血管内皮生长因子在急性髓系白血病患者中的表达水平分析

冯砚平 王 楠 王伟佳 广东省中山市人民医院 528400

白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，是因患者的克隆性干细胞繁殖、分裂及凋亡通路受到阻碍，进而导致大部分恶性繁殖的白血病造血干细胞会集于患者骨髓及各种造血系统中[1-2]。急性髓细胞性白血病为白血病细胞分型中的一个种类，AML主要根据骨髓造血干细胞严重繁殖，其特点为骨髓和外周血中的原始细胞与稚嫩细胞异常增殖[3-4]。临床表现为不同程度的贫血、口腔出血、胸闷痛、感染、乏力、发热伴咳嗽、骨骼疼痛等。近几年来，流行病学研究表明，在白血病系列中AML的患病率约为30%，0～6岁的幼小儿童群体也是高发人群，而且患病后恶性程度高于其他白血病类型，主要表现为存活期(5年左右)比其他类型的白血病患者低[5]。目前，治疗AML的难度仍然极大，学者们对AML的重视度也越来越高，关于AML的发病机制也在持续的深入研究。大量研究证实，人体机体血管再生能力及细胞凋亡能力与AML患病具有相关性[6-7]。而VEGF为拥有象征性的可控制机体血管新生与细胞凋亡的蛋白质生物标志物，其表达水平变化可体现患者机体内的新生血管能力与细胞凋亡能力。因此，本文筛选我院收治的197例AML患者为观察对象，分析VEGF在AML患者中的水平表达情况，期望能给白血病的发病机制提供新的调查方向，具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 筛选本院在2017年7月—2019年11月期间收治的197例AML患者作为研究组，男93例，女104例；年龄5～87岁，平均年龄(48.77±19.10)岁；急性白血病的FAB分型：M1型33例，M2型89例，M3型42例，M4型24例，M5型9例。纳入标准：(1)根据急性髓系白血病治疗的专家共识(第一部分)的判断标准及临床检查诊断为AML者；(2)患者及家属知情同意并签署知情同意书；(3)经本院伦理委员会批准同意。排除标准：(1)检查判断不是AML者；(2)患者为孕妇或正处于乳期妇女；(3)合并器质性疾病、恶性肿瘤疾病者；(4)正处于有关药物治疗者。同时另抽取本院行健康体检的60例受试者为参照组。其中男34例，女26例；年龄12～70岁，平均年龄(48.67±18.33)岁。对比研究组与对照组的一般资料，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 检测方法 将所有患者进行VEGF水平检测，抽取每例患者的空腹静脉血大约5ml，然后加入经过抗凝剂处理过的抗凝管中混合，使用TG12M型毛细管血液离心机(北京亚态科技有限公司)进行离心，转速为3 000r/min，离心10min(半径为13.5cm)，分离获得血清后，将患者的血清用ELISA法展开检测VEGF表达水平，ELISA检测试剂盒在上海晶抗生物工程有限公司购买，根据试剂盒的操作说明进行测定血清。研究组根据标准化治疗2个疗程，1个疗程为28d，再次抽取患者的空腹静脉血进行VEGF水平检测。

1.3 观察指标 (1)统计两组(研究组、参照组)入院时VEGF水平，然后进行比较。(2)研究组经过治疗后，根据疗效判断标准进行评估疗效，将不同的治疗效果分为完全缓解组(n=78)、部分缓解组(n=86)、未缓解组(n=33)。对比三组VEGF水平。

1.4 疗效判断标准 完全缓解组：骨髓象细胞学检查：原颗粒细胞Ⅰ型与Ⅱ型的总和≤5%，并且红血球(RBC)与巨核细胞正常。血常规检查：血红蛋白(HGB)水平在11.0～15.0g/dl之间，血小板水平在(100～300)×109个/L之间，中性粒细胞在(1.80～6.30)×109/L之间，并且患者外周血分类不存在白血病细胞，无侵润内脏器官造成的临床症状和特征，患者可正常生活或靠近正常纳入完全缓解组。部分缓解组：原幼稚细胞于5%～20%之间；或者临床症状、特征及血常规检查中有一项未达到以上要求纳入部分缓解组。未缓解组：骨髓象细胞学检查、血常规检查、临床症状和特征均未达到以上标准纳入未缓解组。然后对比3组的VEGF水平。

2 结果

2.1 研究组、参照组治疗前的VEGF水平对比 治疗前，研究组VEGF水平为(328.79±47.32)pg/ml，明显高于参照组的(131.11±21.70)pg/ml，差异有统计学意义(t=31.34，P<0.05)。

2.2 治疗后研究组不同治疗效果的VEGF水平对比 单因素方差分析总体VEGF水平差异均有统计学意义(P<0.05)。多重对比分析，研究组治疗后，完全缓解组VEGF水平为(169.60±28.11)pg/ml，部分缓解组为(210.28±31.70)pg/ml，未缓解组为(299.81±36.22)pg/ml，三组比较差异有统计学意义(F=189.55，P<0.05)，而且完全缓解组VEGF水平低于部分缓解组，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

急性髓细胞白血病的恶性程度高于其他类型的白血病，发病急促，而且病情发展快速，给临床治疗造成极大的困难，致使学者们对AML进行更深入的调查研究，其发病机制也越来越清晰[8-9]。经过对人体的一部分生物标志物、生长因子进行研究测定，初步了解到AML患者机体内的造血干细胞异常凋亡的受阻过程，此外，再生血管持续增生提高了该细胞的营养供应，给其异常增殖带来了有利条件，进而导致患者的造血系统受到损害[9-10]。随不断深入研究显示，AML患者机体内的造血干细胞异常繁殖与凋亡时存在各种各样的生物因子介入[11]。检测VEGF是医院评估AML患者新生血管产生的重要蛋白质生物标志物。所以，检测AML患者的蛋白VEGF水平，针对AML的发病机制研究及判断病情、预后具有重要意义[12]。

本研究通过对AML患者与健康受试者的VEGF水平检测比较，结果显示，研究组的VEGF水平明显比参照组高，提示造成AML或许和患者机体内的VEGF水平相关。研究组通过标准化治疗2个周期后，完全缓解组与部分缓解组的VEGF表达水平明显低于未缓解组，而且完全缓解组VEGF水平低于部分缓解组，提示AML患者的VEGF表达水平变化和患者预后疗效具有明显的相关性。随患者的病情改善，VEGF水平随之下降。分析其原因是由于VEGF为一种具有高度特异性促血管内皮生长因子，经酪氨酸激酶受体达到目的，进一步提升血管通透性、细胞外基质性、血管内皮增生、迁移及血管产生[13]。VEGF表达水平上升，能够激发白血病患者的恶性血液肿瘤细胞间接分裂加速反应，同时使造血干细胞进一步自我调节，给恶性造血干细胞异常增生持续提供增生时需要的营养，进而导致AML快速进展。依照上述研究成果，提示治疗AML患者能够使用VEGF抑制剂实施治疗，以供广大AML患者治疗研究新方向[14]。

综上所述，VEGF水平在AML患者中呈显著性表达，随患者的病情得到改善，VEGF水平表达持续下降，所以对AML的诊断、预后疗效评价具有临床应用的意义。