80.00%）明显降低（P＜0.001，图1）。

图1 生存曲线分析miR-145-5p 表达水平与脑胶质瘤生存预后的关系

3 讨论

脑胶质瘤病人的预后与肿瘤病理分级密切相关，肿瘤病理分级越高，表明恶变程度越高，预后也相应较差，尤其对中老年病人，多有基础疾病，身体机能差，可能对化疗、放疗不耐受，预后更差[4]。脑胶质瘤呈浸润性生长，即使行手术切除联合放、化疗，术后仍会复发[5]。研究表明miRNA 与肿瘤发生、进展过程有关，与靶基因3'-UTR 区相结合，参与肿瘤发生、发展[6]。韩铖琛等[7]发现miR-145 在胶质瘤中呈低表达，上调其表达水平，能抑制胶质瘤细胞增殖。miR-145位于人类5号染色体，经转录之后能形成成熟的miR-145-5p，在肿瘤的发生、发展过程中发挥调控作用[8]。

本文结果发现脑胶质瘤组织miR-145-5p 表达水平明显下调。这与曹英海等[9]研究报道一致。研究发现，miR-145-5p通过抑制丝裂原激活的蛋白激酶和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 通路，从而抑制黑色素瘤细胞增殖、迁移以及侵袭[10]。本文还发现miR-145-5p 低表达与胶质瘤病人不良预后密切相关。有研究发现miR-145高表达能增强替莫唑胺抑制U251 细胞恶性行为的效果[11]。miR-145-5p 能负向调控双特异性磷酸酶6，抑制肿瘤细胞侵袭与增殖[12]；还对Sp1基因/核因子κB信号通路进行调节，抑制肿瘤细胞增殖[13]。

综上所述，脑胶质瘤组织miR-145-5p表达明显下调，与病人不良预后密切相关。这提示检测miR-145-5p 的表达水平对人脑胶质瘤病人的预后有一定的预测价值。