HB-EGF在宫颈鳞状上皮内病变及宫颈癌中的表达情况*

赵志敏，孔继光，林晓凤，林少香

广东省深圳市龙岗区妇幼保健院：1.检验科；2.病理科，广东深圳 518000

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康，探讨与其发生、发展有关的分子标志物对宫颈癌的早期诊断及治疗尤为重要。肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)作为表皮生长因子家族成员之一，已被证实在乳腺癌、胃癌等多种肿瘤中高表达[1-3]，HB-EGF通过提高肿瘤细胞的变形转移能力,降低细胞间黏附力及诱导上皮间质转化等多种途径来促进肿瘤的发生与发展[4]，但目前其在宫颈癌中的研究较少。本研究通过检测并对比HB-EGF在宫颈炎、宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及宫颈癌组织中的表达情况，探讨其与宫颈癌发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年7月至2020年6月本院病理科保存的组织标本为研究对象，包括宫颈癌组织标本83例，HSIL组织标本239例，LSIL组织标本245例，宫颈炎组织标本150例。入选标本均由病理科2名具有高级职称的医师，采用双盲阅片法进行判读。本研究获本院医学伦理委员会批准。

1.2方法 石蜡标本切片，厚度4 μm，利用Envision免疫组织化学法检测HB-EGF在宫颈炎、LSIL、HSIL及宫颈癌组织中的表达情况。二甲苯、中性树胶、显色试剂盒、二抗、苏木素复染剂等检测试剂购自瑞士罗氏公司；一抗购自英国Abcam公司，按1∶100稀释。所有实验步骤均严格按照试剂盒说明书进行。

1.3结果判定 细胞中可见棕黄色颗粒分布判定为阳性细胞，以染色强度结合阳性细胞百分比综合计分。染色强度以多数细胞呈现的染色情况计分：基本不着色为0分，淡着色为1分，着色适中为2分，深着色为3分。阳性细胞百分比计分：0%～5%为0分，>5%～25%为1分，>25%～50%为2分，>50%～75%为3分，>75%为4分。染色强度与阳性细胞百分比得分的乘积：0分计为-，1～4分计为+，5～8分计为++，9～12分计为+++，将-、+视为阴性，++、+++视为阳性。

1.4统计学处理 采用SPSS23.0软件进行数据分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

HB-EGF在宫颈炎、LSIL、HSIL及宫颈癌4种组织的上皮、部分间质及炎症细胞中均有表达，但在上皮细胞中的表达高于间质细胞，主要表达于细胞核内。HB-EGF在宫颈炎组织的上皮基底层及部分间质细胞中少量表达，而在LSIL、HSIL及宫颈癌组织的上皮及间质细胞中表达增加，见图1。HSIL及宫颈癌组织中HB-EGF的阳性率明显高于LSIL与宫颈炎组织，LSIL组织中HB-EGF的阳性率明显高于宫颈炎组织，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 4种宫颈组织中HB-EGF的表达情况

注：A为宫颈炎组织；B为LSIL组织；C为HSIL组织；D为宫颈癌组织。

3 讨 论

HB-EGF是一种相对分子质量为20×103～22×103的糖蛋白，起初以膜结合蛋白的形式存在，称为HB-EGF前体(proHB-EGF)，经过多种金属蛋白酶的水解作用，膜外成熟肽段脱落形成游离HB-EGF(sHB-EGF)，sHB-EGF与表皮生长因子受体结合并被激活，刺激邻近细胞的生长和增殖[5]。sHB-EGF是多种细胞的有丝分裂原，包括上皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞等，主要以自分泌和(或)旁分泌的方式促进上述细胞的增殖、分化、迁移[6-8]。HB-EGF在人体组织中广泛表达，尤其是在肺、心脏、骨骼肌和脑组织中，其参与了人体多种生理过程，包括组织分化、皮肤损伤修复及妊娠等，同时也在许多病理过程中发挥着重要作用，如心脏肥大、肺动脉高压、动脉粥样硬化及肿瘤形成等[9-13]。研究证实，HB-EGF在乳腺癌、胃癌、卵巢癌、大肠癌、神经母细胞瘤、甲状腺癌等多种类型的肿瘤中高表达，且高表达HB-EGF的患者预后较差，考虑HB-EGF主要通过诱导肿瘤细胞的上皮间质转化，增强肿瘤细胞的侵袭及转移能力，从而促进肿瘤的进展[14-17]。因此，通过下调HB-EGF表达，抑制表皮生长因子受体功能等来抑制肿瘤发展已被越来越多的学者关注，且相关研究已逐渐开展并证实具有可行性[18-19]。

本研究比较了HB-EGF在宫颈炎、LSIL、HSIL及宫颈癌4种组织中的表达情况，结果显示，HB-EGF在宫颈炎、LSIL、HSIL、宫颈癌组织中的表达呈逐渐升高的趋势，HSIL及宫颈癌组织中HB-EGF的阳性率明显高于LSIL与宫颈炎组织，LSIL组织中HB-EGF的阳性率明显高于宫颈炎组织。HB-EGF在4种组织中的免疫组织化学染色结果清晰，可为宫颈鳞状上皮内病变及宫颈癌的诊断提供更加客观的依据，有望成为形态学诊断的有力补充。本研究的不足之处为仅在蛋白水平证实了HB-EGF在宫颈癌组织中高表达，后续将扩大样本量进一步从分子水平证实研究结果的可靠性，并对HB-EGF促进宫颈癌发生、发展的机制进行深入探讨。

综上所述，HB-EGF在HSIL及宫颈癌组织中高表达，可能在宫颈鳞状上皮内病变及宫颈癌的诊断中具有一定价值，其在宫颈癌发生、发展中的作用有待进一步研究。