低温胁迫对不同基因型玉米幼苗的影响

2021-11-25张海娇邹原东李志强韩振芹

安徽农业科学 2021年20期

张海娇邹原东李志强韩振芹

摘要以不同基因型玉米品种郑单958、京科968、先玉335、农大108、京农科728和正大615为试验材料，在玉米苗期进行低温胁迫，分别在0、2、4 d采集玉米植株样品进行测定，通过比较玉米幼苗株高、株重、丙二醛含量、脯氨酸含量以及可溶性糖含量的变化，研究低温对不同基因型玉米幼苗的影响。结果表明，在常温（25 ℃）和低温胁迫（5 ℃）的培养条件下，京科968和京农科728的株高均高于先玉335、郑单958、正大615和农大108，其中京科968的株高显著高于其他基因型玉米幼苗。5 ℃低温胁迫条件下，京科968和京农科728的株重显著高于先玉335、郑单958、正大615和农大108。低温胁迫（5 ℃）0、2和4 d条件下，京科968和京农科728种子的丙二醛（MDA）含量和脯氨酸均低于其他基因型玉米幼苗，可溶性糖含量在不同基因型玉米幼苗间呈相反趋势，在低温胁迫4 d后优势更明显。在低温胁迫下，京科968、京农科728表现出较强的耐冷性，该研究为解决目前玉米生产中遇到的低温冷害问题提供理论参考依据。

关键词玉米幼苗;低温胁迫;耐冷性

中图分类号 S 513 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2021）20-0048-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.20.013

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Effects of Low Temperature Stress on Seedlings of Different Genotypes Maize

ZHANG Hai-jiao， ZOU Yuan-dong ，LI Zhi-qiang et al

（Beijing Vocational College of Agriculture， Beijing 102442）

Abstract Six widely planted maize varieties in China， including Jingke 968 （JK968）， Jingnongke 728 （JNK728）， Xianyu 335 （XY335）， Zhengdan 958 （ZD958）， Zhengda 615 （ZD615） and Nongda 108 （ND108） were used as materials. Low temperature stress was used in maize seedling stage. Plant samples were collected at 0 ， 2 and 4 d for determination. Experiment was conducted to study the effects of low temperature stress on the plant height， plant weight， proline content， malondialdehyde （MDA）， soluble sugar content of maize seedlings. Under normal temperature （25 ℃） and low temperature stress （5 ℃）， the plant height of JK968 and JNK728 were higher than those of XY335， ZD958， ZD619 and ND108. And JK 968 and JNK728 were significantly higher than those of other genotypes of maize seedlings. Plant weights of JK968 and JNK728 were significantly higher than those of XY335， ZD958， ZD615 and ND108 under 5 ℃. MDA and proline contents of JK968 and JNK728 seeds were lower than those of other genotypes of maize seedlings under low temperature stress for 0， 2 and 4 d. Soluble sugar content showed the opposite trend among different genotypes of maize seedlings， and the advantage was more obvious after 4 d of low temperature stress. JK968 and JNK728 showed the best cold tolerance under low temperature stress. The research results provided theoretical basis for solving the cold injury problems encountered in maize production.

Key words Maize seedlings;Low temperature stress;Cold resistance

基金項目北京农业职业学院院级项目（XY-NF-18-01）。

作者简介张海娇（1988—），女，黑龙江双鸭山人，讲师，硕士，从事作物种质资源创新与利用研究。

收稿日期 2021-03-11

玉米（Zea mays L.）是世界上种植最广泛的作物之一，同时在粮食、饲料和工业等方面也发挥着重要作用，其生长情况与环境因子息息相关[1] 。玉米是典型的低温敏感型作物[2]，近些年来，玉米生产中的低温冷害等极端天气频发，尤其是在北方春玉米播种区，玉米出苗期间遭遇低温冷害经常导致玉米出现萌发缓慢、整齐度差、幼苗长势弱等现象，甚至造成死亡，这已成为限制玉米产量和品质的主要环境因子之一[3-4]。长期以来，前人对低温胁迫对玉米幼苗的影响进行了大量的研究，许勇等[5]研究发现，低温处理8 d后对西瓜幼苗的丙二醛含量进行测定，结果表明对低温较敏感的西瓜幼苗其丙二醛含量上升幅度明显高于抗冷西瓜幼苗，对低温较敏感的西瓜幼苗丙二醛含量约是抗冷西瓜幼苗的2倍。但是目前MDA含量的变化与低温胁迫时间的相关性也存在不同说法[6]。植物在低温胁迫等逆境条件下，脯氨酸含量往往有明显积累，研究表明低温可以明显地增加玉米体内的脯氨酸含量[7]。在低温胁迫条件下，脯氨酸可以作为植物体内的渗透调节物质起到维持细胞结构、防止细胞脱水以及调节细胞氧化还原反应等作用，从而使植物具有一定的耐冷性[8] 。可溶性糖是低温胁迫条件下植物体内呼吸作用的底物之一，可溶性糖含量的积累可以增加细胞持水组织中的非结冰水，降低细胞质的结冰温度，从而保护细胞质胶体不会遇冷而凝固，因此可溶性糖的含量与植物的抗寒性呈正相关关系[9] 。鉴于此，笔者以近几年我国玉米生产的主推品种为研究对象，研究低温胁迫下玉米幼苗的生长特性和生理特性，以期寻求提高玉米抗冷性的高效、经济与实用的方法，为玉米的生产提供理论参考和指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试基因型玉米分别为郑单958（ZD958）、京科968（JK968）、先玉335（XY335）、农大108（ND108）、京农科728（JNK728）、正大615（ZD615）。

1.2 试验设计

分别将籽粒饱满、无病斑的供试玉米种子放在 75%乙醇中浸泡 10 s，继而用 5%次氯酸钙溶液消毒10 min，蒸馏水反复冲洗3遍后，将种子置于培养皿中，放于25 ℃恒温培养箱内催芽。将萌发后的玉米种子播在装有草炭土的育苗盆中，置于光照培养箱中培养，日温/夜温控制在25 ℃/18 ℃，光照强度为400 μmol/（m2·s），光照时间为12 h/d。待玉米幼苗长到3片叶子后，进行低温处理，日温/夜温控制在5 ℃，光照强度白天为300 μmol/（m2·s），晚上为100 μmol/（m2·s），光照时间12 h/d。低温胁迫后分别在0、2、4 d进行试验测定。

1.3 测定项目与方法

1.3.1 株高测定。

随机测定5株玉米苗期株高，从根部以上到幼苗生长点，求平均值。

1.3.2 重量测定。

利用电子天平测量玉米幼苗鲜重。

1.3.3 丙二醛（MDA）含量测定。

采用硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛（MDA）含量[10]。

1.3.4 脯氨酸含量测定。

采用酸性茚三酮法测定脯氨酸含量（Pro）[10]。

1.3.5 可溶性糖含量测定。

采用蒽酮比色法測定可溶性糖含量[9]。

1.4 数据处理与分析方法

采用Excel 2010进行数据计算和绘图;采用SPSS 25软件进行数据分析及处理。

2 结果与分析

2.1 低温胁迫下不同基因型玉米幼苗株高的比较

由表1可知，在25 ℃下，不同基因型玉米品种间株高存在较大差异，京科968的株高显著高于其他基因型玉米幼苗，其中京科968的株高较京农科728、先玉335、郑单958和正大615分别高12.02%、12.02%、16.15%、17.48%。低温处理4 d后，各基因型玉米幼苗株高有所上升，其中京科968和京农科728的株高显著高于先玉335、郑单958、农大108和正大615。正大615株高增加较小，且株高显著低于京科968、京农科728、先玉335玉米幼苗，说明低温胁迫对正大615株高有显著影响，在低温条件下京科968和京农科728表现出更强的耐低温萌发能力。

2.2 低温胁迫下不同基因型玉米幼苗株重的比较

由表2可知，在25 ℃下，京科968、京农科728、先玉335、郑单958的株重差异不显著，农大108的株重显著低于其他基因型玉米幼苗。低温处理4 d后，各玉米品种株重均有所增加，京科968的株重较京农科728、先玉335、郑单958、正大615和农大108分别高28.30%、36.00%、44.68%、44.68%和58.14%。由此说明，在低温条件下京科968较其他基因型玉米幼苗具有更强的耐低温能力。

2.3 低温胁迫下不同基因型玉米幼苗MDA含量比较

由图1可知，随着低温胁迫时间的增加，参试基因型玉米幼苗的MDA含量均呈逐渐升高趋势。其中，京科968和京农科728幼苗的MDA含量均低于其他基因型玉米幼苗。京科968在低温胁迫4 d后MDA 含量平均较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别低20.41%、16.43%、27.78%和35.36%，京农科728在低温胁迫4 d后MDA含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别低13.61%、9.29%、21.60%和29.83%。农大108的MDA含量增加幅度最显著，增加了0.83 μmol/g，正大615、先玉335、郑单958次之，京农科728和京科968的MDA含量增加较小，说明农大108的耐冷性较弱，京农科728、京科968的耐冷性较好。

2.4 低温胁迫下不同基因型玉米幼苗脯氨酸含量比较

由图2可知，随着低温胁迫时间的增加，不同基因型玉米幼苗脯氨酸含量呈增加趋势，且差异显著，增加幅度依次为农大108>正大615>郑单958>先玉335>京农科728>京科968。在低温胁迫2、4 d时，京科968和京农科728的脯氨酸含量均低于其他基因型玉米幼苗，尤其在低温胁迫4 d时优势更明显。其中，京科968的脯氨酸含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别低20.71%、24.74%、27.60%和36.51%，京农科728的脯氨酸含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别低2.92%、7.85%、11.35%和22.25%，说明农大108的耐冷性较差，京农科728、京科968131、先玉335的耐冷性较好。

2.5 低温胁迫下不同基因型玉米幼苗可溶性糖含量比较

由图3可知，在低温胁迫条件下，不同基因型玉米幼苗的可溶性糖含量随处理天数的增加呈升高趋势，且差异显著，京科968、郑单958的可溶性糖含量增加幅度最明显，京农科728、先玉335和正大615次之，农大108的可溶性糖含量增加幅度最小。其中，在低温胁迫4 d后，京科968的可溶性糖含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别高8.26%、10.18%、10.67%和11.66%，京农科728的可溶性糖含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别高3.48%、5.31%、5.78%和6.73%。因此，农大108受低温影响显著，而京科968、京农科728、郑单958的耐冷性较好。

3 结论与讨论

温度是影响玉米种子萌发的重要因素之一[11-12]。低温胁迫对玉米苗期的植株叶片和根系生长发育影响较大[13]。杨德光等[14]研究认为，低温胁迫降低幼苗株高、地上部及地下部干鲜重。该研究发现，与25 ℃培养条件相比，6个参试玉米品种在低温胁迫条件下的株高及株重均受到影响，不同基因型间，京科968和京农科728的株高和株重均高于其他品种，尤其在5 ℃低温胁迫条件下优势更为显著。丙二醛是植物在逆境胁迫条件下产生的一种对自身有害的物质，因此玉米幼苗在逆境条件下，细胞膜结构与功能遭到破坏，代谢功能失去平衡，活性氧在植株体内大量积累，使得细胞脂过氧化作用不断增强。该研究中，随着低温胁迫时间的延长，参试基因型玉米幼苗的丙二醛含量均呈明显上升趋势。其中，京科968和京农科728幼苗的丙二醛含量均低于其他基因型玉米幼苗，农大108的MDA含量增加幅度最显著，正大615、先玉335、郑单958次之，京农科728和京科968的MDA浓度增加较小，这与对辣椒、夏威夷椰子等的研究结果一致[15-16]。脯氨酸具有调节植物细胞内的渗透平衡，稳定原生质胶体及组织内的代谢过程，防止细胞脱水，并能增加植物对逆境的适应性作用，因此是植物体内最有效的渗透调节物质之一[17]。脯氨酸作为植物体内的一种游离氨基酸对低温比较敏感，前人对玉米苗期进行低温处理后，发现脯氨酸含量逐渐增加[18]，这与该试验所得的结论相同。低温胁迫后玉米幼苗淀粉含量下降，维持渗透势的糖类增加，从而增强玉米幼苗的抗冻性[19]。前人研究发现，作为众多植物的呼吸作用底物，植物体内的可溶性糖含量在低温胁迫条件下会显著增加[20-21]。该试验中，随着低温胁迫时间的延长，参试玉米幼苗的可溶性糖含量显著增加;在低温胁迫4 d后，京科968的可溶性糖含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别高8.26%、10.18%、10.67%和11.66%，京農科728的可溶性糖含量较先玉335、郑单958、正大615和农大108分别高3.48%、5.31%、5.78%和6.73%。总之，植物在低温胁迫下的表现是多方面的，因此研究玉米幼苗耐冷性时应该根据多个指标综合衡量，该试验人工模拟低温条件来研究玉米的耐冷性，只能初步判断外源物质对玉米耐寒性的影响，而且试验材料准备较少，因此最准确的变化趋势仍有待进一步研究。

在低温逆境条件下，对不同基因型玉米幼苗的农艺性状及生理指标的测定结果表明，低温胁迫显著抑制不同基因型玉米幼苗的生长，抑制幼苗株高和株重，促进玉米幼苗MDA、脯氨酸和可溶性糖含量的增加。随着低温胁迫时间的延长，不同基因型玉米幼苗各个测定指标的变化量差异显著。可以初步判定不同基因型玉米幼苗对低温胁迫的耐受性存在较大差异，在同等低温胁迫条件下不同基因型玉米幼苗耐冷性关系为京科968、京农科728耐冷性最优，先玉335、郑单958、正大615次之，而农大108的耐冷性较弱。

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