龈沟液中IL-33、CRP与慢性牙周炎患者病情程度的关系

谢超

(虞城县人民医院 口腔科，河南 商丘 476300)

慢性牙周炎(chronic periodontitis，CP)属于慢性进展性疾病，若不及时治疗，随着病情进展可导致牙槽骨不断吸收，引起牙齿活动性出血，最终导致牙齿脱落，且牙周局部大量微生物代谢产生可刺激宿主产生致炎因子，加重全身疾病的进展。研究发现，重度CP不仅严重破坏牙周组织，且病变的牙髓严重影响临床治疗效果[1]。因而，在治疗前有效评估CP患者的病情程度具有必要性。CP是由细菌所引起的炎症破坏性疾病，炎症介质和细胞因子的分泌异常，导致促炎抑炎平衡失调，促使CP发生发展。白细胞介素-33(interleukin-33，IL-33)属于前炎症细胞因子，具有免疫调节和抗炎作用，参与慢性炎症和自身免疫性疾病的发生、发展[2]。C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)属于炎症反应敏感性指标，可促进其他一系列炎症介质的释放，参与CP的发生发展[3]。研究已经证实，血清中CRP、白介素等炎症因子与CP患者病情相关[4]。而龈沟液的主要成分来源于血清，由此推测，龈沟液中IL-33、CRP可能与CP患者病情程度相关。本研究旨在探讨龈沟液中IL-33、CRP在CP患者中表达，并分析二者与患者病情程度的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究经虞城县人民医院医学伦理委员会审核批准，选取2018年8月至2021年8月医院收治的110例CP患者为研究对象，患者及家属均签署知情同意书。110例CP患者中，男61例，女49例；年龄30～53岁，平均(36.62±2.07)岁；病程8～20个月，平均(13.59±1.48)个月；有吸烟史25例。

1.2 入选标准(1)纳入标准：①CP符合《口腔科学(第8版)》[5]中相关诊断标准，且经X线、牙齿松动度等检查确诊；②全口余牙≥20颗；③年龄≥18周岁。(2)排除标准：①近6个月内接受过牙周治疗；②合并糖尿病、冠心病或其他感染性疾病；③需长期使用各种药物治疗；④有血液系统疾病；⑤妊娠期或哺乳期。

1.3 病情评估与分组方法患者入院时，对患者牙周进行X线、牙齿松动度等检查，参照《口腔科学(第8版)》[5]评估患者病情程度：轻度为牙周袋≤4 mm，附着丧失1～2 mm，X线显示牙槽骨吸收不超过根长1/3，可有口臭；中度为牙龈有炎症和出血，可有脓，牙周袋≤6 mm，附着丧失3～4 mm，牙槽骨吸收超过根长的1/3但不超过1/2，牙齿可能松动，牙根分叉区可有轻度病变；重度为牙龈炎症明显或发生牙周脓肿，牙周袋>6 mm，附着丧失>4 mm，牙槽骨吸收超过根长1/2，多牙根分叉病变，牙多松动。将评估为轻度、中度病情者纳入轻中度组，将评估为重度病情者纳入重度组。

1.4 龈沟液中IL-33、CRP检测方法于患者治疗前，采用2 mm×10 mm的滤纸条，吹干患者患牙区，将滤纸条插入龈沟内30 s左右，取出后放入含有200 mL的PBS缓冲液的EP管中；于室温下洗脱40 min，于4 ℃环境下，以离心半径13.5 cm，3 000 r·min-1离心处理5 min，收集上清液并保存于-20 ℃环境中，采用酶联免疫吸附法检测龈沟液中IL-33、CRP水平，试剂盒选自上海康朗生物科技有限公司；相关操作需严格遵照试剂盒说明书进行。

2 结果

2.1 110例CP患者病情程度评估110例CP患者经评估，68例为轻中度组，占61.82%(68/110)；42例为重度组，占38.18%(42/110)。

2.2 不同病情程度CP患者龈沟液中IL-33、CRP水平与基线资料比较重度组治疗前龈沟液中IL-33水平低于轻中度组，CRP水平高于轻中度组，差异有统计学意义(P<0.05)；组间其他基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 不同病情程度CP患者龈沟液中IL-33、CRP水平与基线资料比较

2.3 龈沟液中IL-33、CRP水平与CP患者病情程度关系的logistic回归分析结果以CP患者病情程度作为因变量(“1”=重度，“0”=轻中度)，将患者治疗前龈沟液中IL-33、CRP水平作为自变量(均为连续变量)，经logistic回归分析，结果显示，龈沟液中IL-33低表达、CRP过表达与CP患者病情为重度有关(P<0.05)。见表2。

表2 龈沟液中IL-33、CRP水平与CP患者病情程度关系的logistic回归分析结果

3 讨论

目前，CP的病情程度评估主要依靠影像学检测和临床检测指标，如菌斑指数、探诊深度、临床附着水平等，但这些指标的检查多依赖于检查者的操作手法，结果不够客观，且属于侵入性检查。龈沟液中的成分组成与含量可反映牙周组织的健康或疾病状态[6]。因而，寻找龈沟液中有效的指标评估病情具有重要的意义。

CP的病因较为复杂，涉及微生物菌群、宿主免疫反应、炎症反应等，当微生物与宿主之间的应答平衡被打破，宿主免疫炎症反应不足或过度导致牙周组织出现不同程度的破坏[7]。IL-33是具有双重功能的细胞因子，主要参与辅助性T细胞介导的免疫答应、肥大细胞功能的调节作用，可引起牙周组织的特异性病理改变。CRP属于炎症反应标志物，可识别病原体与宿主损伤坏死的细胞；可激活补体系统，刺激单核细胞表面因子表达，直接促使细胞凋亡，并引起白细胞聚集，导致牙周组织疾病发生、发展。因此，推测龈沟液中IL-33、CRP水平与CP患者病情程度可能具有一定的关系。

本研究结果显示，重度组治疗前龈沟液中IL-33水平低于轻中度组，CRP水平高于轻中度组，且经logistic回归分析，结果显示，龈沟液中IL-33低表达、CRP过表达与CP患者重度病变有关，进一步证实龈沟液中IL-33低表达，CRP过表达与CP患者病情程度具有一定的联系。分析其原因可能是，T淋巴细胞介导的免疫应答反应是CP发病机制的中心环节，IL-33是白细胞介素-1家族的成员之一，可作为Th2细胞的调节因子，维持口腔内的免疫环境稳定，可能作为炎症反应过程中的保护因子[8]。因此，龈沟液中IL-33低表达提示炎症反应较为严重，CP患者重度病情的风险较高。但是IL-33对炎症反应起到双重的影响，可诱导肥大细胞、巨噬细胞等多种促炎细胞的产生，促进破骨细胞的形成，导致牙槽骨破坏丧失，并加速病情发展[9]。因而，龈沟液中IL-33与CP患者的病情程度关系还需进一步深入分析。CRP可诱导B淋巴细胞分化并分泌免疫球蛋白，引起急性期炎症反应，刺激破骨细胞前体的生长分化，从而造成牙槽骨的吸收破坏，加速病情进展[10]。此外，CRP还可在免疫反应中激活大量的细胞因子，促使白细胞聚集和血管壁细胞凋亡，加速病情进展。但本研究仅观察治疗前龈沟液中IL-33、CRP水平在CP患者中的表达，未深入探究患者治疗后龈沟液中IL-33、CRP的动态变化情况，关于两指标与CP患者病情程度的因果关系还需今后进一步研究证实。

综上所述，龈沟液中IL-33低表达、CRP过表达与CP患者病情程度有关，龈沟液中IL-33低表达、CRP过表达提示CP患者重度病情的风险较高，未来临床可检测龈沟液中IL-33、CRP水平来评估CP患者病情程度。