玖玟枳椇纯露对CCl4致小鼠急性肝损伤的预防作用

谷崇高 周亚伟

[摘           要]  目的：采用腹腔注射0.12 %的四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，造成小鼠急性肝损伤模型，观察玖玟枳椇纯露对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的预防作用。方法：60只小鼠随机分组，分为空白组、模型组、双环醇片组（200 mg/kg）及玖玟枳椇纯露高剂量组（6 g生药/kg）、中剂量组（3 g生药/kg）、低剂量组（1.5 g生药/kg），每组10只，0.2 mL/10g灌胃给药双环醇，0.3 mL/10 g灌胃给药玖玟枳椇纯露，每天一次，连续6天，第6天给药后的8 h进行建模，腹腔注射0.12 %四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，建模后禁食15 h，再给药一次，药后1 h取血，分离血清测定ALT和AST。结果：与空白组比较，模型组小鼠血清ALT和AST显著升高。与模型组比较，双环醇片组和玖玟枳椇纯露高剂量组小鼠血清中ALT和AST显著降低，有效。结论：玖玟枳椇纯露具有预防四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的作用。

[关    键   词]  玖玟枳椇纯露;实验;预防作用

[中图分类号]  G642                    [文献标志码]  A                  [文章编号]  2096-0603（2021）42-0235-02

一、实验材料

（一）药物与试剂

玖玟枳椇纯露，规格：10g生药/50mL，批号：20181125，有效期至：20201125，厂家：山西保仁堂生物科技有限责任公司。

CCl4，规格：500 mL，批号：20181102，有效期至：无，厂家：北京化学试剂厂。

双环醇片，规格：25 mg/片×18片，批号：20190514，有效期至：2022.04，厂家：北京协和药厂。

谷草转氨酶（AST）试剂盒，规格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批号：20191127，有效期至：20201126，厂家：中生北控生物科技股份有限公司。

谷丙转氨酶（ALT）试剂盒，规格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批号：20191016，有效期至：20201015，厂家：中生北控生物科技股份有限公司。

（二）实验动物

昆明种小鼠60只，SPF级，雌雄各半，体重18～22 g。购自斯贝福（北京）生物科技有限公司，许可证号：SCXK（京）2019-0010。

（三）实验仪器

半自动生化仪，型号：威图300，厂家：荷兰威图公司。

离心机，型号：TDL-5-A，厂家：上海安亭科学仪器厂。

电子天平，型号：DT-500A，厂家：中国轻工业总公司常熟市衡器厂。

分析天平，型号：FAE100，厂家：梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司。

二、实验方法

（一）药物剂量设置依据

玖玟枳椇纯露剂量设置依据

根据药品说明书，人的临床用量：2瓶/日，即100 mL/日。计算出人临床剂量为：20 g生药/70 kg=0.3 g生药/kg。

根据《中药新药研究指南》中规定，小鼠剂量为人临床量的5～20倍。所以小鼠采用人临床剂量的20倍，10倍，5倍设置为高，中，低剂量组，因此，高剂量为0.3 g生药/kg×20=6 g生药/kg，中剂量为3 g生药/kg，低剂量为1.5 g生药/kg。

（二）实验方法

取清洁级昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重18～22 g，随机分为空白对照组、模型对照（CCl4）组、双环醇片（200 mg/kg）组、玖玟枳椇纯露高（6 g生药/kg）、中（3 g生药/kg）、低（1.5 g生药/kg）剂量组，共6组，每组10只。每天按照0.2 mL/10 g灌胃相应受试物，空白组和模型组灌胃相应体积蒸馏水。给药第6天给药后8 h，除空白对照组外，其余各组小鼠按0.1 mL/10 g体积腹腔注射0.12 %的CCl4玉米油溶液造模，空白组给相应体积生理盐水，造模后禁食不禁水，造模后15 h进行末次给药，给药后1 h后眼眶取血，血液静置30 min，在3000 r/min离心15 min，取上清测定血清ALT、AST酶的含量。

（三）测定方法

1.试剂准备

双液体试剂，使用前室温稳定30min。

2.检测步骤

（1）基本操作步骤：（如下表1）

（2）用威图300半自动生化仪测定：开机→清洗→试剂空白→校准→质控→样品检测。

（3）校准：建议使用试剂盒配套的校准品，使用线性法校准，校准周期为2天。

（4）检测结果的计算：生化分析仪会自动给出检测结果。

（四）统计学方法

数据以均数±标准差（x±SD）表示，方差齐性检验运用F检验，组间比较运用t检验或方差分析。

与空白组比较，模型组小鼠血清中ALT显著升高，与模型组比较，双环醇片组小鼠血清中ALT显著降低。与模型组比较，玖玟枳椇纯露高、中、低剂量组小鼠血清中ALT显著降低。

与空白组比较，模型组小鼠血清中AST显著升高，与模型组比较，双环醇片组小鼠血清中AST显著降低。与模型组比较，玖玟枳椇纯露高、中、低剂量组小鼠血清中AST显著降低。

三、结论

玖玟枳椇纯露具有预防四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的作用。

参考文献：

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◎编辑 张 慧