复方甘草含片与复方甘草片的药效学比较研究

薄双琴，景明，朱英布，李宗民，王静

(1.甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000；2.甘肃祁连山制药股份有限公司，甘肃 酒泉 735000)

复方甘草片是临床应用较广的止咳化痰药，其止咳化痰平喘效果显著。复方甘草片中含有甘草流浸膏、阿片粉、樟脑、八角茴香、酒石酸锑钾等成分。复方甘草片组分中的甘草浸膏为保护性镇咳祛痰剂；阿片粉有较强的镇咳作用；樟脑及八角茴香油能刺激支气管黏膜，反射性地增加腺体分泌，稀释痰液，使痰易于咳出[1]。含服复方甘草片，可使药片在口腔中溶化，有效成分易覆盖在发炎的咽部黏膜，止咳作用起效快。同时，阿片的有效成分经口腔黏膜吸收后，不经肝脏的首过效应而直接进入血液，减少了有效成分的损失，避免了吞服复方甘草片中阿片粉的肝脏代谢，减轻了药物的不良反应，如恶心、口干、便秘等[2]。大多研究表明，复方甘草片的含服效果较好，不良反应较少[3-7]。但是，目前生产的复方甘草片为素片，药片中含阿片粉，导致素片具阿片粉特殊臭气，影响服用，从而影响药物的疗效；其次，处方中含八角茴香油、樟脑，属易挥发物质，贮存期间成分易散失，也会影响疗效。复方甘草含片是近年来对复方甘草片剂型进行改良的一种新制剂，其可改善人们对药物的顺应性，最大限度地发挥药物疗效，同时也能够提高复药物稳定性。本文通过比较复方甘草片与复方甘草含片止咳、化痰、平喘以及抗炎作用，为复方甘草含片的临床应用提供理论依据。

1 材料

1.1 实验动物 SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，动物合格证号：SCXK(甘)2015-0002-0001382；SPF级豚鼠，雌雄各半，体重180～210 g，均由甘肃中医药大学科研实验中心提供。

1.2 主要药物及试剂 复方甘草片(甘肃莫高制药厂，批号：1903181)；复方甘草含片(甘肃祁连山药业有限公司，批号：1811070)；生理盐水(四川科伦药业有限公司，规格250 mL：2.25 g，批号：N20101507B)；0.1%磷酸组胺(Bioruler，批号：3410)；二甲苯(成都金山化学试剂有限公司，批号20190906)；酚红(北京索莱宝公司，批号：1211C031)；氨水(北京化工厂，批号:20141008)。

1.3 主要仪器设备 JWC-201D型超声雾化器(鞍山市同信医用仪器厂)；Benchmark Plus酶标仪(Bio RAD公司)；小鼠/豚鼠熏蒸系统(自制)；HX502T电子天平(慈溪市天东衡器厂)。

2 方法

2.1 小鼠止咳实验 取昆明种雄性小鼠30只，随机分为3组，即空白对照组、复方甘草含片组及复方甘草含片组(10 g·kg-1)，每组各10只。各组给予相应的药物混悬液(20 mL·kg-1)，空白对照组给予等容积的纯水，每天1次，连续7 d，末次给药1 h后，将小鼠置于密封的透明容器中，用超声雾化器通过连接容器的软管喷入雾化氨水20 s后，立即取出小鼠放在另一个干净容器中，记录小鼠咳嗽潜伏时间3 min内咳嗽次数(小鼠腹肌剧烈收缩，肩背耸动，伴有张嘴为咳嗽指标)。以用药后咳嗽潜伏期(s)、3 min的咳嗽次数为评价指标，评价药物有无止咳作用。

2.2 小鼠气管段酚红祛痰实验[8-9]取昆明小鼠30只，分为3组，每组10只，雌雄各半，空白对照组(生理盐水0.4 mL/20 g)、复方甘草片组10 g·kg-1、复方甘草含片组10 g·kg-1，容量按20 mL·kg-1，连续5 d。末次给药30 min后腹腔注射0.5%酚红溶液0.5 mL，30 min后处死小鼠，剥离颈部气管周围组织，甲状软骨下缘及气管分支处用小血管夹夹住，然后剪下甲状软骨下至气管分支处的一段气管，将各气管段放入预先盛有4 mL、5% NaHCO3溶液试管中静置1 h，将试管中上清液于酶标仪558 nm处测量并记录OD值(OD值大小表示酚红排泌量的多少，OD值大表示酚红排泌量多)。

2.3 豚鼠磷酸组胺引喘平喘实验 将40只豚鼠于密闭容器内，连接超声雾化器，将2 mg·mL-1磷酸组胺注入雾化罐内，持续熏蒸20 s，观察豚鼠从接受喷雾到发生抽搐跌倒的引喘潜伏期，选择150 s内出现哮喘的豚鼠30只，随机分为3组，即空白对照组、复方甘草片组以及复方甘草含片组(6 g·kg-1)，各组灌胃给予相应的药物混悬液(20 mL·kg-1)；空白对照组予等容积纯水灌胃。均每天1次，连续7 d。末次给药后30 min，将豚鼠放入喷雾装置内，按同样条件分别喷雾加入磷酸组胺，记录豚鼠自喷雾开始出现哮喘的潜伏期(以第一次抽搐跌倒的时间作为潜伏期)，引喘潜伏期超过5 min者，以5 min计[10]。

2.4 小鼠耳郭肿胀实验 取昆明种小鼠30只，随机分成空白对照组(生理盐水)，复方甘草片(10 g·kg-1)、复方甘草含片组(10 g·kg-1)，每组10只。连续7 d灌胃给药，并于末次给药30 min后用二甲苯致炎小鼠耳郭[11]。将二甲苯0.05 mL涂于小鼠右耳正反两侧致炎，左耳做对照。致炎2 h后将小鼠脱颈椎致死，沿耳郭基线剪下两耳，打孔器在左右耳同一部位打下圆耳片，电子天平称重。计算耳肿胀度和肿胀抑制率。

肿胀抑制率(%)=(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)/空白对照组肿胀度×100%

3 实验结果

3.1 小鼠止咳实验结果 与空白对照组相比，复方甘草含片及复方甘草片均可延长小鼠咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数(P<0.01或P<0.05)；与复方甘草片组相比，复方甘草含片对小鼠咳嗽潜伏期的延长效果以及减少咳嗽次数的趋势更显著(P<0.05)。

3.2 小鼠气管段酚红祛痰实验结果 与空白对照组相比，复方甘草含片及复方甘草片的OD值明显增大(P<0.01)，表示复方甘草含片及复方甘草片均可明显增加酚红排泌量；复方甘草含片比复方甘草片的OD值明显增大(P<0.01)，表示复方甘草含片可明显增加酚红排泌量。说明复方甘草含片及复方甘草片均具有化痰作用，但复方甘草含片的化痰作用更明显。

表2 各组小鼠OD值

3.3 豚鼠磷酸组胺引喘平喘实验结果 与空白对照组相比，复方甘草片以及复方甘草含片均可明显延长豚鼠引喘潜伏期(P<0.01)，减少抽搐跌倒的豚鼠数量，但复方甘草含片延长豚鼠引喘潜伏期，减少抽搐跌倒的豚鼠数量更明显(P<0.01)。

表3 各组豚鼠引喘潜伏期及抽搐跌倒数

3.4 小鼠耳郭肿胀实验结果 复方甘草含片以及复方甘草含片较空白对照组对小鼠耳郭肿胀的抑制率明显增高(P<0.01)，复方甘草含片组的耳郭肿胀度与复方甘草含片组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)，说明复方甘草含片的抗炎效果更明显。

表4 各组小鼠耳郭肿胀度及肿胀抑制率

4 讨论

咳嗽、咳痰、喘息是呼吸系统疾病常见的临床症状，而且在呼吸系统疾病的发生发展中会伴随炎症的发生，包括鼻腔、咽喉、上呼吸道、下呼吸道、肺部等炎症，主要表现为组织肿胀、发红、发热、分泌物增多、组织周围免疫细胞增多、免疫因子浓度增加[12]。临床上治疗呼吸道感染，主要是根据患者的感染原因，通过改善其咳嗽及咳痰症状达到主要治疗目的。复方甘草片主要用于各种原因导致的咳嗽和咳痰治疗中，以呼吸道感染的治疗最为常见。复方甘草片与复方甘草含片中的主要成分甘草浸膏粉发挥镇咳祛痰的作用。本研究采用气管酚红排泌量测定、氨水致小鼠咳嗽、磷酸组胺引喘、二甲苯致小鼠耳郭肿胀法来评价并比较复方甘草片和复方甘草含片的止咳、化痰、平喘以及抗炎作用。研究结果表明，复方甘草含片及复方甘草片均可延长小鼠咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数，复方甘草含片对小鼠咳嗽潜伏期的延长效果以及减少咳嗽次数的趋势更显著。复方甘草含片比复方甘草片增加酚红排泌量更多，显示复方甘草含片明显的化痰作用。复方甘草含片可更明显的延长豚鼠引喘潜伏期，减少豚鼠抽搐跌倒的数量，表明复方甘草含片较复方甘草片的平喘作用更强。在二甲苯致小鼠耳肿胀实验中，复方甘草含片以及复方甘草片均可抑制小鼠耳郭肿胀，但复方甘草含片的抑制率更高，说明复方甘草含片的抗炎效果更明显。综上所述，复方甘草含片止咳、化痰、平喘以及抗炎作用更明显，治疗效果更好，并且改善了患者对药物的顺应性。本实验通过比较复方甘草含片以及复方甘草片的止咳、化痰、平喘以及抗炎作用，为复方甘草含片投入临床使用提供了科学依据，对复方甘草含片的其他药理作用及不良反应还需进一步的研究与观察。