男男性行为HIV感染者发生病毒耐药性变异相关危险因素研究

马艳丽，李 鸿，周 永，郭 磊，陈 鹏

（青岛市第六人民医院，山东 青岛 266033）

HIV 也就是艾滋病，从相关数据信息来看，HIV 感染患者的数量在逐年增加，而性传播是国内HIV 患者的主要感染方式，尤其是男男性行为中的传播率更高[1]。HIV 有着较高的病死率随着HIV 感染者的治疗时间增加，在一定程度上会使得病毒耐药性变异，大大降低治疗效果水平，增加了患者的死亡风险[2]。文中对男男性行为HIV 感染者发生病毒耐药性变异相关危险因素进行了简要分析，希望可以为抗HIV 药物研发提供一点帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

按照感染途径将选择2018年12月到2019年12月期间青岛市第六人民医院感染科收治的100 例男男性行为HIV 感染者设置为观察组，将100 例其他途径HIV 感染者设置为对照组，观察组：100 例，14-56 岁，平均年龄为（35.68±6.32）岁；对照组：100 例，15-57 岁，平均年龄为（35.41±6.21）岁。

1.2 方法

1.2.1 问卷调查方面

运用自制调查问卷了解男男性行为感染者基本人口学特征情况（包括年龄、职业、婚姻状况、文化程度、经济状况、确诊感染时间、感染途径、治疗费用来源、家庭住址、联系方式等信息）、行为状况（包括感染前后性行为状况、与同性/异性发生性行为情况、寻找性伴方式、固定/偶遇/商业性伴数量、性伴的感染和治疗情况、物质滥用情况、安全套使用情况等）；运用CPCRA 问卷了解患者服药情况（包括服药方式、服药剂量、药物不良反应情况、依从性教育情况、影响服药依从性的其他信息等）、抗病毒治疗情况（包括治疗方案及更换的治疗方案、高效抗逆转录病毒治疗开始及持续时间）；运用SAS 问卷、SDS 问卷、BHSS 问卷了解患者心理状况（焦虑、抑郁、羞耻等程度）；运用体质指数(BMI)等了解患者体能状况；运用WHOQOL-HIV-Brief 生存质量调查表了解患者生存质量情况；运用社会支持评定量表了解患者社会支持状况。

1.2.2 实验室检测方面

外周血检测：对外周血淋巴细胞计数、病毒载量、机会性感染情况（如：梅毒、肝炎、结核等）以及其他血液常规生化指标（白细胞、血小板、血红蛋白、血肌酐、血尿素氮等）进行检测分析；运用流式细胞仪检测淋巴细胞计数，使用HIV 病毒载量检测试剂盒及读数仪检测HIV 病毒载量。HIV 基因型耐药检测：先将外周血淋巴细胞(PBMCs)及血浆进行分离操作，将分离出来的PBMCs 及血浆贮存于-80℃冰箱备用；提取血浆中HIV 病毒RNA，巢式PCR 扩增HIV pol 基因区约1300bp 的目的片段（包括蛋白酶基因全长和逆转录酶基因前300 个氨基酸）；扩增引物：第一轮PCR：外侧上游引物：5'-TTGGAAATGTGGAAAGGAAGGAC-3' HXB2 2028-2050；外侧下游引物：5' -CTGTATTTCTGCTATTAAGTCTTTTGATGGG-3'HXB2 3509-3539；第二轮PCR：内侧上游引物：5'-CAGAGCCAACAGCCCCACCA-3' HXB2 2147-2166；内侧下游引物：5'-CTGCCAGTTCTAGCTCTGCTTC-3' HXB2 3441-3462；PCR 产物与标准Marker 对照鉴定为目标片段后进行纯化及基因测序。阳性检测：对病毒载量较低的感染者运用超速离心富集浓缩样本的方法进行血浆中HIV 病毒RNA 的提取，取6ml 标本分装于3 支2ml 离心管中，每管2ml，在4℃、24600 g 条件下离心l 小时，移去离心管上清液，留底部浓缩液约150μl；充分振荡混匀后，收集合并各管浓缩液；并用移去的上清液调整终体积至2ml，制备成3 倍超浓缩标本，其他倍数的超浓缩操作依此步骤进行。检测分析：获得的序列用Contig Express 拼接后用BioEdit 软件整理，Blast 鉴定基因序列亚型，Mega 软件构建系统进化树；并将整理好的序列提交斯坦福HIV 耐药变异数据库(http://hivdb.stanford.edu/hiv/)进行获得性耐药的检测分析。

1.3 统计学方法

所有问卷调查信息用Epidata3.1 软件双人录入，用SAS9.2 软件建立数据集并进行基本统计分析。

2 结果

2.1 个人与社会影响因素

两组患者社会支持评定量表、行为评分量表、合理用药检查评分表、心理评定量表、健康状况评价量表、生活质量评定量表的相关信息经过分析后，社会支持：B 值为2.362、SE值为1.032、Wald 值为2.320、OR 值为1.240、P 值为0.082、95%CI 值为1.021-1.022；行为状况：B 值为1.981、SE 值为1.114、Wald 值为2.023、OR 值为1.195、P 值为0.000、95%CI值为1.473-1.065；用药情况：B 值为1.989、SE 值为1.033、Wald 值为1.998、OR 值为1.033、P 值为0.008、95%CI 值为1.652-1.147；心理状况：B 值为2.541、SE 值为1.211、Wald 值为2.874、OR 值为1.356、P 值为0.014、95%CI 值为1.087-1.241；身体状况：B 值为2.332、SE 值为1.322、Wald 值为1.985、OR 值 为1.365、P 值 为0.110、95%CI 值 为1.332-1.044；生存质量：B 值为2.360、SE 值为1.354、Wald 值为2.748、OR 值 为1.369、P 值 为0.121、95%CI 值 为1.471-1.251。可以看出HIV 患者会受到用药情况、心理状况、行为状况的影响而使得耐药性变异情况出现（P<0.05）。

2.2 细胞变化因素

两组患者相关信息经过分析后，淋巴细胞：B 值为2.974、SE 值为1.652、Wald 值为2.854、OR 值为1.414、P 值为0.216、95%CI 值为1.362-1.215；病毒载量：B 值为2.747、SE值为1.541、Wald 值为2.584、OR 值为1.154、P 值为0.127、95%CI 值为1.478-1.521；血常规检测：B 值为2.362、SE 值为1.587、Wald 值为2.358、OR 值为1.841、P 值为0.301、95%CI值为1.542-1.652；机会性感染：B 值为2.361、SE 值为1.582、Wald 值为2.363、OR 值为1.254、P 值为0.132、95%CI 值为1.464-1.361；扩增pol 基因：B 值为2.870、SE 值为1.473、Wald 值为2.314、OR 值为1.556、P 值为0.095、95%CI 值为1.365-1.854。可以看出HIV 患者耐药性变异与淋巴细胞、病毒载量、血常规检测、机会性感染、扩增pol 基因等因素无关（P>0.05）。

3 讨论

由于国内免费抗病毒治疗的推广发展，HIV 感染患者逐渐接受抗病毒治疗，但是很多患者在治疗的过程中都发生了耐药性情况，在很大程度上提升了患者发病几率与死亡率，大大增加了艾滋病的治疗难度[3]。

HIV 病毒进入人体后，会对人体免疫系统产生攻击，严重的情况下还会引发恶性肿瘤，导致患者死亡。HIV 主要发生在青壮年群体中，随着病情发展，患者还会出现疱疹、淤血斑、咳嗽、气促、呼吸困难、持续性腹泻等情况，大大降低患者生活质量与生命质量[4]。从国内目前HIV 传播情况来看，主要是以男男性行为进行传播的，而目前针对HIV 患者最有效的治疗就是抗病毒治疗，但是相关研究表明，很多HIV 患者在治疗过程中经常会出现耐药性变异，不能有效控制患者病情发展，尤其是男男性行为患者在治疗过程中容易将耐药毒株扩散给他人，如果可以找出影响男男性行为感染者发生病毒耐药性变异相关危险因素，就可以在很大程度上促进HIV 治疗研究发展。

从文中研究活动来看，男男性行为HIV 感染者发生病毒耐药性变异情况，可能会受到药情况、心理状况、行为状况等因素的影响。所以，相关研究人员在分析男男性行为感染者发生病毒耐药性变异相关危险因素时，可以从患者的受到药情况、心理状况、行为状况等情况入手，进而改进相关的抗病毒治疗方案，降低患者病死率，减少HIV 对我国社会公共安全的危害[5]。