急性心肌梗死患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达及临床意义
2021-12-13蒋亚萍叶丽君喻长法
蒋亚萍 叶丽君 喻长法
急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)指在冠状动脉病变的基础上，患者发生冠状动脉血液供应急剧减少或中断，使相应的心肌严重、持久的缺血坏死，可导致心律失常、休克或心力衰竭等严重并发症。随着全球人口老龄化进程的加剧，AMI的发生率及病死率呈逐年增长的趋势，严重威胁着人们的生命安全，降低患者生活质量[1]。及时诊断和治疗并恢复血液供应是降低AMI病死率的关键。微小RNA(miRNA)是由约18～25个核苷酸组成的内源性非编码RNA，它与靶基因mRNA特异性结合，然后影响靶蛋白的表达水平，在蛋白质参与信号通路中发挥作用[2]。近年来随着对miRNA研究的深入，有研究认为微小核糖核酸RNA-208a(miR-208a)在AMI患者血液中表达异常，对AMI的早期诊断有一定价值[3]。本研究旨在探讨miR-208a、超敏肌钙蛋白I(hs-cTnI)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在AMI患者中的表达变化来指导AMI的诊断和疗效观察。
对象与方法
1.研究对象:选取2017年3月～2019年2月在台州市第一人民医院就诊的96例经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的AMI患者作为AMI组。纳入标准：①胸痛时间≥30min；②心电图检查可见相邻两个及以上导联ST段抬高；③经冠脉造影结果证实。排除标准：①合并严重感染；②自身免疫性疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤等；③肝肾功能不全。AMI组中男性49例，女性47例，患者年龄 48～84岁，平均年龄为65.0±15.5岁。另选同期于笔者医院体检的健康体检者45例设为对照组，其中男性24 例，女性21例，年龄47～82 岁，平均年龄为64.5±14.5岁。两组研究对象性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。
2.研究方法：测量患者静息状态下血压、身高、体重，计算体重指数(BMI)。抽取空腹8h后静脉血，用日立Labospect 008AS全自动生化仪检测血糖、血脂；用贝克曼DXI 800全自动化学免疫分析仪测hs-cTnI；用ELISA法检测MCP-1(上海西唐生物科技有限公司)；miR-208a检测用7500 型实时荧光定量 PCR仪 (美国ABI公司)，RNA提取液(美国Qiagen公司)提取总miRNA，用反转录试剂盒(美国Qiagen公司)反转录成cDNA，引物及PCR扩增试剂(日本 TaKaRa 公司)，以 2-ΔΔCt法计算各组间 miR-208a 的相对表达量，反应条件为 95 ℃预变性 10min，95℃变性15s，退火60℃ 15s，40个循环。miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的变化与可能合并的危险因素的关系按中位数分为高表达组和低表达组。
结 果
1.两组血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达：AMI组患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达水平均显著高于对照组(P<0.05)，详见表1。
表1 两组血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达水平比较
2.AMI组患者PCI治疗前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1变化：经PCI有效治疗后，AMI组患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达水平显著低于治疗前(P<0.05)，详见表2。
表2 AMI组患者PCI治疗前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1变化比较
3.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的变化与可能合并的危险因素的关系：miR-208a的表达水平与高血压、高血脂有关，hs-cTnI的表达水平与糖尿病、高血压有关，MCP-1的表达水平与糖尿病有关(P<0.05)，详见表3。
表3 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的变化与可能合并的危险因素的关系
4.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1对AMI的诊断效能评价：miR-208a、hs-cTnI和MCP-1对AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.912、0.904和0.831，均具有较高的诊断效能(图1)。
图1 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1对AMI的诊断效能
讨 论
AMI是急性冠状动脉综合征中最严重疾病，主要临床表现为持续性心前区压榨性疼痛。急诊科每年因胸痛就诊的患者约占就诊人数的5%～10%，漏诊的可疑AMI患者比诊断为AMl入院的患者30天死亡的风险高两倍[4]。欧美等国家是 AMI高发地区，中国近年来发生率呈现上升趋势。有研究发现，血管阻塞后约30min心肌开始坏死，6～8h 可完全坏死，越早恢复血液供应，存活的心肌就越多[5,6]。因此，AMI的早期诊断显得极为重要。
miR-208a在心肌细胞中特异性表达，其在心脏发生、心脏功能和病理学中起着重要作用。miR-208a位于重链肌球蛋白基因的内含子中，其功能为调节收缩蛋白的表达，miR-208a的表达上调，导致心律失常、加速细胞凋亡、纤维化、肥大和组织重塑[7]。TnI是心肌组织中特有的肌钙蛋白，hs-cTnI并不是一类新的心肌生物学标志物，因其检测下限远低于传统的肌钙蛋白而得名[8]。MCP-1是由76个氨基酸残基组成的碱性蛋白质，对单核-吞噬细胞可起到特异性的趋化激活作用，导致炎性反应的发生和发展。MCP-1可促进动脉粥样硬化斑块的不稳定和破裂，在AMI发生后心室重塑起着重要的作用[9]。本研究结果显示，AMI组miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达水平显著高于对照组；经PCI有效治疗后，AMI组患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表达水平显著降低(P<0.05)；miR-208a的表达水平与高血压、高血脂有关，hs-cTnI的表达水平与糖尿病、高血压有关，MCP-1的表达水平与糖尿病有关(P<0.05)；miR-208a、hs-cTnI和MCP-1对AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.912、0.904和0.831，均具有较高的诊断效能，与研究报道一致[10,11]。
AMI患者miR-208a在胸痛发作1h就开始明显升高，3h达到高峰，与CK-MB和cTnI呈正相关[12]。AMI组miR-208a表达量显著升高，与Gensini 评分显著正相关，可作为早期诊断AMI的标志物，并有评价冠状动脉粥样硬化严重程度和进行危险分层的潜力[13]。miR-208a作为早期诊断ST段抬高心肌梗死和心肌梗死疾病监测的生物学标志物，不仅可用于AMI的诊断，还能用于梗死后的预后[14]。国外有研究报道，对于hs-cTnI
综上所述，miR-208a、hs-cTnI和MCP-1在AMI组患者早期显著升高，对AMI有较高的诊断效能，其动态变化对AMI的诊断有重要的临床意义。
