重度脂血干扰干、湿化学方法检测部分生化指标的分析

张汉运 李有强 邓雨洁 王晶晶 甘钊杏 曾繁兴 陈锡泉

1.广州市番禺区何贤纪念医院医学检验科，广东广州 511400；2.湖南省郴州市永兴县心家精神病医院检验科，湖南永兴 423000

近年来检验结果的准确性为临床实践做出了重大贡献，分析前质量控制是整个检验质量控制中非常必要且不能忽视的重要环节，是保证检验结果准确性的前提[1-3]。分析前错误占临床检验错误类型的一半以上，而分析样品的质量对分析前质量控制非常重要[4]，因此，血清的溶血、高胆红素血症和脂血会极大地影响许多结果的准确性[5]。血脂最常见的原因是空腹时间短；其他常见原因包括饮食、糖尿病、急性胰腺炎、肾衰竭、酒精中毒、甲状腺功能减退和某些药物[6-7]。在临床检验工作中容易发现脂血标本，可能对不同生化参数的分析结果造成不同程度的干扰[8]，Soleimani等[9]报道高速离心是有效消除脂血对检测结果干扰的方法之一。因此，本研究观察高速离心前后脂血标本在干、湿化学两种仪器中14项生化指标检测结果的差异，分析干、湿化学方法对重度脂血的抗干扰能力。

1 资料与方法

1.1 样本收集

收集41例临床脂血标本，标本管为黄色真空采血管（含分离胶），血清标本外观为奶白色，不透光。

1.2 主要仪器与试剂

1.2.1 主要仪器 H7600全自动生化分析仪（日本日立Hitachi公司）；V5600干化学分析仪（德国强生公司）；TDZ5-WS低速离心机（湖南迈克尔实验仪器有限公司）；SORVALL ST40高速离心机（美国赛默飞公司）。

1.2.2 试剂 H7600生化分析仪所用试剂天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）（上海三维生物）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）和肌酸激酶同工酶 MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）（上海执诚生物）、淀粉酶（amylase，AMY）和尿素（Urea）（上海科华生物）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）和胆碱酯酶（cholinesterase，CHE）（浙江东瓯生物）、肌酐（creatinine，Cr）和 HCO3-（浙江伊利康生物）、葡萄糖（glucose，Glu）（浙江美康生物）、Ca2+（北京利德曼生化），其余均为仪器配套试剂；干化学试剂均为仪器配套试剂。质控品和校准品购自美国朗道。

1.3 观察指标及检测方法

1.3.1 观察指标 AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-共 14 项指标。

1.3.2 质量控制 上样前检测质控，当质控在控后开始样本检测。

1.3.3 检测方法 将41例样本经3000 r/min（离心半径11 cm）离心3 min后，分别在H7600和 V5600上检测以上14项指标；再将标本经15 000 r/min（离心半径7 cm）离心8 min后，吸取下层透亮血清，分别在H7600和V5600上再次检测以上指标。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2检验；采用GraphPad Prism 5.0制作图表，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果如图1所示，H7600全自动生化分析仪检测的41例脂血标本中，经高速离心后，3项指标（AMY、CK和Ca2+）的检测结果比较，差异无统计学意义（t=0.9153，P=0.3655；t=1.822，P=0.0760；t=0.6470，P=0.5213），而其他 11 项指标（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-）的检测结果比较，差异有统计学意义（t=2.110，P=0.0412；t=3.632，P=0.0008；t=3.606，P=0.0009；t=3.540，P=0.0010；t=3.246，P=0.0024；t=2.188，P=0.0346；t=5.884，P<0.0001；t=4.559，P<0.0001；t=7.540，P<0.0001；t=11.69，P<0.0001；t=9.602，P<0.0001）。V5600干化学分析仪检测的41例脂血标本中，经高速离心后，8 项指标（AMY、CK、Ca2+、AST、LDH、Urea、Cr和K+）的检测结果比较，差异无统计学意义（t=0.6770，P=0.5023；t=0.2535，P=0.8012；t=1.551，P=0.1288；t=0.1019，P=0.9194；t=0.2251，P=0.8230；t=1.402，P=0.1686；t=0.2481，P=0.8053；t=1.033，P=0.8030），而其他 6 项指标（CK-MB、CHE、HCO3-、Glu、Na+、Cl-）的检测结果比较，差异有统计学意义（t=4.581，P<0.0001；t=2.090，P=0.0430；t=3.466，P=0.0013；t=2.027，P=0.0494；t=4.609，P<0.0001；t=8.236，P<0.0001）。脂血标本在检测AMY、CK和Ca2+3项指标上，对干、湿化学方法均没有干扰（P>0.05），但是在检测 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-和Glu 6项指标上，对干、湿化学方法均造成干扰（P<0.05）；脂血在检测 AST、LDH、Urea、Cr和 K+5项指标上，对干化学方法没有干扰（P>0.05），对湿化学方法造成干扰（P<0.05）。

图1 高速离心前后检测结果的比较

3 讨论

脂血是临床检验中常见的干扰物[10-11]。脂血的成分主要包括乳糜微粒和三酰甘油，这两者可影响光的透射和散射，从而对采用比色法或比浊法检测的生化项目造成较大干扰，导致检验结果不准确，是日常生化检验工作中最常见的标本影响因素之一，给临床的诊断、治疗及预后造成不利的影响[12]。人们因饮食、某些疾病和服用某些药物而导致高脂血症，严重的脂血标本在实验室中并不罕见[9]。近年来，虽然随着检验技术的高速发展、方法学的改进、仪器性能的提高，消除了轻、中脂血对大部分生化指标检测的干扰，但仍面临着严重脂血干扰检测的挑战[13]。据文献报道可通过标本稀释法、低温冷藏法、磷钨酸-镁法和聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）法、脂质清除剂、脂质提取法、常温高速离心法和低温高速离心法消除脂血对检测结果的影响[14-19]，而常温高速离心法操作简单，对实验室条件要求不高，结果较为可靠，更适合临床检验实际应用[15]。

关于重度脂血标本干扰干、湿化学方法检测生化指标的报道不多（仅有一篇），文献中描述的是脂血标本常规离心后的干、湿化学方法检测结果的比较分析[20]，是干、湿化学方法上的比较，由于干、湿化学方法在方法上的根本差异，检测指标的线性范围可能有所差别，文中得出的结论可能值得进一步讨论。不同的是，本研究首次通过观察高速离心前后脂血标本在干、湿化学检测结果的差异，比较干、湿化学方法对重度脂血的抗干扰能力，结果显示，脂血在检测AMY、CK、Ca2+3项指标上，对干、湿化学方法均没有干扰（P>0.05），但是在检测 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-、Glu 6项指标上，对干、湿化学方法均造成干扰（P<0.05）； 脂血在检测 AST、LDH、Urea、Cr、K+5 项指标上，对干化学方法没有干扰（P>0.05），对湿化学方法造成干扰（P<0.05）。以上结果表明，重度脂血在不同的程度上均会干扰干化学和湿化学两种方法：湿化学方法检测14项生化指标，11项生化指标受干扰，占比11/14；干化学方法检测14项生化指标，6项生化指标受干扰，占比6/14；由此可见，在部分检测指标上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和Cl-），干化学方法对重度脂血的抗干扰能力优于湿化学方法。本研究存在的不足为：由于本研究所用的V5600干化学分析仪只开展部分生化指标（AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-）检测，无法纳入更多的生化指标，使分析的结论存在一定的局限性，在后续的研究中考虑纳入更多的生化指标。

综上所述，在部分检测指标上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-），干化学方法对重度脂血的抗干扰能力优于湿化学方法，若所测的指标能被重度脂血干扰，建议重度脂血标本经高速离心后再上机检测，以保证结果的准确性。