甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响

李妮 柴琳

摘要：目的：分析甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响。方法：选取甲状腺功能五项高值血清，观察T3、T4、FT3、FT4、TSH项目牛血清、马血清、山羊血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水、正常人血清、甲减人血清的基质效应对于临床测试值的影响。结果：T3项目牛血清、水解明胶基质、BSA基质有明显的基质效应;T4项目牛血清、马血清、水解明胶基质、BSA基质、PBS、生理盐水有明显的基质效应;FT3项目牛血清、水解明胶基质、BAS基质、PBS、生理盐水有明显的基质效应;FT4项目牛血清、马血清、水解明胶基质、BSA基质、PBS、生理盐水有明显的基质效应。THS项目牛血清、马血清、山羊血清、水解明胶基质、BSA基质、PBS、生理盐水、正常人血清、甲减人血清无基质效应。结论：使用甲减人的血清对于T3、T4、FT3、FT4、TSH项目高值血清进行稀释，甲亢人血清在促甲状腺激素稀释中具有比较理想的稀释效果。

关键词：甲功五项;化学发光免疫分析;基质效应;临床检测

血清中甲状腺激素水平是甲状腺疾病诊断的重要依据，化学发光免疫分析能够对临床样本进行比较準确的检测，但是在临床检验工作中，会遇到特殊患者的某个血清样本浓度测值超过了诊断试剂盒检测线性范围上限。为了得到准确结果一般会将这些样本进行稀释后再进行检测，但有些样本倍比稀释后的结果明显不成比例，这主要是由于基质效应引起的差异[1]。本研究主要分析甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响。现报道如下：

1资料与方法

1.1 样本及试剂

样本为马血清、牛血清、水解明胶、山羊血清、牛血清白蛋白BSA。试剂为2H2O、KH2PO4、Na2PHO4、12H2O、KCL、NaCL

1.2 检测方法

选取2020年我院门诊以及住院部接受治疗的100例甲状腺或疑似甲状腺患者，在空腹状态下抽取患者的静脉血，对血液进行离心处理，吸取上层血清。将马血清、牛血清、山羊血清、甲亢人血清、正常人血清以及甲减人血清均置于56℃的环境中进行灭活，灭活时间为30 min。严格按照T3、T4、FT3、FT4、TSH说明书进行稀释。

1.3 数据处理

所有数据均纳入chemclin3.2版发光分析软件进行处理。

2结果

2.1 T3项目高值血清不同稀释基质液的基质效应情况

T3项目牛血清、水解明胶、BSA有明显的基质效应，正常人血清、甲减人血清无基质效应。见表1。

2.2 T4项目高值血清不同稀释基质液的基质效应情况

T4项目牛血清、马血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水有明显的基质效应，正常人血清、甲减人血清无基质效应。见表2。

2.3 FT3项目高值血清不同稀释基质液的基质效应情况

FT3项目牛血清、水解明胶、BAS、PBS、生理盐水有明显的基质效应，正常人血清、甲减人血清无基质效应。见表3。

2.4 FT4项目高值血清不同稀释基质液的基质效应情况

FT4项目牛血清、马血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水有明显的基质效应，正常人血清、甲减人血清无基质效应。见表4。

2.5 THS项目高值血清不同稀释基质液的基质效应情况

THS项目牛血清、马血清、山羊血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水、正常人血清、甲减人血清无基质效应。见表5。

3讨论

临床生物化学检测分析基质效应已经受到广泛重视，最早是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现的。基质效应几乎存在所有的样品之中，测定样品中任何一个分析物质时，都不可避免地受到基质效应的影响。多年以来，基质效应一直是影响实验室检测的一个重要因素。在酶法分析以及化学分析中，普遍存在检测准确性的问题。基质效应与检测方法以及校准品的选取有着密切的关系，会直接导致定标后测定结果出现偏差[2]。

甲状腺功能异常是一种临床常见的内分泌疾病。甲状腺分泌的两种主要激素为T3和T4，其中T3的分子量为651D，T4的分子量为770D。血循环中的T3有80%来自游离T4，通过酶的作用下在外周组织脱去一个碘原子而成，直接来自甲状腺的T3仅为20%。血液中的T3和T4有99.7%与甲状腺结合球蛋白、甲状腺结合前蛋白以及白蛋白等结合，只有少部分呈游离状态形成FT3、FT4[3]。与甲状腺结合球蛋白等结合的T3、T4无生物活性，只有游离的甲状腺激素才能通过细胞膜进入细胞，与细胞内受体结合，从而发挥相应的生理作用。甲状腺功能状态取决于FT3和FT4的浓度[4]。T3、T4、FT3和FT4均是小分子物质，一般测定试剂的方法原理为竞争法，使用T3/T4抗体作为固相捕获抗体，标志物对T3/T4抗原与血清中的T3/T4竞争，检测信号与T3/T4浓度呈反比。在本研究中，T3、T4、FT3、FT4均存在基质效应。分析原因为，在动物血清中的T3/T4与人血清中的T3/T4结构完全一致，动物血清本身的T3/T4含量就对人血清T3/T4测值产生影响。另外动物血清蛋白成分和含量与人血清不同，在两者进行混合的过程中，会破坏人血清内部原有的结合激素与游离激素的平衡，产生基质效应。生理盐水以及缓冲液在稀释过程中改变了TGB等含量，同样会破坏人血清内部原有的结合激素与游离激素的平衡，产生基质效应，4种激素指标内含量不同，动态平衡的系数也存在明显的差异，反映出了基质效应的差异[5]。TSH是调节甲状腺功能的主要激素，从本次的检查结果来看，9种基质对于TSH项目几乎没有基质效应，可能是牛血清、马血清以及山羊血清等动物血清的TSH结构与人类不同[6]。

综上所述，使用甲减人的血清对T3、T4、FT3、FT4、TSH项目高值血清进行稀释，甲亢人血清在促甲状腺激素稀释中可具有比较理想的稀释效果。

参考文献

[1]Negro R，Formoso G，Mangieri T，Pezzarossa A，et al.Levothyroxine treatment in euthyroid Pregnant women with autoimmune thyroid disease： effects on obstetrical comPlications[J].J Clin Endocrinol Metab，2006，91（7）：2587-2591.

[2]郭立民.化学发光免疫分析甲功五项的基质效应及临床意义[J].世界最新医学信息文摘，2015，15（1）：130，135.

[3]Ye JM.The effects of matrix and calibration mode on the measurement of chloride electrode[J].Shanghai J of Med Lab Sci，2017，17（1）：16-18.

[4]Wu ZR.Changes of Myocardial Enzymes in Patients with Primary HyPothyroidism amd HyPerthyroid[J].Labeled Immunoassays Clinical Medicine，2019，16（6）：353-355.

[5]张坚，刘永太.甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响[J].临床检验杂志：电子版，2019，9（3）：41-42.

[6]余江.甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响[J].临床医学，2019（3）：332-333.