阴道分泌物检测方法的研究进展

李治清

（武鸣区妇幼保健院，广西 南宁，530199）

阴道炎/阴道病是妇科常见病、多发病，近年来，随着生活压力不断增加，女性阴道病患病率也随之上升，因女性的特殊生理结构，极易遭受病原微生物的感染，常见包括细菌、病菌、霉菌、衣原体、支原体等感染，促使外阴引起灼痛、瘙痒等临床症状，严重时可造成不孕不育，对患者及其家庭带来极大程度的影响[1]。阴道病诱发因素较多，且极易复发，故尽早诊断、治疗至关重要。目前针对阴道病患者，临床多对患者阴道分泌物进行检测。阴道分泌物主要是女性生殖系统分泌的液体，因正常妇女阴道中存在乳酸杆菌可酵解而引起乳酸，阴道内pH 值保持在3.8～4.4 之间，在此环境可有效抑制细菌生长、繁殖，以此达到自净功能，一旦机体防御机能遭受破坏，则极易引发病原菌感染，故对阴道分泌物进行检测至关重要[2-3]。阴道分泌物存在多种实验室检测技术，本文主要介绍各检测技术的方式与特点，以便选择有效、精准的方式检测、诊断疾病。

1.直接涂片法

阴道分泌物最常见、最传统的检测方式是湿片悬滴法与改进后效果更为显著的甲苯胺蓝盐水、稀碱、加热三步法，以及超高倍镜检测法[4]。上述检测方式具有操作简便、经济、精准等优点，在一张涂片上能够同时进行真菌、滴虫、白细胞等多项常规检测，适用于基层医疗单位与初诊、体检筛查等，检测温度环境一般为25～42℃[5]。但该检测方式存在一定的局限性，对医师要求较高，受标本、检测次数等多种因素影响，可能获得不同的结果；同一患者因不同医师取材，也可能获取不同结果，故采取上述检测方式也存在一定的漏检率、误诊率[6]。

2.染色法

染色法检测灵敏度较直接涂片法高，具有能够在1 张涂片上同时实施多项检测，且不受保温措施限制，污染程度较小，具有准确、操作方式简便、检出率高等优点。其中包括革兰染色、白带多功能染色（BTR）、多项检测迅速染色技术（CTB）等。

2.1 革兰染色

革兰染色检测具有操作方式简便、用时短、费用低等优点，在临床已得到广泛应用。多项研究显示，革兰染色法能够显著提升阴道分泌物真菌检测的检出率，效果较佳。在对真菌进行检验过程中，革兰染色法还可对淋球菌、加德纳菌等致病菌进行检测，具有一定的敏感性[7]。肖征、章京楠、曹正[8]等人研究显示，对120 例阴道炎患者给予革兰氏染色法检测，结果显示，其检测灵敏度、特异性、准确率分别为87.07%、100.00%、87.50%。

2.2 BTR

BTR 主要是依据白带病原具有不同的形态特点，利用具有多种功能的染色液作染色检查的一种实用性较强的形态学检测技术。BTR 染色液主要由R1、R2 液组成，染白带涂片，能够在一张涂片上同时进行淋球菌、霉菌、滴虫等多项检测，具有操作方式简便、染色形态清晰与检出率高等优点，可为临床诊断、治疗等提供可靠的依据[9]。

2.3 CTB

CTB 染液主要是由R1、R2 组成，因其染色液的效能可使病原体形态特点更为清晰显示出，可实施多项检查，同时还可进行阴道鳞状细胞分类计数，对卵巢功能进行检测，具有操作方式简便，迅速、检出率高等优点[10]。

3.培养法

培养法是诊断细菌性阴道病、滴虫性阴道炎的“金标准”，具有一定的高敏感性与高特异性，需要特定的试验环境与材料。其中包括普通细菌培养法、快速培养法、念珠菌显色培养基法（CA）等。杨洁、陈海迎、郑建琼[11]等人研究显示，对961 例孕妇采取阴道下段1/3 处及肛门分泌物实施细菌培养检测，结果显示，细菌培养法检测的灵敏度、特异度、约登指数、阴性似然比分别为0.32、1.00、0.32、0.6。而快速培养法检测时间仅需2.5h，也存在一定的灵敏度、特异度。CA 自20 世纪90年代由法国研究者进行开发，CA 的原理主要是依据酶底物法，经过显色来区别不同念珠菌，在25～28℃环境中培养24～48h 后，白色念珠菌可呈现出蓝绿色；热带念珠菌呈现蓝灰色或铁蓝色；光滑念珠菌呈现紫色；其他念珠菌显示白色，细菌被抑制。CA优点是能够直接使用阴道分泌物标本，仅需24～48h 培养即可诊断外阴阴道念珠菌病（VVC），同时鉴别引起VVC 常见念珠菌[12]。

4.分子生物学

近年来，随着分子生物学逐渐发展，微生物的分类鉴定从表型特征鉴定深化为基因特征鉴定。其中基于16SrRNA 基因聚合酶反应（PCR）扩增是临床检测阴道微生物最常见、主要方式[13]。曹敬荣、高世超、陈典典[14]等人研究显示，对12 株菌株使用PCR 扩增其16SrRNA 基因，测序后实施BLAST 比对鉴定菌种，结果显示，12 株菌经PCR 扩增均可获得阳性条带，均鉴定到种。由上述得出，分子生物学方式检测促使检测到的阴道微生物种类更为全面、更准确，检出率相比其他检测方式高。借助分子生物学方式能够研究不同微生物对阴道微生物作用，并掌握各生殖道感染性病症，进而为临床诊断、治疗提供有效理论依据。

5.小结

阴道分泌物检测是临床诊断妇科疾病的，主要方式之一，阴道分泌物检测方式较多，不同方式存在不同的特点。其中直接涂片、染色法作为临床传统检测方式，具有直观以及经济等特点，常在临床誉为“金标准”，但操作方式较为复杂、时间较长。培养法具有较高的灵敏度、特异性；分子生物学作为目前临床研究的重点内容，具有鉴定准确、设备昂贵、检测费用高等特点，故仅具有科研与确诊意义。因此在临日后临床研究中，可进一步增加样本数、引用客观性指标以及延长研究时间等，以深入研究阴道分泌物检测方式。