QuEChERS-GC-MS/MS法测定新疆黑桑椹干中14种农药残留

赵丽萍，陈浩，宋敏

1.新疆维吾尔自治区产品质量监督检验研究院（乌鲁木齐 830011）；2.新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市经济技术开发区疾病预防控制中心（乌鲁木齐 830011）

黑桑椹，又称“药桑”，是自然界极为罕见的稀贵桑树半栽培半野生资源，也是中国唯一的黑桑种，栽培适应地只限于新疆[1]。黑桑椹作为维吾尔族民间传统药材，具有活血补脑、通脉护肝、强肾利尿、降压降脂等作用[2]。黑桑椹成熟后，因存储时间短，运输易损坏，除生食外，通常会将其晾晒成黑桑椹干食用。

农药可有效预防病虫害，在果蔬种植中被广泛使用，农药残留可通过食物链在人体内积累，造成神经系统紊乱，引起染色体畸变，导致癌变或畸形[3]，农药残留问题受到广泛关注，农药残留检测技术一直是国内研究热点[4-5]，但中国对新疆黑桑椹干中农药残留的检测少有报道。

食品中农药残留的前处理方法多采用液-液萃取，固相萃取净化浓缩[6-7]，这些方法普遍存在操作步骤繁琐、有机溶剂消耗量大等问题[8]。QuEChERS法是近年来发展迅速的一种农药多组分残留检测前处理方法，该法因快速、简便、廉价、高效、安全等优点而被广泛用于农药多残留快速检测[9-12]。基于QuEChERS法开发气质联用检测黑桑椹干中农药残留的方法，旨在建立一种简单快速、重复性好，且能同时测定黑桑椹干中多种农药残留的方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

TSQ 9000三重四极杆气质联用仪（美国Thermo公司）；SIGMA 3K15冷冻离心机（德国希格玛公司）；IKA RV10旋转蒸发仪（德国艾卡集团）。

1.2 材料与试剂

甲拌磷、氯唑磷、甲拌磷砜、甲拌磷亚砜、对硫磷、水胺硫磷、甲基异柳磷、腐霉利、丙环唑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、哒螨灵、氰戊菊脂、溴氰菊酯、环氧七氯（内标）标准品（100 μg/mL，农业部环境保护科研监测所）；乙腈（分析纯，天津市致远化学试剂有限公司）；乙酸乙酯（分析纯，上海山浦化工有限公司）；丙酮（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

1.3 标准溶液的配制

取14种农药标准品各1支，用丙酮反复转移并定容至10 mL混匀，配制成质量浓度10 μg/mL的标准储备溶液，冷藏备用。按照样品前处理方法，提取空白基质溶液，配制质量浓度分别为0.005，0.010，0.050，0.100和0.500 μg/mL的基质混合标准工作溶液；分别吸取1.0 mL的上述混合标准工作溶液，准确加入20 μL质量浓度5 μg/mL的环氧七氯内标溶液。

1.4 样品提取液的制备

将样品剪碎研磨后备用，称取10 g（精确至0.01 g）制备后样品于50 mL离心管中，加入10 mL乙腈和1 g氯化钠，高速匀浆1 min，按4 200 r/min 离心5 min，取5 mL上清液到含有885 mg硫酸镁、150 mg PSA、15 mg GCB离心管中，涡旋1 min；按4 200 r/min 离心5 min，取2 mL上清液氮气吹至近干，加入1 mL乙酸乙酯复溶，加入20 μL 10 μg/mL的内标溶液环氧七氯，混匀后上机测定。

1.5 色谱条件

色谱柱，TG-5SILMS柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口280 ℃；进样量1 μL，不分流进样。升温程序：90 ℃保持1.5 min，以25 ℃/min升温至180℃保持1 min，以5 ℃/min升温至280 ℃，以10 ℃/min升温至300 ℃，保持2 min；载气，高纯氦气（纯度99.999%），流速1.0 mL/min。

1.6 质谱条件

电离方式采用电子轰击（EI）；电离能量70 eV；传输线温度280 ℃；离子源温度280 ℃；采用多反应监测（SRM）方式；溶剂延迟时间5 min。

2 结果与分析

2.1 前处理及质谱条件的优化

2.1.1 前处理优化

黑桑椹干中色素、有机酸、糖等干扰物质含量较高，试验证明，QuEChERS法操作简便，PSA可有效吸附样品中有机酸、脂肪酸和糖等物质；GCB对色素、甾醇、芳香烃具有较好吸附作用，可明显降低基质效应。

2.1.2 质谱条件优化

14种农药的气相色谱-质谱总离子流图见图1，其中9（丙环唑），11（氯氟氰菊酯），13（氰戊菊脂）和14（溴氰菊酯）号组分各分离出2组峰形，互为同分异构体。由图1可知，经条件优化，14种组分在31 min前全部出分，且各组分峰形较好，分离效果好。分别选择质量数较大、响应较高的碎片离子进行二级碎裂，采用仪器软件Auto SRM优化碰撞电压，建立质谱检测条件，母离子、子离子及最佳碰撞能量见表1。

图1 14种农药的气相色谱-质谱总离子流图

表1 14种农药SRM参数

2.2 检测方法的线性范围与检出限

用空白基质将农残混合标准溶液稀释成0.005~0.5 μg/mL的标准系列工作溶液，以浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标进行线性拟合。结果表明，在0.005~0.5 μg/mL的范围内各组分线性关系良好，相关系数r在0.998 1以上，以3倍信噪比（S/N）计算检测方法的检出限，结果见表2，各组分检出限在0.001~0.005 mg/kg，低于国家标准的限量值[13]。

表2 14种农残线性范围和检出限

2.3 方法的加标回收率

为验证方法的准确性，向黑桑椹干空白样品中添加14种农药混合标准溶液，添加浓度分别为0.1，0.5和1.0 mg/kg，按照前处理方法进行处理，每个水平重复5次，结果见表3。

表3 14种农残加标回收率和相对标准偏（n=5）

由表3可知，加标量0.1 mg/kg时，回收率为85.3%~96.7%，相对标准偏差SRSD为5.2%~8.1%；加标量0.5 mg/kg时，回收率为86.8%~102.1%，相对标准偏差SRSD为5.3%~8.2%；加标量1.0 mg/kg时，回收率为88.9%~104.6%，相对标准偏差SRSD为5.2%~8.1%。结果表明，3组加标样品的回收率均在80%~120%之间，相对标准偏差SRSD均不大于10%，且加标浓度越高，回收率越好，由此可知，该方法可靠，重现性较好。

2.4 方法的精密度

称取10 g（精确至0.01 g）制备后样品，加入0.1 μg/mL标准溶液，同1.3小节的方法前处理后加入内标混匀上机，平行测定6次，用于验证方法的精密度，结果见表4，该方法测定的14种农残的精密度范围为0.9%~2.3%，该方法精密度较好。

表4 精密度（n=6）

3 结论

针对黑桑椹干建立14种农药残留的检测方法，并进行方法学论证，结果表明，该方法可在31 min内完成检测，在0.005~0.5 μg/mL范围内各组分具有良好的线性关系，相关系数r在0.998 1以上；方法检出限为0.001~0.005 mg/kg；在3个不同浓度的添加水平下，回收率为85.3%~104.6%，相对标准偏差SRSD为5.2%~8.2%，精密度为0.9%~2.3%。因此，该方法操作简便、快速、灵敏度高、精密度好，适合进行黑桑椹干中14种农药残留的快速检测，该方法的建立，不仅对黑桑椹干中农药残留的检测具有一定应用价值，还可为其他农产品中农药残留检测提供技术参考。