浅谈牛结节性皮肤病诊断及防控

高凤斌 李天庚

（1.吉林省四平市铁东区石岭镇畜牧兽医站，吉林 四平 136000；2.吉林省林业勘察设计研究院，吉林 长春 130000）

牛结节性皮肤病于1929年首次在赞比亚被报道，20世纪70年代向非洲北部和西部广泛传播，2005年后传播至中东一些国家，2015年以来，已经蔓延至欧洲东南部国家和俄罗斯，2019年8月12日我国首次确诊在新疆伊犁地区爆发牛结节性皮肤病。牛结节性皮肤病作为国家二类动物疫病，表现出较强的传染性。若养殖场饲养的牛发生该疾病，会给养殖场造成重大的经济损失，而该病的流行会对整个牛养殖行业产生严重影响。四平作为吉林省肉牛养殖的重要地区，务必对牛结节性皮肤病加以重点关注，加强对该流行性疾病的有效监测，对科学防控措施进行重点宣传和推广，提高养殖从业人员对该病的重视程度。在此基础上，要完善防控基础设施建设，为疫病科学防控提供可靠保障，避免牛结节性皮肤病的频发，促进牛养殖产业健康发展。

1.病原学

牛结节性皮肤病（LSD），也称之为牛皮肤疙瘩病，是由牛结节性皮肤病病毒（LSDV）所引起的传染病。该病毒属于痘病毒科、羊痘病毒属，该病毒只有一个血清型。病毒粒子有或无包膜，形态呈椭圆形或是砖块形，病毒粒子大小介于260~320nm，属于双链DNA病毒，基因组大小约为151kb。与山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组核苷酸具有约96%的同源性，彼此存在交叉免疫保护性。

该病毒对外界环境有较强的抵抗力，特别是寒冷干燥季节，能够存活数月，在零下90℃可保存10年，4℃的条件组织内的病毒存活时间可达到约180d，该病毒对热敏感，55℃条件下2h或是65℃条件下30min，病毒可有效灭活；酸碱溶液可杀灭该病毒，在pH6.6-8.6的环境中长期存活；对20%的乙醚、氯仿、1%福尔马林和一些洗涤剂（如十二烷基磺酸钠剂）敏感，对次氯酸钠（2%-3%）、苯酚（2%，15min）、碘化合物（1：33稀释液）和季铵化合物（0.5%）等也敏感；该病毒粒子对阳光敏感，在黑暗条件下可保持活力长达几个月。

LSDV以羔羊、犊牛的睾丸细胞或是肾上腺细胞等原代细胞可以完成培养，或是以牛肾细胞或是仓鼠肾细胞等传代细胞完成培养，于细胞浆内可完成生长繁殖，接种之后10d方可出现病变。此外，以鸡胚绒毛尿囊膜内繁殖，形成肉眼可见痘样病变，不会对鸡胚产生致死作用。超声波破坏细胞之后，可释放病毒至细胞外部。

2.流行病学

LSDV主要感染牛和水牛，各品种的牛都易感，奶牛易感性相对较高，山羊和绵羊被人工接种感染后，通常在接种部位局部出现反应，暂未发现人感染病例。患病牛是该病的主要传染源，主要是通过昆虫（如蚊、蝇和虱）媒介机械传播，其次是通过自然接触传播，另外被病牛的唾液、脱落的痂皮等污染的饮水或饲草等也可传播。自然感染的潜伏期多介于2~5周，约28d。全年都有可能出现LSD，但以6~9月份最为严重，发病率相对较高，以散发为主。发病率多介于2~45%，死亡率可控制小于10%，病牛病毒血症时间约12d，康复之后能够形成终生免疫。血液带毒时间约3周，公牛感染LSD之后，精液排毒时间约为5个月。针对痂皮内所含病毒，杀灭难度相对较大，养殖场若是出现疫病爆发的情况，扑杀病牛之后，若继续引入免疫力不足的牛，有可能再次引起发病。

3.临床症状

自然条件下，LSD潜伏期介于2~5周，试验感染则介于4~12d，通常7d。病牛体温升高可达40℃以上，呈稽留热型，并持续7天左右。初期表现为鼻炎和结膜炎，进而眼和鼻流出新鲜脓性分泌物，随着病情发展，可逐渐转变成角膜炎。结节一般最先出现于头部、颈部、胸部、会阴、乳房及四肢等处皮肤，产生明显的硬实结节，形状多以圆形为主，直径可达1~5cm，且结节存在于表皮、真皮之间，集聚则可形成不规则的肿块，最终可能引起坏死。病牛的肩前、股前、后肢与腹股沟外等位置的淋巴结发生肿大。口腔、眼、鼻与外生殖器等处黏膜也可产生结节和溃疡等现象，溃疡严重情况下，则会出现继发性细菌感染，并引发其他并发症。泌乳母牛可发生乳房炎，妊娠母牛可能出现流产并会持续几个月不发情，公牛病后4~6月内不育，若发生睾丸炎则可出现永久不育。

4.发病机理及病理变化

剖检变化，主要以消化道、呼吸道、泌尿生殖道等位置黏膜，特别是口、鼻、气管、皱胃、子宫壁等，存在明显结节病变。结节附近位置，通常伴有炎症反应，皮下组织、结缔组织与黏膜下组织，存在浆液性和出血性渗出液，呈红色或是黄色。皮肤最初病变为水肿和表皮增生及上皮样细胞浸润，之后则出现浆细胞、淋巴细胞以及成纤维细胞。真皮、皮下组织的血管、淋巴管则出现明显栓塞，并引发淋巴管炎和血管炎、血管周围炎，血管周围细胞发生明显聚集，并形成套状。在病死牛的上皮细胞、平滑肌细胞、皮腺细胞、浸润的巨噬细胞与淋巴细胞等内，可观察到圆形或卵圆形嗜伊红染色的胞浆内包涵体，包涵体表面存在球状突起，且周围存在晕圈。因淋巴液的聚集与渗出，可引起皮炎、肌炎、淋巴炎等，通过感染淋巴结使淋巴液回流受阻，引起一肢或多肢、前腹壁肿胀，对患畜的行动产生影响。

5.诊断

基于流行病学、临床症状与病理变化等，能够完成初步诊断；确诊还需实验室的诊断。其中，需对部分类似疾病加以仔细准确的鉴别诊断。由牛疱疹病毒-2（BHV-2）感染、昆虫叮咬、蠕形螨感染、盘尾丝虫病、贝诺孢子虫病和嗜皮菌病引起的皮肤损伤会与LSD所引起的混淆。一般情况下，BHV-2感染引起的浅表皮肤病变较多，病程较短，且比LSD病症轻。此外，BHV-2感染中存在的核内包涵体与LSD引起的胞质内的包涵体是相反的。嗜皮菌病是由刚果嗜皮菌所引起，这是牛和其他大家畜的一种常见的皮肤传染病，以浅表性的渗出性、脓包性皮炎、局限性的痂块和脱屑性皮疹为特征。牛皮蝇感染则多为牛皮蝇幼虫所造成，病牛出现局部疼痛以及恐惧等，对牛休息、采食等产生不利影响，常于牛背部皮下形成结节，形状以长圆形为主，结缔组织囊内则能够发现幼虫。

若对LSD确诊，则需通过实验室检测。具体涉及病毒分离鉴定、分子生物学检测、透射电镜观察等不同方法。病毒的分离，多以淋巴结、肺等组织或是皮肤结痂作为样本，样本与生理盐水的比例控制在1:5，并研磨获得混悬液，通过反复冻融3次之后，使病毒完全释放，以12000r/min、3min完成离心操作，选择上清液，通过0.22μm滤器过滤除菌，接种易感细胞，发生明显细胞病变之后，通过血清中和试验或间接免疫荧光试验，完成科学鉴定。同时，可取病料切片直接进行荧光抗体染色观察分析；也可通过电镜设备，对病毒粒子进行有效观察，这是对牛结节性皮肤病病毒最直接快速的鉴定方法。病毒分离所需时间相对较长，且成本相对较高。分子生物学监测，特别是实时荧光PCR检测，效果相当显著。经过不断深入研究，针对LSD开发相应的病毒荧光定量PCR核酸检测试剂盒，可直接选择新鲜病料，完成特异性检测。

6.防控措施

6.1 提高疫情排查有效性

重点落实疫情排查工作，并充分保证全面严格，对预防LSD有着关键性的影响和作用。鉴于此，为保证牛养殖行业良好发展，需对疫病排查采取严格的措施，切实提高疫病排查有效性，促使疫病排查所具有的关键作用能够得以有效发挥。对防疫工作站重点负责管辖的范围内，要定期开展全面严格地疫情排查，特别是对调入、引种，要重点加强疫病监测。开展疫病排查期间，需基于LSD特征，实施科学检查，发现异常情况，需对牛只采取单独隔离，及时联系检测人员，完成进一步的临床鉴别诊断。若诊断确诊为LSD，需及时向上级畜牧部门报告。为切实提高有效性，需对各部门采取严格监督管理，制定责任制度，并对责任制度加以严格有效落实，确保相关人员保持良好的责任意识与积极性，为疫病排查高质量开展落实提供可靠保障。

6.2 重视流行病学调查

对疑似LSD病例，应加以重点关注，并及时采样送检，有关部门需严格有效落实全面排查工作，以当地存栏牛为主，对此开展重点巡查监视。有关LSDV检查，若呈现阳性结果，则需严格基于有关标准和规范，对疫情加以严格处置。与此同时，对LSD流行病学调查要保持高度重视，有关疫情源头、传播方向等，对此加以仔细查明，有效避免LSD疫病的进一步传播扩散。除此之外，应加强对LSD的宣传普及，对有关畜牧兽医工作人员要开展专业系统的教育培训，以此为养殖从业人员提供科学正确的指导。

6.3 疫苗免疫

针对LSD的防控，疫苗免疫是十分重要的防控手段之一。开展疫苗接种，通常情况下，主要是以山羊痘疫苗以山羊5倍的剂量，采用皮内注射的方式，要做到一畜一针，避免交叉传染，全年仅需接种1次。如果从外地调牛，则需及时完成疫苗接种免疫。此外，严禁从疫区引种，且引种之后应当采取单独隔离措施，时间约30d，检疫符合标准，方可混群饲养。

6.4 做好安全防护

对于进出的车辆、人员和物品等，应采取严格控制，尤其是进出养殖场的车辆和人员等，需采取严格的消毒措施进行处理。同时，重点落实虫媒调查，并对虫媒防治技术加以仔细研究，对虫媒控制措施加以严格落实，对防蚊网和杀虫剂等加以合理使用，以此对养殖场区域内昆虫采取有效杀灭。针对场区内外、周边环境，需定期采取全面严格的清理和消毒，避免病原微生物大量滋生，使LSD感染率能够有效降低。牛舍、周围环境，同样需定期采取全面严格地消毒，特别是发病高峰期，或是疫病威胁严重时，需合理增加次数和频率，并对消毒液的种类定期进行合理更换，以此充分保证消毒效果。

6.5 及时诊断报告

发现牛存在疑似LSD症状的情况下，有关从业人员需加以密切关注，并向畜牧兽医部门和动物疫病防控机构等进行及时报告。相关单位接到报告后，则需基于有关标准规范，基于可疑疫情、疑似疫情、确诊疫情为主的标准流程，依次完成科学诊断，准确认定，并及时报告疫情。

6.6 严格处置确诊病牛

对LSD疫病排查与监测环节发现的病牛和确诊病牛，需及时捕杀，采取无害化处理。开展捕杀处理期间，可能涉及到捕杀无法顺利落实的情况，主要是由于捕杀病牛，会使养殖户面临相应的经济损失，以至于瞒报、阻拦等情况时有发生。所以，为确保对病牛采取严格处置，有关政府部门则需要提高度重视程度，制定合理的捕杀补偿制度，对养殖户的经济损失进行合理的补偿，以此确保捕杀工作能够得以顺利有效地开展。病牛捕杀之后，需重点关注善后处理，如牛群临床检查与监视等，并对养殖场环境进行全面仔细地彻底消毒。蚊虫是疫病传播的重要媒介，养殖场需加强灭虫工作。此外，对牛群及时完成集中免疫，以避免疫病出现范围性的传染扩散。疫苗免疫之后30d之内，对牛群的移动要严格限制。

6.7 增强宣传培训

区域范围内发生LSD情况下，地区有关政府部门则需保持高度重视，对疫情向全国范围完成及时准确通报，保证其他地区可以加强相应的排查和预防，促使各地区有效提高疫病防控意识。与此同时，可以以宣传手册、广播等渠道，并紧密结合新媒体渠道，如微信、网站等，有效落实宣传工作，对诊断及防控的有关知识进行全面宣传普及。在此基础上，对有关人员开展必要的专业培训，切实提高其防控意识，并促使养殖从业人员共同参与疫病防控，有效杜绝LSD频发。此外，针对生物安全防范，同样需加以重点关注，对生物安全体系加以完善建设，重点关注无疫区建设。有关政府部门则需发挥主导作用，为有关人员提供科学专业的技术指导和教育培训。而有关人员同样需保持高度重视，对养殖场、养殖区域，采取定期全面、严格仔细地清洗、消毒，尤其是被污染的养殖设施、饲草等物品，保证养殖区域保持干净清洁，为牛群健康生长发育提供可靠保障。

7.结论

综上所述，牛结节性皮肤病属于一种传染病，一旦感染会对牛的生长发育造成不利影响。养殖期间，若出现牛结节性皮肤病，则有可能发生一定范围的传播，也有可能增加牛的死亡，进而影响养殖经济效益。所以，为确保吉林省四平市牛养殖行业健康平稳发展，有关人员须重点对加强科学防控、流行病学、临床症状与病理变化等做到充分地了解和掌握，对疫病做出科学诊断，并采取科学有效的防控措施避免疫病频发，保证牛的健康生长发育，提高养殖经济效益的同时，促进牛养殖行业的健康发展。