实时剪切波弹性成像联合血清microRNA-10b表达量预测先兆子痫的价值

姚 路 丁燕燕 马红云 白 蓉 马宗丽

临床上先兆子痫的发病率约为5%~10%，通常发生在妊娠20 周后，以血压升高、蛋白尿异常等临床表现为主［1］。先兆子痫是导致孕产妇和胎儿死亡的重要原因，孕产妇可引发弥漫性凝血功能障碍、急性肾功能衰竭、肺水肿、胎盘早剥等，胎儿则可引起支气管肺发育不良、生长受限、早产等［2］。因此，早诊断、早干预尤为重要，是控制病情发展和改善妊娠结局的关键。有研究［3］建议采用实时剪切波弹性成像（shear wave elastography，SWE）评估胎盘弹性，反映胎盘功能，以此预测先兆子痫。另有研究［4］指出，血清micro RNA-10b（miR-10b）可以预测先兆子痫。本研究旨在探讨SWE联合血清miR-10b表达量预测先兆子痫的应用价值。

资料与方法

一、研究对象

选取2018年2月至2020年3月于我院就诊的120例疑似先兆子痫孕妇，年龄22~36岁，平均（38.52±2.11）岁，孕28~32 周，平均孕（30.05±1.96）周。纳入标准：①既往无高血压病或子痫病史；②分娩次数≤2 次；③单胎妊娠。排除标准：①代谢性疾病史；②胎盘发育不良，如巨大胎盘（重量>800 g）、胎盘炎性变化等；③重度贫血（血红蛋白<60 g/L）；④合并糖尿病、肾功能不全等。120例孕妇分为先兆子痫孕妇35例（观察组）和正常孕妇85 例（对照组）。先兆子痫诊断参照中华医学会妇产科学分会2015 年妊娠期高血压疾病诊治指南［5］。两组一般资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准，所有孕妇均知情同意。

二、仪器与方法

1.SWE 检查：使用迈瑞Resona 7 彩色多普勒超声诊断仪，4C-1凸阵探头，频率1~6 MHz；热指数≤0.1，机械指数≤1.4。孕妇排空膀胱取仰卧位，充分暴露腹部，二维超声定位前壁胎盘中央和边缘部位，然后切换至SWE 模式，扫描过程中不加压探头，平行扫描，感兴趣区大小为10 mm×10 mm，胎盘中央部位的取样深度为4.0 cm，胎盘边缘部位的取样深度为5.4~6.0 cm；待图像稳定后冻结，再将取样框置于上述感兴趣区内硬度较大区域，启动定量分析软件获得弹性模量值，重复测量3 次取平均值，每次测量时间间隔3~5 s。上述操作均由同一具有丰富经验的超声医师完成。

2.血清miR-10b 检测：孕妇于清晨空腹状态下抽取静脉血5 ml，离心后取上清液，行定量PCR 检测，按照RNAi-soTMPlus 试剂盒说明提取血清样本总RNA，经紫外分光光度仪定量和甲醛变性凝胶电泳检测后，采用RNA 逆转录试剂盒行逆转录，最后采用SYBRGreen 荧光定量PCR 检测试剂盒检测。其中，目的基因miR-10b相对表达量根据2-ΔΔCt法计算。

三、统计学处理

结 果

一、两组胎盘弹性模量值和血清miR-10b 表达量比较

观察组胎盘中央部位、边缘部位的弹性模量值均高于对照组，而血清miR-10b 表达量低于对照组，差异均有统计学意义（均P<0.001）。见表1和图1。

表1 两组胎盘弹性模量值和血清miR-10b表达量比较（）

表1 两组胎盘弹性模量值和血清miR-10b表达量比较（）

组别观察组对照组t值P胎盘弹性模量值（kPa）中央部位34.37±3.96 2.42±1.31 16.522<0.001边缘部位14.32±4.01 5.96±2.23 17.023<0.001血清miR-10b表达量35.15±10.02 52.65±15.21 9.15<0.001

二、相关性分析

相关性分析显示，胎盘中央部位、边缘部位弹性模量值与血清miR-10b表达量均呈负相关（r=-0.445、-0.437，均P<0.05）。

三、ROC曲线分析

ROC 曲线分析显示，胎盘中央部位、边缘部位弹性模量值及血清miR-10b 表达量预测先兆子痫的AUC 分别为 0.821、0.865、0.772，联合应用的 AUC 为0.985，均高于各方法单独应用（Z=4.224、3.690、4.728，均P<0.001）。胎盘中央部位、边缘部位弹性模量值和血清miR-10b 表达量预测先兆子痫的敏感性、特异性分别为51.4%、100%，60.0%、97.6%，100%、50.6%；联合应用的敏感性、特异性分别为94.3%、100%。见表2和图2。

图2 胎盘弹性模量值、血清miR-10b表达量及其联合预测先兆子痫的ROC曲线图

讨 论

目前临床对子痫前期的发病机制尚未明确，子宫螺旋动脉重铸障碍和胎盘发育不良为子痫前期早期病理变化，而胚胎期滋养层细胞侵入性低下与该现象的发生直接相关，滋养层细胞异常分化则会导致胎盘滋养层浸润不足及纤维化，在一定程度上增加胎盘硬度［6-7］。因此，准确评估孕妇的胎盘功能尤为重要，能为临床预测先兆子痫提供重要信息。SWE 能实时、定量评估活体组织硬度，具有成像稳定、重复性好、分辨率高、无创等优点，在鉴别肿瘤良恶性方面已得到广泛应用。研究［8］表明，通过测量胎盘组织的弹性可以评估胎盘功能，能为先兆子痫患者的临床管理提供重要信息。血清miR-10b 能促使胎盘可溶性血管内皮生长因子异常表达，引发螺旋动脉重铸障碍，胎盘浅着床，有望成为预测先兆子痫的生物标志物［9］。基于此，本研究旨在探讨SWE 联合血清miR-10b 表达量对先兆子痫的预测价值，以期为临床诊治提供参考。

血清miRNA 是一种调控靶基因，其在血液循环中的特异性使其成为疾病早期诊断的分子标志物，参与了血管病变、血小板聚集及红细胞增多等过程［10］。研究［11］显示，可溶性血管内皮生长因子1 在先兆子痫的发生、发展中有重要作用，而血清miR-10b 能起到靶向调控可溶性血管内皮生长因子1 的作用，考虑血清miR-10b也参与了先兆子痫发生、发展，通过促使胎盘可溶性血管内皮生长因子异常表达，引起全身毛细血管内皮损伤及胎盘血管重铸障碍。本研究结果显示，观察组血清miR-10b 表达量显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），与“血清miR-10b参与先兆子痫发生、发展”的结论一致。

本研究SWE 检查显示，观察组孕妇胎盘中央部位和边缘部位弹性模量值均高于对照组，差异均有统计学意义（均P<0.05），表明先兆子痫孕妇胎盘组织的生物学性质已发生改变，这可能是由胎盘梗死、蜕膜血管病变、中间绒毛缺乏、纤维蛋白沉积及胎盘红细胞增多等因素引起，SWE 可以准确检出上述改变，有望成为临床评估胎盘功能及预测先兆子痫的新方法。与陈璐［12］提出“SWE 有望用于评估子痫前期孕妇胎盘功能”的结论基本一致。但另有研究［13］显示，计算弹性模量值并不客观，当胎盘组织不均一，且为非定向组织时，可能导致测值出现误差，从而影响临床判断。为避免出现误差影响研究结果，本研究选择胎盘弹性模量值联合血清miR-10b 表达量进行分析，ROC 曲线分析显示胎盘弹性模量值联合血清miR-10b表达量预测先兆子痫的AUC 为0.985，高于各方法单独应用（均P<0.05），提示联合应用对先兆子痫有较高的预测价值。另外，本研究相关性分析发现，胎盘中央部位、边缘部位弹性模量值与血清miR-10b表达量均呈负相关（均P<0.05），说明胎盘弹性会影响血清miR-10b 表达量，而血清miR-10b 又会促使胎盘硬度增加，推测两者相互影响。

综上所述，SWE 联合血清miR-10b 表达量在预测先兆子痫中具有较高价值，能为临床诊断提供参考信息。但本研究样本量偏少，可能存在偏差，今后需进一步行大样本研究。