甲钴胺胶囊评价性抽验的含量分析与比较研究

刘飞，孙强，巴然然，孙涛

(1.山东省食品药品审评认证中心，山东 济南 250014；2.泰安市食品药品检验检测研究院，山东 泰安 271000)

甲钴胺为周围神经病变的治疗药物，属于维生素B12类，它通过促进神经细胞内核酸和蛋白质以及神经髓鞘的合成，从而修复受损伤的周围神经，目前已广泛应用于临床。从1948年Spies等人把维生素B12作为药物研究以来，维生素B12的研究取得飞速的发展，到目前为止，作为药物的维生素B12主要有：氰钴胺、羟钴胺、腺苷钴胺和甲钴胺。前两种维生素B12在人体内没有生物活性；后两种辅酶型维生素B12已经实现人工合成，这为周围神经病变患者的治疗提供了有力武器。在修复受损的神经组织方面，腺苷钴胺必须先转化为甲钴胺才能作为辅酶参与一碳单位循环，从而促进核酸、蛋白质和卵磷脂的合成[1-2]。

甲钴胺见光容易分解，性质不稳定，近几年，省外抽检的甲钴胺胶囊出现多次质量不合格，不符合规定项多为有关物质，而对甲钴胺相关研究较少[3-8]，为了进一步探索各个企业之间、同企业不同批次间、同批次间的质量差异以及受储存环境的影响，本文将甲钴胺胶囊列为本次试验的研究对象。试验按照现行标准开展检验，对试验数据进行总结，并进行了探索性研究，以期进一步防范风险、完善其生产工艺和质量标准提供参考。

1 试验材料

1.1 检品情况 现在全国共有12家药企生产甲钴胺胶囊，涉及12个批准文号，本次试验在全省范围内进行甲钴胺胶囊的评价性抽样，共抽取了全省药品流通和生产环节的检品47批，涉及批准文号7个，占总批准文号数的58.3%，涉及生产企业7家，占全部生产企业数的58.3%。企业A共18批、企业B共16批、企业C共5批、企业D、E各3批、企业F、G各1批，其中企业A和企业B市场占有率较高。

1.2 试剂试药 乙腈(赛默飞世尔科技中国有限公司，色谱纯)；磷酸二氢钾(国药集团化学试剂有限公司，分析纯)；磷酸(国药集团化学试剂有限公司，分析纯)；氢氧化钠(国药集团化学试剂有限公司，分析纯)；超纯水(自制)；甲钴胺(中国食品药品检定研究院，批号：100692-201805，含量：92.8%)。

1.3 试验仪器 高效液相色谱仪(日本岛津LC-2030，SPD-20A紫外-可见分光检测器以及LC Solution色谱工作站)；电子分析天平(梅特勒 XS205DU型，梅特勒XE104型)；pH计(梅特勒 PE20型)。

2 试验方法

2.1 试验标准 按照《中国药典》2015年版(二部)甲钴胺胶囊检验标准，进行含量测定和含量均匀度检验项目的试验。试验在避光(小于5 Lx)条件下完成。

2.2 色谱条件及系统适用性试验 Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；以0.03 mol·L-1磷酸二氢钾(用0.2 mol·L-1氢氧化钠溶液或磷酸调节pH值至4.5)：乙腈(84∶16)为流动相；检测波长：342 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱温：30 ℃；进样量：20 μL。

取甲钴胺对照品10.08 mg，置20 mL量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，在自然光下放置10 min，过滤，进样20 μL，调节流速使甲钴胺峰保留时间约为12 min，甲钴胺峰与羟钴胺峰(相对保留时间约为0.2)的分离度大于20[3]。

2.3 溶液的制备 对照品溶液的制备：精密称取甲钴胺对照品10.52、10.38 mg，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

含量测定的供试品溶液制备：取供试品25粒，倾出内容物，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于甲钴胺5 mg)，精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相70 mL，超声使甲钴胺溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

含量均匀度的供试品溶液制备：取供试品1粒，将内容物倾入 10 mL量瓶中，囊壳用流动相分3次洗涤，洗液并入量瓶中，加流动相7 mL，超声使甲钴胺溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

3 试验结果

3.1 含量测定 经检验47批次甲钴胺胶囊均符合规定。含量测定结果在92.4%～108.1%之间，平均值为99.8%。

其中，企业A 共18批，其含量测定结果在92.4%～107.5%之间，平均值为99.1%，最高值和最低值相差15.5%；企业B 共16批，其含量测定结果在96.4%～108.1%之间，平均值为100.6%，最高值和最低值相差11.7%；企业C 共5批，其含量测定结果在93.8%～101.6%之间，平均值为96.7%；企业D 共3批，其含量测定结果平均值为100.2%；企业E共3批，其含量测定结果平均值为103.0%；企业F 1批，其含量测定结果为100.2%；企业G 1批，其含量测定结果为102.0%。

3.2 含量均匀度 经检验47批次甲钴胺胶囊均符合规定。A+2.20S的范围为4.4～14.0，平均数据8.2。

其中，企业A 共18批，其含量均匀度测定结果在4.4～14.0之间，平均值为7.3；企业B 共16批，其含量均匀度测定结果在5.4～11.2之间，平均值为8.5；企业C 共5批，其含量均匀度测定结果在7.3～11.2之间，平均值为9.0；企业D 共3批，其含量均匀度测定结果平均值为9.4；企业E共3批，其含量均匀度测定结果平均值为10.1；企业F 1批，其含量均匀度测定结果为9.2；企业G 1批，其含量均匀度测定结果为5.4。

4 结果分析及讨论

按标准进行检验，合格率为100%，质量状况较好。考察同一厂家多批次含量结果,通过比较批次间的差别可以分析出该企业的工艺成熟程度,需要完善的工艺程序。考察含量均匀度主要是对该工艺所生产出的产品验证其均匀度，使含量能达到良好的均一性。企业A共18批，其含量测定结果在92.4%～107.5%之间，平均值为99.1%，最高值和最低值相差15.5%，最低92.4%(含量均匀度12.5)、最高107.5%(含量均匀度12.0)、次高105.1%(含量均匀度14.0)，含量结果的极值相对其含量均匀度数据也是高值，说明其工艺中混匀效果及填充质量有待进一步考察研究；企业B共16批，其含量测定结果在96.4%～108.1%之间，平均值为100.6%，最低96.4%(含量均匀度10.5)、最高108.1%(含量均匀度11.2)，该企业除去这2批次，其余批次均在100%左右，说明其工艺中混匀效果较好，但应注意个别批次的数据；企业C 共5批，其含量测定结果在93.8%～101.6%之间，平均值为96.7%，该企业平均含量较低，企业应注意在生产工艺中原料投料环节；由于企业D、E、F、G检品批次较少，不能做很好地归纳分析。由于该品种的含量均匀度普遍较高，除去该品种是小规格的因素外，应格外注意该品种生产工艺中胶囊填充环节的填充效果。试验结果表明，各厂家结果有一定差异，且同一厂家不同批次的结果也存在较大差异。在保证现有质量的前提下，需要进一步防范风险、完善该品种的生产工艺，提高产品质量。