核酸检测技术在基层血站血液筛查中的应用

谢兰倩

（钦州市中心血站，广西 钦州，535000）

在临床治疗期间，血液需求量较大，因此保证血液安全对疾病治疗与降低病原体传染具有重要意义。基层血站为医疗机构提供血液，而其血液筛查能力会直接影响用血安全问题，需要高度重视对血液的筛查[1]。目前我国血液筛查方法包括核酸检测与血清学检查，其中酶联免疫吸附法是血清学监测的主要方法[2]。而核酸检测技术能够直接检测病原体基因组，最大限度的缩短病原体指标检测窗口期，能够提高血液检测工作效率，降低病原体传播[3]。自核酸检测在我站开始推广，从2017 年5月开始核酸检测覆盖献血标本，为了解我市的献血者NAT 阳性结果进行回顾性分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择112302 例2017 年5 月-2020 年12 月钦州市中心血站无偿献血标本进行研究，纳入标准：①均符合《献血者健康检查要求》中献血要求及标准；②接受酶联免疫吸附法检测，无任何反应。

1.2 方法

标本采集：每位献血者留取2 管5ml 血液标本，采用EDTA-K2 抗凝剂，第一管为常规真空管，用于ELISA、ALT、血型等的检测，第二管采用带分离胶真空抗凝管，用于NAT 检测。仪器与试剂ELISA 仪器与试剂：仪器：前处理标本处理仪：TECANEVO150/8，后处理全自动酶免分析仪FAME 24/30。ALT 仪器：迈瑞（BS-460） 试剂：HBV 检测试剂盒（北京万泰、珠海丽珠）；抗-HCV 试剂盒（英科新创、上海科华）；HIV 试剂盒（北京万泰、法国BIO-RAD 公司）外部质控品为北京康切斯坦生物有限公司提供。ALT 试剂：深圳迈瑞生物医疗有限公司。核酸仪器与试剂核酸仪器：苏州华益美血液核酸筛查系统AB-T-200和HAMLTONBONADUZ AG 科华血液核酸筛查系统。NAT 试剂：HBV、HCV、HIV（1+2）核酸检测试剂盒（苏州华益美）；HVB、HCV、HIV（1+2）（上海科华）。

检测方法：使用两种不同厂家的试剂对HBV、抗-HCV、抗-HIVAg/Ab、抗TP 进行ELISA 检测，阴性结果采用核酸筛查系统进一步进行核酸检测，NAT 反应性的标本为阳性。

1.3 观察指标

对全部标本进行ELISA 检测，对阴性的献血者进行HBV、HCV 和HIV3 项进行NAT 检测，对结果呈阳性的献血者进行资料分析[4]。

1.4 统计学处理

本研究采用SPSS 18.0 统计软件对本文数据进行分析，计量资料用χ ±s 表示，采用t检验，计数资料用百分比表示，采用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 比较两组患者

ELISA 总共检测人份数：112302 例，不合格人份数：3087例，总合格人数：109208 例，不合格占总人数：2.75%。

其中HIV 不合格人数：68 例，HBV 不合格人数：929 例，HCV 不合格人数：152 例，TP 不合格人数：472 例，ALT 不合格人数：1303 例。

核酸检测HBV-DNA：115 例，核酸检测hcv：0 例，核酸检测HIV：0 例。

3 讨论

血液安全性与血站采集的血液标本有直接的关系，而基层血站在采集血液期间，可通过酶联免疫吸附试验，了解病毒抗体与病毒抗原产生直接的了解，但由于其检测技术存在窗口期，使得检测误差较大[5]。近几年，我国血液检测技术发展逐渐加快，基层血站血液检测工作中使用核酸检测技术，对病毒核酸进行检测，缩短检测“窗口期”，使得血液安全性有一定提高[6]。这一技术的主要优势在于高度自动化、高敏感性，能够将血液样本中含量极低的核酸检测出来，病毒科在短时间内检查出来[7]。

长期以来，我国都采用ELISA 方法进行两遍的血液筛查，使输血传播疾病的风险大幅度降低，ELISA 敏感度较高，存在较多的假阳性和假阴性，并且检测的“窗口期”比较长，存在漏检的风险比较大[8]。本文通过将核酸检测技术纳入研究，结果显示：HIV 不合格人数：68 例，HBV 不合格人数：929 例，HCV不合格人数：152 例，TP 不合格人数：472 例，ALT 不合格人数：1303 例。核酸检测HBV-DNA：115 例，核酸检测hcv：0 例，核酸检测HIV：0 例。核酸检测技术通过提取血液中核酸、检验血液标本中核酸的扩增等流程，使得核酸两得到扩增，能够快速检测感染病毒的血液标本[9]。通过分析漏诊的原因，主要在于：1.由于基层血站刚开始开展核酸检测技术，可能工作人员对相关注意事项不够了解，随着逐渐推广核酸检测技术，可有效降低由于人为因素导致的误诊情况[10]。2.由于地域因素及人群分布等原因的影响，会造成不同地区之间血液样本较大的差别。3.由于血液样本在运送到实验室途中保存不当会出现标本检测异常，但目前我院已经采取全程温控监视[11]。4.仪器在保养、检测上存在一定要求，部分人员可能不够了解。因此临床检测期间需要加大对操作的要求，最大程度的提高阳性确诊率，提高临床输血安全性[12]。ELISA 检测在受到病毒变异、隐匿性感染等因素影响下，血液检测过程中存在一定漏诊率，为了确保用血安全，运用核酸检测技术与酶联免疫吸附检测互补，缩短窗口期，提升阳性率，为临床用血与疾病治疗提供了有利保障。

综上所述，核酸检测技术在基层血站中实施，能够促进多项检测灵敏度，使得基层血站筛差血液传播性疾病水平明显提高，与血清学配合检测，能够使得临床用血安全性有一定提高，并确保在检测期间按个要求，保障基层血站血液质量安全。