儿童Hp感染相关性胃炎miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg水平监测与疗效的相关性

张静 李常娟 邢雅杰

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染是慢性胃炎的主要患病原因［1］，目前，临床研究主要以成年人胃炎感染为主［2⁃3］，关于儿童胃炎报道较少。新近研究［4］指出成人人群的Hp 感染多在儿童期获得，预防和根除儿童Hp 感染可减少成人期相关疾病的发生。资料显示，微小RNA⁃146a（mi⁃croRNA⁃146a，miR⁃146a）被证实参与炎症反应、细胞内信号传导和对细菌的应答等多种生物学活动，与儿童哮喘的Hp 感染密切相关［5］。C 反应蛋白（Creactive protein，CRP）与白蛋白（Albumin，ALB）比值（CRP/ALB）是评估炎症反应的标志物，与炎症程度间存在良好线性关系［6］。但其在Hp 感染相关性胃炎中的变化情况尚未明确。报道［7］指出，辅助性T17 细胞（T helper cell 17，Th17）与调节性T 细胞（T regulatory cell，Treg）的平衡为人体重要免疫防御机制，Hp 感染性胃溃疡患者胃黏膜形态损害可能与Th17/Treg 细胞失衡有关，对其进行监测可辅助评价胃黏膜损害情况。本研究尝试探讨miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平监测与儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的相关性。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选 取2017年1月至2020年1月本院80 例Hp感染相关性胃炎患儿，其中男51 例，女29 例；年龄12～16 岁，平均（14.85±0.82）岁。纳入标准：①符合慢性胃炎诊断标准［8］；②均经13C 尿素呼气试验确诊为Hp 感染；③年龄12～16 岁；④对本研究药物无禁忌；⑤无其他消化系统疾病；⑥患儿监护人知晓本研究，已签署同意书。排除标准：①血液系统疾病患儿；②恶性肿瘤患儿；③自身免疫性疾病患儿；④神经系统疾病患儿；⑤脏器功能不全者；⑥慢性乙型肝炎、肺结核等传染性疾病患儿；⑦肺部感染、泌尿系感染等其他部位感染患儿。本研究经医院伦理委员会批准同意。

1.2 方法

治疗方法：所有患儿均行三联疗法治疗，口服奥美拉唑（辽宁亿帆药业有限公司，国药准字H20064652）0.6～1.0 mg/Kg·d，分2 次（餐前口服），口服阿莫西林（涛生制药有限公司，国药准字H34022208）50 mg/（kg·d），分2 次（最大剂量1 g，2 次/d），口服克拉霉素（宁夏启元国药B）有限公司，国药准字H20103113）15～20 mg/（kg·d），分2次（最大剂量0.5 g，2 次/d）。持续治疗2 周，停药1月后评估疗效，参照《中药新药临床研究指导原则》制定评估标准：分为：治愈、显效、有效、无效，将治愈、显效、有效患儿纳人疗效良好组，将无效患儿纳入疗效不良组。

实验室指标检测方法：采集所有患儿入组当天（治疗前）空腹外周静脉血6 mL，取其中2 mL 血液标本，离心处理后取血清，采用实时荧光免疫聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）检测血清miR⁃146a 水平，RNA 提取试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司，逆转录试剂盒购自美国Pro⁃mega 公司，PCR 试剂盒购自德国Qiagen 公司，检测操作均由专业人员严格按照试剂盒说明书完成，应用公式2⁃ΔΔct计算miR⁃146a 相对表达水平。取2 mL 血液标本，离心处理后取血清，采用OTA⁃400 型全自动生化分析仪（购自沈阳万泰医疗设备有限责任公司）检测血清CRP、ALB 水平，并计算CRP/ALB 水平。取2 mL 血液标本，采用贝克曼Coulter Epics XL 型流式细胞仪测定外周血Th17、Treg 表达情况，并计算Th17/Treg比值。

1.3 观察指标

①两组临床资料、miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平，临床资料包括性别、年龄、病程，分析Hp 感染相关性胃炎患儿疗效影响因素。②分析miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的预测价值。

1.4 统计学方法

数据处理采用SPSS 22.0 软件，计数资料以n（%）描述，采用χ2检验；计量资料以（±s）描述，两组间比较采用独立样本t检验，相关性分析采用Spearman 相关系数模型，通过Logistic 进行多因素回归分析，预测效能分析采用受试者工作特征（ROC）曲线，获取曲线下面积（AUC），不同预测方案间曲线下面积比较采用DeLong 检验，联合预测实施Logistic 二元回归拟合，获得返回预测概率logit（p），将其作为独立检验变量进行ROC 分析，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同疗效患者临床资料

本研究80 例Hp 感染相关性胃炎患儿治疗2 周后，治愈40 例，显效15 例，有效10 例，无效15 例，疗效良好组65 例，疗效不良组15 例。不同疗效患者病程相比，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 不同疗效患者临床资料对比［n（%）］Table 1 Comparison of clinical data of patients with different curative effects［n（%）］

2.2 不同疗效患者miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平

疗效良好组miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg水平均低于疗效不良组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 不同疗效患者miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对比（±s）Table 2 Comparison of miR⁃146a，CRP/ALB，Th17/Treg levels in patients with different therapeutic effects（±s）

表2 不同疗效患者miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对比（±s）Table 2 Comparison of miR⁃146a，CRP/ALB，Th17/Treg levels in patients with different therapeutic effects（±s）

组别疗效良好组疗效不良组t 值P 值n 65 15 miR⁃146a 3.25±0.87 4.84±1.16 5.977<0.001 CRP/ALB 2.58±0.76 3.26±1.07 2.880 0.005 Th17/Treg 0.32±0.09 0.68±0.17 11.553<0.001

2.3 儿童Hp 感染相关性胃炎疗效影响因素

以儿童Hp 感染相关性胃炎疗效为因变量（疗效良好=0，疗效不良=1），将表1、2 中差异有统计学意义因素作为自变量，纳入Logistic 回归分析，结果显示病程、miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平均为儿童Hp 感染相关性胃炎疗效影响因素（P<0.05）。见表3。

表3 儿童Hp 感染相关性胃炎疗效影响因素Table 3 Factors influencing the curative effect of gastritis associated with Hp infection in children

2.4 miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的预测价值

绘制miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的预测价值的ROC曲线，显示联合预测AUC 最大，且>0.9，具有良好预测效能，最佳敏感度、特异度分别为86.67%、95.38%（P<0.05）。见表4，图1。

图1 各指标预测疗效的ROC 曲线Figure 1 The ROC curve of each index predicting curative effect

表4 miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平对儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的预测价值Table 4 The predictive value of miR⁃146a，CRP/ALB，Th17/Treg levels，and pathological changes under gastroscopy on the curative effect of children with Hp infection⁃related gastritis

3 讨论

慢性胃炎为临床最常见消化系统疾病之一，其患病率高居各种胃病首位［10］，大量研究［11⁃12］证实，长期反复的Hp 感染可导致胃黏膜萎缩、肠上皮化生，甚至发生恶性病变。因此，尽早给予有效治疗对改善Hp 感染相关性胃炎患者预后至关重要，而治疗过程中准确评估病情变化对调整治疗干预措施具有重要指导价值。

本研究发现，奥美拉唑三联疗法治疗疗效不良Hp 感染相关性胃炎患儿病程明显高于疗效良好患儿，进一步经多因素分析发现病程≥2年也是儿童Hp 感染相关性胃炎疗效的独立危险因素之一。Hp 细胞毒素能破坏胃黏膜完整性，随着患儿病程延长，Hp 感染引起的胃黏膜破坏越严重，从而增加治疗难度，预后越差。

本研究还发现，疗效不良患儿miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平均高于疗效良好患儿，提示上述指标均与患儿疗效有关。miR⁃146a 是miR⁃146家族成员，其基因编码位于人染色体5q33.3 处，可通过抑制核因子⁃κB 通路活化发挥抗炎作用［13］。国内相关研究［14］发现，肺炎患儿外周血miR⁃146a 水平明显升高，其表达水平与炎性因子肿瘤坏死因子⁃α、白介素⁃6、白介素⁃8 呈正相关，可能通过上调炎性因子表达参与疾病进展。国外一项研究［15］显示，miR⁃146a 能够调节受体细胞的抗感染能力，使其更容易受病原体侵袭发生感染。据此笔者推测miR⁃146a水平升高可促进炎性因子释放、抑制受体细胞的抗感染能力，从而促进Hp 感染相关性胃炎患儿病情加重，最终影响治疗效果。研究［16］显示，Hp 细胞壁上存在脂多糖，具有诱导炎症细胞分泌炎性因子的作用，可引发胃黏膜发生炎症反应损伤。CRP 是反映炎症状态的敏感性指标，有文献［17］证实，CRP/ALB 可较好预测感染性疾病的发生，且其预测效果优于单纯使用CRP、降钙素原等常规炎性标志物。Th17 与Treg 的动态平衡是维持机体免疫防御能力的重要机制之一，其中Th17 细胞是T 淋巴细胞亚群的一员，具有诱导炎症反应的作用，其表达增加可促进白细胞介素17、白细胞介素22 等多种炎性因子的产生，且能促使炎性因子在炎症部位聚集，加重炎症损伤［18⁃19］。而Treg 细胞是一种具有免疫抑制活性的调节性T 细胞，具有抑制炎性因子分泌的作用［20］。CRP/ALB、Th17/Treg 水平升高均提示患儿局部炎症反应加重，对胃黏膜的损伤增加，病情越严重，因此治疗效果越差。

本研究进一步通过ROC 曲线分析，发现miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平在预测儿童Hp 感染相关性胃炎疗效方面均具有一定价值，尤其是各指标联合预测的AUC 达到0.964，预测价值较高，可为临床预估患儿治疗效果提供重要参考，从而指导治疗方案的调整。

综上可知，Hp 感染相关性胃炎患儿miR⁃146a、CRP/ALB、Th17/Treg 水平越高，疗效越差，早期检测各指标水平可辅助临床预测患儿疗效。本研究存在样本量较少的不足，研究结果可能存在一定误差，仍需通过大样本研究进一步验证。